新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗免疫程序初探
2021-02-18刘锦容龙海鹰邓海燕张险朋
刘锦容，龙海鹰，邓海燕，张险朋★
(1. 肇庆大华农生物药品有限公司，广东 肇庆 526238；2. 东莞市动物疫病预防控制中心，广东 东莞 523086）
新城疫、H9 禽流感二联灭活疫苗是鸡群免疫的主要疫苗之一，由于其免疫质量指标血凝抑制抗体水平检测方法操作和费用较为简单，目前许多养殖单位均建立了监测体系，以期通过监测抗体水平来评价疫苗质量，优化免疫程序等。由于实际生产中抗体水平受到母源抗体、基础免疫、鸡群健康状况以及野毒感染潜伏等因素的影响，导致其抗体水平与SPF 鸡的抗体消长规律不尽一致，特别是抗体水平的异常，给生产带来困惑。本文通过对快大肉鸡抗体监测，初步探讨不同免疫程序下新城疫流感灭活苗的免疫效果，以便优化免疫程序。
1 材料与方法
1.1 试验鸡 在华东某一快大鸡养殖场开展试验，将12 栋舍平均分为为A、B、C 和D 组，并按表1 免疫程序进行疫苗免疫接种。在1、7、14、28 和35 日龄翅静脉采血，每组每次随机抽取鸡血48 份（每栋16 份），3000 r/min 离心分离血清，-20℃保存待检。
表1 疫苗免疫程序
1.2 疫 苗 新城疫、H9 亚型禽流感二联灭活疫苗、传染性法氏囊病活疫苗、新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗。
1.3 试 剂 H9 亚型禽流感HI 抗原和阳性血清、新城疫HI 抗原和阳性血清购自哈尔滨国生生物有限公司。
1.4 试验方法 H9 亚型禽流感抗体和新城疫抗体检测分别按照《高致病性禽流感诊断技术》GB/T 18936-2020 和《新城疫诊断技术》GB/T 16550-2020 中的血凝与血凝抑制试验方法进行操作。
2 结 果
2.1 新城疫抗体检测结果 所有组别1 日龄针对新城疫的母源抗体抗体水平均约为9log2，在21 日龄下降至最低水平，均在3log2 以上，21 日龄之后抗体水平又逐步升高，最高达到8log2 以上，详见图1。在整个监测周期，抗体均匀度呈现前期高，后期各组均匀度较差。在21 日龄之前（包括21 日龄）各组抗体水平差异不显著。A 组在21、28 和35 日龄均显著高于B 组（P<0.05），而C 组在21、28 和35 日龄均显著高于D 组（P<0.05）。尽管C 组在21、28 和35 日龄抗体水平显著高于A 组（P<0.05），而A 组与D 组差异不显著（P>0.05）。
图1 新城疫母源抗体水平变化
2.2 2 H9 亚型禽流感抗体 从图2 可以看出，H9 亚型禽流感母源抗体在1 日龄平均均在10log2 以上，然后逐步下降至21 日龄为最低水平，约3log2，随后抗体水平逐步提高，最高达到9log2。在整个监测周期，抗体均匀度呈现前期高，后期各组均匀度较差。C、D 组抗体水平在28 日龄、35 日龄时均显著高于A、B 组差异均显著（P<0.05），其它日龄差异不显著。
图2 H9 亚型禽流感母源抗体水平变化
3 讨 论
新城疫、H9 亚型禽流感母体抗体会影响疫苗接种后的抗体消长规律，与在SPF 鸡上免疫后的抗体变化截然不同。本文对新城疫流感灭活苗在快大鸡实际应用的抗体水平进行了监测。从本文监测结果可以看出，无论是1 日龄还是7日龄免疫，新城疫和H9 亚型禽流感抗体水平呈现U 字型的变化规律，最低点均在21 日龄，结合临床上H9 在20 日龄多发的情况，抗体水平低有可能是该阶段H9 发病较多的原因之一。抗体均匀度随着日龄的增长而呈现不同的分化，这与免疫接种剂量是否精确一致，个体发育和免疫状况等综合因素有关。
在新城疫抗体方面，21 日龄之前各组差异不显著，在21日龄及之后先免疫新支活苗后免疫新城疫流感灭活苗的A、C 两组，其抗体水平均显著高于先免疫新城疫流感灭活苗后免疫新城疫传染性支气管炎活疫苗的B、D 两组（P<0.05），这有可能是因为新城疫传染性支气管炎活苗中的新城疫活毒感染后影响了新城疫抗体消长规律。 H9 亚型禽流感抗体未能呈现与以上的规律，主要与H9 没有活疫苗有关，而D组在35 日龄的抗体水平明显较高，有可能与感染野毒有关。
本文也对法氏囊病活苗免疫是否影响新城疫和H9 禽流感抗体进行了分析，从图1 和图2 结果可以看出，法氏囊病活苗1 日龄免疫的A、B 两组与14 日龄免疫的C、D 两组相比，新城疫抗体水平在21 日龄及之后前两组显著低于后两者（A
本文对新城疫流感二联灭活疫苗在快大肉鸡的免疫诱导的抗体水平进行了探讨，结果提示新城疫传染性支气管炎活疫苗先于新城疫流感灭活疫苗免疫对于新城疫抗体水平的提高更好，法氏囊病活疫苗14 日龄疫苗比1 日龄免疫，对新城疫和H9 亚型禽流感两种抗体水平的提高更好。
