拉贝洛尔片联合平肝降压方加减对原发性高血压患者高迁移率族蛋白B1、血红素氧合酶1及巨噬细胞清道夫受体1的影响Δ

郭晓双，李秋艳，曹文彬，李岩峰，刘硕然

(1.开滦总医院药剂科，河北 唐山 063001；2.唐山市协和医院药剂科，河北 唐山 063000；3.开滦总医院心内科，河北 唐山 063001)

高血压是一类慢性非传染性疾病，具有遗传性，同时受药物、吸烟、饮食习惯和精神应激的影响，症状缺乏特异性，常见症状包括头晕、头痛和疲劳等，严重时造成靶器官功能性或器质性损害，易导致脑卒中、心脏病及肾衰竭等致残、致死性疾病，严重危害人类的健康[1-2]。中医学中并无高血压之病名，但根据该病的主要症状及其发展过程，将其归属于“头痛”“眩晕”和“肝风”等病症范畴；此外，根据《中药新药临床研究指导原则：试行》可将此病分类为肝火亢盛、痰湿壅盛、阴虚阳亢和阴阳两虚4种证型，其中肝火亢盛较为常见[3-4]。西医对于原发性高血压的治疗常采用药物治疗，常见药物包括利尿剂、钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂及血管紧张素Ⅱ受体阻断剂等[5]。平肝降压方根据张锡纯《医学衷中参西录》中黄连解毒汤、冠心二号加减化裁组方而来，可补益肝肾、滋阴补阳和宁心安神。临床实践证明，确诊高血压后，患者应长期服用降压药，但长期应用会引起不良反应，而基于西药的治疗局限及副作用，中医可发挥自身优势，降压并改善临床症状。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)存在于哺乳动物体内各种细胞，可调控细胞基因转录，为促炎因子，可使机体受到损伤。血红素氧合酶1(HO-1)为血红素降解过程中的起始酶，可经过氧化应激与血红素的诱导增加，进而抵抗氧化损伤。巨噬细胞清道夫受体1(MSR1)为编码人类SRA基因，可与脂蛋白结合，参与脂代谢及炎症反应。近年来，中医在原发性高血压的治疗中积累了较多经验。本研究主要探讨平肝降压方加减联合拉贝洛尔片对原发性高血压患者HMGB1、HO-1及MSR1的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

选取2016年9月至2020年9月开滦总医院收治的146例原发性高血压患者作为研究对象进行前瞻性研究。纳入标准：(1)中医纳入标准，根据《中药新药临床研究指导原则：试行》症状分级量化评分量表，辨证为肝火亢盛型高血压，具有急躁易怒、面红目赤、舌红苔黄、头重足轻、眩晕耳鸣、口干舌燥和脉弦有力等证候；(2)西医纳入标准，符合《中国高血压防治指南(2018年修订版)》[6]中原发性高血压的诊断标准；经三大类常用抗高血压药(血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体阻断剂和钙通道阻滞剂)治疗，但血压控制不良，患者停止服用药时间>2周。排除标准：合并其他系统严重疾病者；过敏体质者；妊娠期、哺乳期妇女。按照随机数字表法将患者分为拉贝洛尔组和联合治疗组，每组73例。拉贝洛尔组患者年龄21～75岁，联合治疗组患者年龄22～74岁。两组患者的一般资料均衡可比，见表1。本研究所有患者及其家属均知情且同意，已获得医院伦理委员会批准，批准号为(2016)伦审第(42)号。

表1 两组患者的基线资料比较

1.2 方法

两组患者在治疗期间均需注意适度运动，合理搭配饮食结构，以清淡食物为主，戒烟酒。拉贝洛尔组患者采用采用双盲模拟单药治疗，使用焦糖、苦瓜和麦芽煎煮取汁，制作中药汤剂安慰剂，并服用拉贝洛尔片(江苏迪赛诺制药有限公司，国药准字H32026120，50 mg)进行治疗，1次50 mg，1日2次。联合治疗组患者在使用拉贝洛尔的基础上加用平肝降压方进行治疗，组方：栀子10 g，天麻、钩藤、杜仲、牛膝、柴胡、茯神、白芍、菊花和夏枯草各12 g，夜交藤15 g，石决明、桑寄生各20 g；胸闷、胸痛者加红花、赤芍和薤白各20 g，便秘者加芒硝、生大黄各6 g，乏力者加党参、黄芪各15 g，口苦者加郁金、黄芩和龙胆草15 g(所有中药材由郑州仁济中药房提供)；水煎服，取汁600 ml，分早晚2次口服。两组患者均持续治疗4个月。

