小儿肺炎支原体感染应用快速血清学检验 和微生物快速培养诊断的价值

纪新红,于俊兰

（济南市历城区中医医院检验科，山东济南 250100）

小儿肺炎支原体感染属于儿童好发疾病，其中支原体为常见病原体。秋、冬季为小儿肺炎支原体感染的高发季节，临床表现因病程的不同具有一定的差异性，如延误治疗，并发症的发生风险较高，早期明确病原体类型对于促进患儿健康恢复具有重要意义[1]。临床检测支原体的方法较多，常用的方法包括：支原体分离培养、冷凝集试验、生物学的聚合酶链反应（PCR）、免疫球蛋白M（IgM）检测等。在实践应用过程中发现，支原体分离培养检验周期较长，因此临床推广难度较大；PCR技术检测支原体虽然缩短了检测周期，检出率较高，但检验费用昂贵，也不利于检测的普及[2]；冷凝集试验操作简单，但该检测方法检测支原体的敏感性、特异性均不佳，存在较高的漏诊风险；IgM检测支原体以其操作简单、出具结果快速、无需特殊仪器等优势在临床得以普遍应用，敏感性、特异性均较为满意[3-4]。基于此，本次研究进一步探究了微生物快速培养和血清学检验两种方式对疾病诊断的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年12月至2020年5月济南市历城区中医医院收治的134例肺炎支原体感染患儿为研究对象进行回顾性分析，其中男72例，女62例，年龄8个月～11岁，平均年龄（4.65±1.73）岁，病程5～20 d，平均病程（12.84±2.47）d。患儿均因发热、气喘、咳嗽、咳痰等呼吸系统症状就诊，予以胸部X线检查，均显示单侧絮状阴影，其中13例患儿同时合并不同程度的肺外疾病体征。研究经济南市历城区中医医院医学伦理委员会批准后执行。纳入标准：所有患儿均予以明确诊断，符合《诸福棠实用儿科学》[5]中关于肺炎支原体感染的相关诊断标准，包括以发热、咳嗽为主要临床表现，并可伴有气促或高热症状。排除标准：①合并先天性肺部缺陷的患儿；②合并心、肾等重要脏器功能不全的患儿。

1.2 检测方法 所有纳入研究的患儿均分别进行微生物快速培养和血清学检验，微生物快速培养检验方法：嘱患儿张口发“啊”音，以充分暴露咽喉部位，用咽拭子培养管内的消毒长棉签，轻柔擦拭采集患儿两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物，标本采集完毕将棉签插入咽拭子培养管内，将其置入培养液，肺炎支原体鉴定培养基由陕西百盛园生物科技有限公司生产[陕食药监械（准）字2009第2400159号]，于37 ℃恒温箱内连续培养24 h，培养结束后观察培养基的颜色变化，颜色自红色变为黄色则判定为支原体感染阳性，无变化为阴性。血清学检验：患儿于清晨空腹状态下采集2 mL静脉血，离心分离血清，应用酶联免疫法检测肺炎支原体IgM抗体即MP-IgM抗体，所使用MP-IgM抗体试剂盒的生产厂家为日本富士瑞比欧株式会社[赛乐迪亚 - 麦可Ⅱ，注册证编号：国食药监械（进）字2009第3402832号]，操作流程依据标准规范执行，MP-IgM＞1∶160判定患儿为支原体感染阳性，MP-IgM≤1∶160判定患儿为支原体感染阴性，结果为阴性者于1周后再次复查。金标准为支原体培养阳性。

1.3 观察指标 观察对比微生物快速培养和血清学检验的检查结果、诊断效能（准确率、灵敏度、特异度）以及不同年龄段血清学检验结果。准确率=（真阳性数+真阴性数）/总例数×100%；灵敏度=真阳性数/（真阳性数+假阴性数）×100%；特异度=真阴性数/（真阴性数+假阳性数）×100%。

