十八味诃子利尿丸对大鼠2型糖尿病性胃轻瘫的作用

常秀君 马如兰 吴穹

(1青海大学医学院，青海 西宁 810000；2西安交通大学医学院)

胃轻瘫是糖尿病的慢性并发症。它是一种以高糖影响胃肠道细胞正常生理功能为主要原因，胃肠道动力障碍所致胃排空延迟为主要特征的上消化道肌肉紊乱性疾病〔1〕。胃轻瘫对患者的伤害主要体现在：①直接影响消化道的正常生理功能，临床表现为恶心、食欲不振、餐后腹胀感、胃脘部疼痛等症状〔2，3〕；②胃轻瘫抑制糖尿病患者的药物吸收，间接加重其他慢性糖尿病并发症，如心血管疾病、肾病等，从而加速糖尿病进程〔4〕。

藏药十八味诃子利尿丸是藏医临床研究常用降糖治疗药物之一，可以预防糖尿病慢性并发症和控制糖尿病患者的血糖水平〔5〕。其方中诃子涩肠止泻〔6〕、姜黄主治胸腹胀痛、红花活血通经、牛黄促进肠蠕动〔7〕、巴夏嘎除胃中邪热、藏茜草和岩精膏活血通经、祛肠热〔8〕、赛北紫堇主胃脘痛、刀豆益腹胀。因此，根据多年来十八味诃子利尿丸在藏药临床上良好的降糖作用及方中部分药物对胃肠道细胞的修复功效和对小血管的保护作用，本实验将初步探讨十八味诃子利尿丸对2型糖尿病胃轻瘫大鼠一般状况、血糖、胃排空率、小肠推进率及胃窦部组织的影响。

1 材料与方法

1.1实验动物 24只6周龄标准化雄性SD大鼠，体重80～100 g购于西安交通大学医学部实验动物中心，动物合格证号：61001700003722，许可证号：SCXK(陕)2017-003。

1.2仪器与试剂 高脂饲料(10%蔗糖，10%猪油，1%胆固醇，0.3%胆酸钠，78.7%常规饲料)链脲佐菌素(Sigma公司，美国)，十八味诃子利尿丸(青海省藏医院)，柠檬酸钠缓冲液(Solarbio公司，北京)，卓越金采血糖仪及试剂(Roche公司，美国)。

1.32型糖尿病胃轻瘫大鼠模型的建立 大鼠适应性喂养1 w后随机分为空白组(8只)，建模组(16只)。两只一笼，自由进行摄食饮水。空白组予常规使用饲料喂养，建模组给予高脂饲料喂养12 w后禁食、不禁水12 h，随即尾静脉一次性注射25 mg/kg剂量〔9〕的链脲佐菌素柠檬酸钠缓冲液，72 h通过快速尾静脉血糖仪检测随机血糖≥16.7 mmol/L，即该2型糖尿病大鼠模型成功。继续予以普通饲料喂养6 w，观察大鼠有腹部膨胀、体重减轻，大便变稀等胃轻瘫症状，确定2型糖尿病胃轻瘫大鼠建模成功〔10〕。

1.4给药方法 将建模成功的16只大鼠随机分为两组，模型组和藏药组，每组8只。藏药组灌胃十八味诃子利尿丸300 mg/kg〔11〕，隔天1次，连续灌胃3 w；空白组和模型组同时灌胃等量生理盐水。

1.5观察指标

1.5.1摄食和饮水 观察每笼大鼠建模前、建模成功后、灌药3 w后24 h的摄食和饮水情况。

1.5.2血糖和体重 观察各组大鼠造建前、建模成功后、灌药3 w后随机血糖和体重。

1.5.3胃排空率与小肠推进率 末次给药后大鼠进行禁食12 h，期间可自由摄水。随即一次性灌胃2 ml 5%酚红溶液，45 min后行水合氯醛麻醉，结扎幽门与贲门，取全胃于培养皿中，参照贺凤娥〔12〕的方法测定酚红剩余量。计算胃排空率=(1-测定酚红残留量/酚红灌胃量)×100%。结扎大鼠幽门至回盲瓣的小肠直铺于实验台上，测量幽门到回盲瓣全长(L2)和幽门到酚红染成红色末端距离(L1)。计算小肠推进率=L1/L2×100%。

1.5.4胃窦部组织病理形态学 大鼠胃窦部组织行常规苏木素-伊红(HE)染色切片，光镜下观察胃窦组织病理形态改变。

1.6统计学处理 采用SPSS25.0软件进行单因素方差分析。

2 结 果

2.1饮水和摄食 模型组、藏药组与空白组比较，建模成功后24 h饮水摄食均增加，差异具有统计学意义(P<0.05)；藏药组与模型组比较，灌药3 w后24 h饮水摄食均减少，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组不同时间24 h饮水、摄食及血糖浓度和体重变化

2.2血糖和体重 藏药组、模型组与空白组比较，建模成功后血糖浓度上升、体重减轻，差异具有统计学意义(P<0.05)；藏药组与模型组比较，灌药3 w后血糖浓度下降，差异具有统计学意义(P<0.05)；而体重无明显统计学差异(P>0.05)。见表1。

2.3胃排空率和小肠推进率 末次灌药结束后，藏药组与模型组比较，胃排空率和小肠推进率均增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 十八味诃子利尿丸对2型糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空率和小肠推进率的影响

2.4胃窦部病理表现 空白组胃黏膜完整，细胞排列整齐、胞膜完整、胞质染色均匀、无空泡；无出血和炎细胞渗出。模型组壁细胞胞质疏松化；出现红细胞渗出、水肿、少量淋巴细胞浸润的炎症表现。藏药组与模型组比较，壁细胞胞质疏松化减轻，炎症表现缓解。见图1。

图1 各组大鼠胃窦部病理表现(HE，×100)

3 讨 论

糖尿病胃轻瘫的发病机制与多种原因相关，其中与高血糖诱导氧化应激反应影响胃组织的正常生理功能；迷走神经、胃肠道平滑肌细胞、起搏细胞病理改变导致胃肠运动功能下降；炎症反应加剧导致胃组织损伤等因素具有密切的联系〔13〕。本实验观察到藏药十八味诃子利尿丸对高脂饲料联合链脲佐菌素诱导的2型糖尿病胃轻瘫大鼠具有一定的保护作用，体现在灌药3 w后饮水减少、血糖降低、胃窦部组织细胞损伤减小、炎症现象缓解。可能是由于多种药物组合后显著提高胰岛素水平从而控制大鼠血糖〔14〕；方中诃子提高了氧化应激引起神经细胞损伤的修复能力〔15〕；小檗皮、刺柏等药物的消炎作用；姜黄、人工牛黄对胃肠道的保护作用；藏茜草对小血管损伤的愈合功效等因素有关。

综上所述，藏药十八味诃子利尿丸可能从直接保护胃肠道组织及间接降低血糖两方面减慢了2型糖尿病慢性并发症胃轻瘫的发展进程，其机制有待进一步研究。