1.3 观察指标

(1)血压指标：采用标准水银柱血压计检测患者收缩压(SBP)、舒张压(DBP)水平，于每日上午8:00—10:00静坐10 min后测量，测量1次后，嘱患者平静休息5～10 min后测量第2次，取平均值。(2)采集两组患者治疗前、治疗中点(治疗2个月)和治疗终点清晨空腹静脉血3 ml，离心10 min(3 000 r/min，r=5 cm)，分离上层血清，-80 ℃保存，待用。采集患者检测前24 h内随机尿，使用0.9%氯化钠溶液稀释30倍，保存待用。①肝功能指标：丙氨酸转氨酶(ALT)、丙氨酸转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)采用济南格利特有限公司的全自动生化分析仪检测。②肾功能指标：血肌酐(Cr)、血尿酸(UA)、血尿素氮(UN)及尿微量白蛋白(MAU)含量采用上海玉研科学仪器有限公司的全自动生化分析仪检测。③炎症因子水平：采用酶联免疫吸附法检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。④采用酶联免疫吸附法检测HMGB1、HO-1水平；将剩余血细胞使用淋巴细胞分离液获得外周血单个核细胞，加入TRIzol试剂1 ml吹打混匀得到外周血单个核细胞TRIzol混合液，冰上溶解、提取并纯化RNA，以分光光度计测定RNA的质量和浓度，采用逆转录定量聚合酶链反应检测MSR1水平，MSR1上游引物序列为5′-ACCCCATTGCTGGTTCAAAV-3′，下游引物序列为5′-GGTGAAGAGTGAGTTATCTG-3′；内参U6上游引物序列为5′-TTTTGGTATTGAAACACATTAAGTAAGG-3′，下游引物序列为5′-TGCTATTGAAACACATTAAGTAAGA-3′。(3)中医证候积分：中医证候积分由经过培训且考核合格的同一研究者，采用访谈的方式在治疗前、治疗中点(治疗2个月)和治疗终点时评估，症状体征按症状轻重程度分为无、轻、中及重4级且分别计0、1、3及6分，观察项目分别为舌红苔黄、面红目赤、头痛头晕、少寐多梦和烦躁易怒，计算总分。

1.4 疗效评定标准

显效：患者眩晕、头痛、口赤和便秘等症状完全消失，SBP、DBP等体征明显改善，SBP降低>30 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)，DBP降低>20 mm Hg；有效：患者眩晕、头痛、口赤和便秘等症状部分缓解，SBP、DBP等体征改善，SBP降低10～29 mm Hg、DBP<20 mm Hg；无效：患者眩晕、头痛、口赤和便秘等症状未缓解，DBP、SBP等未达到上述标准；总有效率=(显效病例数+有效病例数)/总病例数×100%。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 血压指标水平比较

两组患者SBP、DBP水平在治疗前的差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗中点、治疗终点，两组患者的SBP、DBP水平明显低于治疗前，且联合治疗组患者明显低于拉贝洛尔组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组患者治疗前后SBP、DBP水平比较

2.2 肾功能指标水平比较

两组患者肾功能指标在治疗前的差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗中点、治疗终点，两组患者的肾功能指标水平均明显低于治疗前，且联合治疗组患者明显低于拉贝洛尔组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 两组患者治疗前后肾功能指标水平比较

2.3 肝功能指标水平比较

两组患者肝功能指标在治疗前的差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗中点、治疗终点，两组患者的肝功能指标水平均明显低于治疗前，且联合治疗组患者明显低于拉贝洛尔组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 两组患者治疗前后肾功能指标水平比较

2.4 炎症因子水平比较

两组患者炎症因子水平在治疗前的差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗中点、治疗终点，两组患者的炎症因子水平均明显低于治疗前，且联合治疗组患者明显低于拉贝洛尔组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表5。

表5 两组患者治疗前后炎症因子水平比较

2.5 血清HMGB1、HO-1和MSR1水平比较

两组患者血清HMGB1、HO-1和MSR1水平在治疗前的差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗中点、治疗终点，两组患者的血清HMGB1、HO-1和MSR1水平均明显低于治疗前，且联合治疗组患者明显低于拉贝洛尔组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表6。

表6 两组患者治疗前后血清HMGB1、HO-1及MSR1水平比较

2.6 中医证候积分比较

两组患者中医证候积分在治疗前的差异无统计学意义(P>0.05)；治疗中点、治疗终点，两组患者的中医证候积分均明显高于治疗前，且联合治疗组患者明显高于拉贝洛尔组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表7。

表7 两组患者不同时间点中医证候积分比较分)

2.7 临床疗效

联合治疗组患者的总有效率为95.89%(70/73)，明显高于拉贝洛尔组的83.56%(61/73)，差异有统计学意义(P<0.05)，见表8。

表8 两组患者治疗效果比较[例(%)]