1.4 统计学分析 采用SPSS 24.0统计学软件处理数据，计数资料用[ 例(%)]表示，行χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两种诊断方式检查结果比较 血清学检验检出阳性115例，阴性19例，参照金标准，其中真阳性115例，真阴性0例；微生物快速培养检出阳性47例，阴性87例，其中真阳性47例，真阴性0例。见表1。

表1 两种诊断方式检查结果比较[ 例(%)]

2.2 两种诊断方式的诊断效能比较 参照金标准检测结果，血清学检验相较于微生物快速培养，其准确率、敏感度分别为85.82%、85.82%，均显著提高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两种诊断方式的诊断效能比较

2.3 各年龄段血清学检验结果对比分析 4～7岁患儿的阳性检出率为92.86%，显著高于其他年龄段患儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 各年龄段血清学检验结果对比分析[ 例(%)]

3 讨论

肺炎支原体感染属于轻微自限性疾病，但病情进展至重症阶段，患儿可并发肺不张、胸腔积液、坏死性肺炎、气胸等严重呼吸系统并发症，严重还可出现呼吸窘迫甚至呼吸衰竭等症状。在实际诊疗中发现，约1/4的患儿并非以典型呼吸道症状为首发症状，加之支原体感染后缺乏特异性的临床表现，仅依据临床特征往往很难区分患儿为细菌感染、支原体感染或是病毒性 感染[6]。

一般临床运用微生物快速培养法和血清学检验来检测肺炎支原体感染。微生物快速培养法指的是在培养基中加入快速生长因子，促进支原体快速繁殖，培养基内需要加入微生物繁殖所需的蛋白和糖类，同时对其他生物产生抑制作用，该方法检测对实验室要求不高，操作简单，但结果容易受到其他细菌的影响。血清学检验兼具操作简单、价格低廉、出具结果快速等优势，成为了目前国内外应用最广泛的肺炎支原体感染诊断方法[7]。国际上诊断支原体感染通常以恢复期与急性期的双份血清抗体滴度变化作为依据，但实际诊疗中收集恢复期患儿的血清较为困难，且支原体与某些细菌或人体组织细胞具有相同的糖脂成分，检测时易发生非特异性的交叉反应。此外，抗体出现时机易受年龄、免疫条件、感染情况等多种因素的影响，检测中容易出现漏诊情况，因此肺炎支原体感染患儿采用单份血清检测时，应考虑到结果可能受多种因素影响，不能仅依据血清学检验结果确诊为肺炎支原体感染。本次研究中采用血清学检验的单份血清，准确率、敏感度分别为85.82%、85.82%，与微生物快速培养结果35.07%、35.07%比较，均显著提升（P＜0.05），提示血清学检验的准确率及敏感性更高。该结论与宋秦伟等[8]研究中血清学检验单份血清83.97%的准确率报道基本一致。肺炎支原体感染后1周，机体开始出现 MP-IgM，该指标水平于3～4周达高峰，随后呈下降趋势，因此如为病情早期检测MP-IgM，结果可为阴性。本次研究中还显示：4～7岁患儿的阳性检出率为92.86%，显著高于其他年龄段患儿（P＜0.05），分析其原因：婴幼儿阶段机体免疫机能低下，因此免疫应答反应能力及抗体形成能力均相对较弱，极易出现漏诊情况，而≥ 8岁儿童免疫系统发育趋于成熟，肺炎支原体感染后的致病性也较其他年龄段有所降低，因此阳性检出率 降低。

综上所述，小儿肺炎支原体感染实验室检查结果显示，微生物快速培养与血清学检验，这两种检测方式对于疾病的诊断均具有一定的参考价值，但血清学检验诊断小儿肺炎支原体感染的阳性检出率更高。此外，4～7岁患儿的支原体阳性检出率最高。临床可采用血清学检验诊断小儿肺炎支原体感染，并重点关注4～7岁患儿，以提高检出率，提早对患儿进行治疗。