外周血结核感染T 细胞斑点试验对活动性结核的诊断价值

肖松甲

（松滋市人民医院感染科 湖北松滋 434200）

当前临床上多通过病理学、微生物检查、临床特征及影像学等多种方式对结核病实施诊断，但上述方式在早期确诊是否为活动性结核时仍旧存在较大的困难。因此临床上需要尽快选择一种高效的辅助检测手段。本研究探讨外周血结核感染T 细胞斑点试验对活动性结核的诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年3 月～2021 年3 月以来我院收治的121 例活动性结核患者及98 例肺部其他疾病患者作为研究对象，其中活动性结核患者男69 例，女52 例，年龄61～82 岁，平均（70.3±1.2）岁；肺部其他疾病患者男51 例，女47 例，年龄62～81 岁，平均（70.2±1.3）岁。

1.2 方法

T-SPOT.TB 试剂盒生产厂家为英国OxordImmunotec公司，提供厂家为上海复星公司。采集患者10ml 静脉血将其置入肝素抗凝管内，并将Ficoll 淋巴细胞分离液加入，通过密度梯度离心法将计数活淋巴细胞、单个核淋巴细胞（PBMC）完全分离出来，培养板条每孔分别加入抗原CFP-10、50LLl AIM-V、抗原ESAT-6 及阳性对照后，再于每个孔内加入100μlPMBC。通过浓度为5%的CO2在37℃的培养箱孵育16-20h，之后去培养液并进行洗涤处理，并加入碱性磷酸酶标记的鼠抗人γ-干扰素抗体，在2℃～8℃的条件下孵育lh，之后将其洗涤，并加入50μl 显色液，在室温下避光反应7min 并终止反应，然后在室温下干燥2h 对斑点进行计数。

1.3 观察指标

（1）观察分析活动性肺结核患者T-SPOT.TB 检测的灵敏度及特异度。

（2） 观察分析活动性肺结核患者菌阳性及菌阴性T-SPOT.TB 检测情况。

1.4 统计学处理

用SPSS22.0 进行分析，所有数据当中，（%）类计数数据，行X2检验检测；（）类计量数据，行T 检验检测；P＜0.05时，提示差异显著。

2 结果

经T-SPOT.TB 检测发现，121 例活动性结核患者中检测结果呈阳性的有102 例，98 例肺部其他疾病患者中检测结果呈阳性的有23 例，两组比较其差异存在统计学意义（P＜0.05），且T-SPOT.TB 在活动性肺结核患者诊断中的敏感度为84.3%，特异度为76.5%，见表1。

表1 活动性肺结核患者T-SPOT.TB 检测的灵敏度及特异度（n，%）

痰涂菌阳性组、痰涂菌阴性组患者T-SPOT.TB 检测阳性率依次为96.2%及66.2%，两组阳性率对比存在统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 活动性肺结核患者菌阳性及菌阴性T-SPOT.TB 检测对比（n，%）

3 讨论

活动性肺结核属于临床上比较多见的呼吸系统疾病类型，其主要临床症状为咳嗽、低热、盗汗以及咳血等，而且部分老年患者因自身免疫功能减退，经常会伴随有肺恶性肿瘤、COPD 等其他肺部疾病。因而在疾病早期会掩盖活动性肺结核症状，并会对早期诊断造成不利影响。因而为了能对活动性肺结核患者进行早期确诊，需要通过多种不同检测方式来提高临床诊断的敏感性。

结核感染T 细胞斑点试验（T-SPOT.TB）属于一类比较新型的临床诊断方式，其敏感性及特异度均相对较高。γ-干扰素释放试验（IGRAs）在结核分枝杆菌潜伏感染诊断中的应用愈发普遍，其应用的抗原主要为结核分枝杆菌RDl 区的特异抗原CFP-10 及ESAT-6，因此实验可以对所有卡介苗接种的回忆反应及大部分环境分枝杆菌感染进行准确分辨。结核感染后机体内会长期存在抗原特异性T 细胞，当再一次遭受抗原刺激后，会迅速活化增殖并分泌出大量的γ- 干扰素，因此通过对γ-干扰素的释放水平进行检测可以对机体是否感染结合杆菌进行判断。

研究发现，T-SPOT.TB 在活动性肺结核患者诊断中的敏感度为84.3%，特异度为76.5%，且痰涂菌阳性组、痰涂菌阴性组患者T-SPOT.TB 检测阳性率依次为96.2%及66.2%，两组阳性率对比存在统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，T-SPOT.TB 的敏感度较高，将其应用于活动性肺结核筛查中，可以使肺结核漏诊率进一步降低，但因其特异度较低，所以需要对其在疾病鉴别诊断中的价值做深入性分析。