人参皂苷对乙二醇诱导大鼠肾脏结石排石的影响分析*

曾 良

南华大学附属第二医院急诊科，湖南省衡阳市 421001

肾结石是泌尿系统的一种较为常见的疾病，目前，其发病风险相对较高，且其治疗后复发的风险也相对较高[1]。临床上通常采用的治疗方式为碎石治疗或者手术治疗，可能会伴有肾脏的损害以及感染的出现。目前，常用的药物，如噻嗪类利尿剂等使用之后的效果并不好，同时还会伴有相应的副作用[2]。与此对比，传统中医药在治疗结石方面有一系列的优势。人参皂苷主要分布于五加科植物人参等植物中，具有多种生物活性[3]。人参皂苷在心脑血管系统反映出良好的抗衰老药理活性，同时还有一定的逆转肿瘤细胞耐药[4]。此外，人参皂苷具有抗结石作用,本文旨在探讨人参皂苷对于以乙二醇诱发大鼠肾结石的预防效果。报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 本研究采用60只6周龄的Sprague-Dawley品系雄性大鼠，每只重量250～300g。购自南华大学校内动物饲养中心，动物实验过程与步骤均遵循南华大学动物饲养中心委员会规定。

1.2 实验试剂及仪器 人参皂苷(景竹生物，货号2342710)，0.75%乙二醇(天津市大茂化学试剂厂，批号20200701)，硝酸银(深圳市博林达有限公司，批号20200624A)，全自动生化分析仪(biobase,鲁械注准20192220157)、石蜡切片机(科迪，KD-2508)、双目显微镜(宝士德，型号54-03002)。

1.3 方法 将实验大鼠按照随机方法分为正常控制组、阴性对照组(安慰剂组)、阳性对照组、不同剂量的实验组六组，每组10只，先分别称体重、抽血液和收集尿液。将六组实验大鼠分别利用耳朵标示及背部标示编号。第1组为正常控制组给正常饮水；第2组为阴性对照组(安慰剂组)给予0.75%乙二醇水，胃灌食淀粉(安慰剂)；第3组为阳性对照组给予0.75%乙二醇水，胃灌食柠檬酸—钾(500mg/d)；第4、5及6组为给予不同人参皂苷剂量的实验组，分别为300mg、600mg和1 200mg。记录实验4周后终止饲养时大鼠体重。

1.4 指标检测 生理代谢笼收集并记录24h尿液样本，第一次在第1周实验开始前，第二次在实验结束后。送交检验其成分，通过全自动生化分析仪分析其数据，检测项目为尿液钙、镁及酸碱值。血液采集时间在第1周实验开始前与结束后，开始前从尾巴抽取血液样本约2ml，结束时以乙醚麻醉方式由心脏采集，采取血液检体约3ml，置于含有肝素之抗凝血生化试管中，送交作血清生化分析。分析检测血BUN、Cr、P、Ca2+及Mg2+含量。取血后处死所有的实验大鼠，收集每只大鼠的两侧肾脏，右侧肾用 10%中性福尔马林固定、石蜡包埋切片，苏木素—伊红染色法染色、光学光显微镜来检视其组织病理变化，测量肾结晶并评估严重程度之分级，采用“主观性半定量计分方式”，0分代表无结晶，1分代表很少结晶，2分代表一些结晶，3分代表很多结晶沉积。

2 结果

2.1 人参皂苷对大鼠尿量及尿生化指标的影响 阴性对照组大鼠24h尿量高于正常控制组，实验组和阳性对照组高于阴性对照组和正常控制组(P<0.05)。在24h尿Ca2+方面进行对比，阴性对照组、阳性对照组、实验组比正常控制组的水平高，且阴性对照组比中剂量、高剂量实验组的含量多(P<0.05)。见表1。

表1 人参皂苷对大鼠尿量及尿生化指标的影响

2.2 人参皂苷对大鼠血生化指标的影响 对比大鼠血BUN、Cr的含量，阴性对照组、低剂量实验组比正常控制组的含量多，阳性对照组、中剂量实验组、高剂量实验组比正常控制组低(P<0.05)，与阴性对照组对比，阳性对照组和实验组下降(P<0.05)。见表2。

表2 人参皂苷对大鼠血生化指标的影响

2.3 人参皂苷对大鼠肾脏指标的影响 在肾脏草酸钙结晶评分方面进行对比，阳性对照组、实验组比正常控制组的含量多，比阴性对照组的含量少(P<0.05)。见表3。

表3 人参皂苷对大鼠肾脏指标的影响

3 讨论

肾结石的高发病率在全球范围内广为流行[5]。肾结石患者的远期肾功能丢失很严重且高风险发展为终末期肾病，因此防治肾结石至关重要[6]。肾结晶是肾结石的早期阶段表现形式，而草酸钙是肾结石的主要组成成分[7]。体外冲击波碎石、经皮肾镜碎石、输尿管镜以及腹腔镜手术已广泛应用于结石的治疗。然而，这些有创方法的成本高，而且可能导致严重并发症[8-10]。预防结石复发，清除残余结石，仍然是泌尿外科医师治疗泌尿系结石所面临的两大难题。手术疗法创伤大，保守治疗排石效果不佳，在没有药物干预的情况下，10年之内结石复发率在80%以上。文献报道表明，有很多传统中草药物广泛用于泌尿系结石的治疗及研究中，如芙蓉花等[11-15]。人参皂苷对草酸钙晶体的生长具有明显的抑制作用，除具有抗结石作用外，还具有提高血管活性能力的作用，抑制草酸钙晶体生长[16]。

本研究结果表明阴性对照组大鼠24h尿量高于正常控制组，实验组和阳性对照组高于阴性对照组和正常控制组，且高剂量组的24h尿量更高，说明人参皂苷可促进大鼠排尿量明显增加，尤其在高剂量组，有利于结石的排出。在24h尿Ca2+方面，阴性对照组、阳性对照组以及低剂量实验组比正常控制组的含量高，中剂量、高剂量实验组低于阴性对照组，且随着剂量的增加有浓度下降的趋势，说明人参皂苷可能通过降低尿钙浓度，减少结石的生成。同时，阴性对照组大鼠血BUN、Cr水平明显高于正常控制组，与阴性对照组比较，阳性对照组和实验组水平下降，剂量越高，BUN、Cr水平降低程度更高，说明血清中BUN、Cr水平较前改善，高剂量的改善效果更好。阳性对照组、实验组肾脏草酸钙结晶评分高于正常控制组，低于阴性对照组，说明可以减少草酸钙结晶在肾脏的聚集，加速排出，中剂量组好于高剂量组，相关机制还需进一步研究。

总之，人参皂苷对乙二醇诱导大鼠肾脏结石排石有一定的意义，其具体的机理还需进一步研究。