颅内肿瘤患者中Cyclin E、Ki-67蛋白表达水平及其临床意义

白军杰 段攀锋 丁清林

颅内肿瘤亦被称为颅脑肿瘤，是颅腔内发生的一种神经系统恶性肿瘤，包括源生性神经上皮、脑膜、外周神经肿瘤，淋巴肿瘤，颗粒细胞肿瘤以及转移性瘤等[1]。颅内肿瘤病因多元，包括遗传、物理因素、化学因素以及生物因素等[2-3]。其病机则与细胞过度增殖及细胞周期失控有关。Cyclin E蛋白是细胞G1周期素之一，对细胞增殖具有重要作用；Ki-67蛋白则是细胞于G1、S、G2、M期出现的核抗原，可有效反应细胞增殖活性[4]。为探究颅内肿瘤患者的Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况，本文对我院200例颅内肿瘤患者进行分析，现将结果进行如下报告。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集我院2016年10月～2020年5月期间接受治疗的颅内肿瘤患者进行研究。纳入标准：①患者年龄在18周岁以上；②患者经头颅CT或MRI确诊；③无其他系统严重疾病者。排除标准：①患者的临床资料不全；②合并有其他颅脑疾病或免疫功能障碍者。本次研究共纳入200例，其中恶性组130例，男性85例，女性45例，年龄40-65岁，平均年龄(52.35±4.24)岁；良性组70例，男性38例，女性32例，年龄42～67岁，平均年龄(52.38±5.02)岁。两组患者年龄、性别等一般资料比较无明显差别(P<0.05)。

1.2 方法

选用免疫组化实验观察二组患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况：将样本常规切片后，烤片脱蜡，蒸馏水漂洗，高压修复抗原，滴入10 ml H2O2阻断，PBS漂洗，二抗，37 ℃烘烤10 min，PBS洗涤，BAD显色，冲洗，苏木精复染，封片，镜检。实验试剂主要由上海壹研生物技术有限公司提供。阳性判定标准：以棕黄色、棕褐色颗粒为Cyclin E和Ki-67染色细胞。染色强度为中度，且阳性细胞数≥5%为阳性[5]。

1.3 评价指标

观察二组患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况，比较恶性组患者不同临床病理特征患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况，分析影响颅内肿瘤患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况的因素。

1.4 统计学处理

本文涉及的计数和计量资料分别采用%和均数±标准差来表示，并应用SPSS 11.5软件进行统计分析。计数资料行卡方检验，计量资料行t检验，采用Logistic回归分析法分析影响颅内肿瘤患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况的因素，当P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况比较

良性组Cyclin E和Ki-67阳性率均低于恶性组，见表1。

表1 两组患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况比较(例，%)

2.2 恶性组不同临床病理特征患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况比较

无淋巴结转移、分化程度为高分化的恶性肿瘤患者的Cyclin E和Ki-67阳性表达率较高，而不同年龄、性别、TNM分期和肿瘤大小的恶性肿瘤患者的Cyclin E和Ki-67阳性表达率无明显差别，见表2。

表2 恶性组不同临床病理特征患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况比较/例

2.3 影响颅内肿瘤患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况的因素

将单因素分析有意义的因素和肿瘤性质作为自变量，以患者的Cyclin E和Ki-67是否阳性表达作为因变量，进行Logistic回归分析，结果显示，肿瘤恶性、分化程度高和无淋巴结转移是影响颅内肿瘤患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达的危险因素，见表3。