3 讨论

原发性高血压是临床常见疾病，其首要治疗方法为药物治疗，但常用西药均存在不同程度的不良反应，且单一使用西药治疗效果有限[7]。文献报道，拉贝洛尔是具有α、β受体阻断功效的抗高血压药，可抑制交感神经兴奋，降低机体多巴胺、肾上腺素等因子的分泌和释放，还可通过扩血管等途径增强降压作用[8]。

随着科学技术的发展、医疗改革的进步，中医药凭借经济、安全且有效的优势逐渐被接受。中医认为，高血压的病因多为过度劳累、体质偏盛、饮食失节及情志不畅等，促使机体风火内生、阴阳失调、气血逆乱和脏腑痰瘀交阻，进而导致脾运不顺、浊阴不降、轻窍失养和水谷精微不化，故根据中医辨证论治原则，肝火亢盛型高血压的病机为上实下虚，应以滋补肝肾、清热解毒、清肝除湿和平肝潜阳为基础治疗[9-10]。平肝降压方加减中，天麻熄风定惊，钩藤清热平肝、熄凤止痉，石决明平肝潜阳，三者相须，共为君药，共奏平肝潜阳熄风的功效；桑寄生、牛膝滋补肝肾，共为臣药；夏枯草清肝泻火，白芍养血柔肝敛阴，菊花平抑肝阳、清肝明目，共为佐使药，能增强潜阳滋阴、降低血压的功效[11-13]。现代药理研究结果表明，白芍、牛膝和桑寄生可通过利尿、镇静及扩血管等多种方式达到降压效果[14]，钩藤可对患者体内Ca2+浓度进行调节，使内钙离子的释放受到抑制，且天麻可维持患者血压，使患者的心脏搏动频率减缓，并使外周血管平滑肌细胞得到舒张。研究结果表明，平肝降压方加减具有稳定的降压作用，使心肌纤维化受到抑制，并降低患者血浆内皮素水平，使血管的重构得到延缓，促进肝肾功能的恢复。

研究结果显示，原发性高血压患者体内炎症因子水平显著升高，高血压的发生与炎症因子相互影响，可加速动脉粥样硬化的发生与发展，炎症因子由免疫细胞与相关非免疫细胞分泌[15]。IL-6、TNF-α和hs-CRP是临床常用于检测炎症反应的指标，在炎症反应加剧时，上述指标被不断释放，表达水平显著升高，其水平变化与机体炎症反应程度呈正相关[16]。研究结果发现，hs-CRP是IL-6诱导肝脏合成的急性时相蛋白，其水平在炎症和组织损伤发生后显著升高，且参与血栓形成[17-18]。本研究中，平肝降压方加减联合拉贝洛尔片可有效降低炎症因子水平，减轻机体炎症反应，延缓疾病进展，原因可能为平肝降压方中药物不仅可降压，也有抑制炎症因子的作用，从而能减轻高血压继发病变，促进早日康复。

研究结果表明，HO-1是氧化应激反应的重要指标，氧化应激反应可促进中性粒细胞炎性浸润，增加蛋白酶分泌，使HMGB1、MSR1表达升高。随着对炎症反应在高血压疾病中的作用进行深入研究，发现HMGB1亦参与原发性高血压的发生发展[19]。高迁移率蛋白家族是一类低分子量、非组DNA结合蛋白，HMGB1为HMGB家族的主要成员之一；研究结果发现，HMGB1在原发性高血压患者体内的表达水平显著高于健康人群，推测HMGB1作为炎症因子参与原发性高血压的病理生理过程[20]。本研究中，原发性高血压患者的HMGB1水平与SBP、DBP呈正相关，提示HMGB1可能与高血压存在密切关联，与上述研究结果一致。氧化应激在高血压发生发展中的作用被日益重视，HO-1是氧化应激反应的重要指标之一，其水平升高标志着氧化应激的发生，其对氧化应激反应起着保护作用[21]。本研究中，经平肝降压方加减联合拉贝洛尔片治疗后，患者HO-1水平显著降低，氧化应激反应减弱，使组织损伤得到恢复，进而抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统。研究结果显示，MSR1由11个外显子和10个内含子组成，且位于8号染色体短臂，其与炎症反应密切相关[22]。本研究结果显示，患者的MSR1水平在治疗前后有显著变化，提示其可能参与原发性高血压的发生发展过程，且MSR1高表达是具有预示性的危险因素。

综上所述，平肝降压方加减联合拉贝洛尔片可有效改善原发性高血压患者的血压指标、临床症状，降低HMGB1、HO-1、MSR1水平，治疗效果显著。