表3 影响颅内肿瘤患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达情况的因素

3 讨论

颅内肿瘤对人体危害极大，即便是良性肿瘤也将因压迫正常脑组织而诱发头痛、视力障碍、精神及意识障碍等严重并发症[6]。细胞周期失调是颅内肿瘤发生、发展的重要原因，因此探究细胞调控因子在颅内肿瘤中的表达情况，并分析其意义具有重要临床价值。Cyclin E蛋白是细胞周期蛋白的重要组成部分，对阻滞细胞周期由G1期向S期转换具有重要作用[7]。高表达的Cyclin E蛋白还可通过活化周期蛋白依赖性激酶来缩短细胞G1期，加速S期的到来，促使细胞中心体非常态增殖，并导致细胞周期失调，细胞异常增殖，最终形成肿瘤[8]。近些年的研究表明，Cyclin E在乳腺癌、卵巢癌、胃癌等疾病中呈明显高表达，并且与患者预后密切相关[9]。Ki-67蛋白是临床公认的细胞活性及细胞增殖指标，其表达水平与肿瘤细胞活性密切相关，这也是该物质被部分学者纳为原癌基因的重要原因[10]。已有研究表明，当局部组织内的Ki-67达到一定阀值后，其诱发的细胞过度增殖将成为肿瘤前置条件，但这一阀值临床尚无明确结论[11]。还有研究发现，Ki-67与Cyclin E等细胞周期调控因子可通过协同作用增强癌细胞的增殖及转移能力，癌转移的发生不仅取决于肿瘤的生物学特性，还与宿主免疫因素、肿瘤细胞与胞外基质的相互作用有关，研究发现无淋巴结转移患者cyclinE阳性率高于有淋巴结转移的患者，临床或可通过靶向控制这些细胞因子的表达来抑制肿瘤增殖、转移[12]。

本组研究中，良性组患者的Cyclin E和Ki-67阳性率均低于恶性组，提示Cyclin E和Ki-67的过表达可能是肿瘤恶性病变的重要原因。Cyclin E和Ki-67作为癌基因，是临床公认的良性肿瘤向恶性转化的分子标准，这与这二组物质可促使细胞非常态由G1进入S期有关，这种刺激可以加速细胞增殖，导致细胞染色体缺失，最终促使良性肿瘤向恶性转变[13]。本研究还发现，无淋巴结转移、分化程度为高分化的恶性肿瘤患者的Cyclin E和Ki-67阳性表达率较高，而不同年龄、性别、TNM分期和肿瘤大小的恶性肿瘤患者的Cyclin E和Ki-67阳性表达率无明显差别，表明Cyclin E和Ki-67参与着颅内肿瘤转移及分化，Cyclin E和Ki-67的高表达使肿瘤细胞由G1期进入S期的进程加快，引发染色体缺失。高分化肿瘤的细胞周期和增殖的失控程度高于低分化者，因此Cyclin E和Ki-67的阳性表达率也高于低分化者。有研究发现，低危和高危HPV感染的鳞状上皮细胞内均存在Cyclin E高表达情况，并且Cyclin E表达水平与宫颈肿瘤的良性形态有关，同时还与宫颈癌分化程度相关[14]。还有研究发现，高、中、低分化的宫颈癌组织内Ki-67均呈异常表达情况，并且其阳性率与分化程度正相关，癌组织分化程度越高，Ki-67阳性率越高，这与本组研究结果相似[15-16]。本研究通过回归分析发现，肿瘤恶性、分化程度高和无淋巴结转移是影响颅内肿瘤患者Cyclin E和Ki-67蛋白表达的危险因素。

本研究通过分组实验，选用免疫组化实验对良恶性颅内肿瘤内的Cyclin E和Ki-67表达情况进行检测，同时将单因素分析有意义的因素和肿瘤性质作为自变量，对Cyclin E和Ki-67阳性影响因素进行了Logistic分析，发现Cyclin E和Ki-67表达水平与肿瘤性质和淋巴结转移情况密切相关，研究具有可信性。但颅内肿瘤性质和淋巴结转移是一个多因素，多细胞因子参与结果，本组研究仅从细胞周期调控分子角度进行了探究，研究还存在诸多问题。

综上所述，Cyclin E和Ki-67表达水平与颅内肿瘤患者肿瘤性质和淋巴结转移情况密切相关，临床或可通过调控这两种因子的表达来实现肿瘤防治，这将可能是肿瘤治疗的新靶向。