印度红树植物Xylocarpus moluccensis的柠檬苦素

曲 栋，张 群，申 丽*，汪志刚

1暨南大学药学院；2暨南大学附属第一医院，广州 510632

柠檬苦素是一种高度氧化的四降三萜类化合物，主要来源于楝科(Meliaceae)和芸香科(Rutaceae)植物。木果楝属(Xylocarpus)红树植物是楝科真红树植物，主要分布于东非、印度、孟加拉国、东南亚、中国南部和澳大利亚北部[1]。长期遭受海水周期性浸淹使红树植物产生了众多结构新颖的次生代谢产物，如柠檬苦素、原柠檬苦素、生物碱、芳香酮酸、黄酮、甾醇等[2,3]，其中柠檬苦素是木果楝属红树植物的主要次生代谢产物。近年来的研究表明该属植物中的柠檬苦素不仅结构多样，而且具有拒食杀虫、抗肿瘤、神经保护、胃保护和抗抑郁等多种生物活性[2,3]。墨西哥交酯是一类母核中含有双环[3.3.12.10]壬烷结构单元的柠檬苦素类型，基本骨架由Connolly[4]于1964年从楝科植物Swieteniamacrophylla中分离得到的柠檬苦素swietenine而确定，是木果楝属红树植物中主要的柠檬苦素类型之一，本课题组也从木果楝属红树植物发现了多个此类型柠檬苦素[5]。

羧酸酯酶是一类药物代谢酶，属于丝氨酸酯酶大家族的一员，可水解众多内外源的酯类化合物，其活性与许多的疾病相关。人体中主要存在人羧酸酯酶1(CES1)和人羧酸酯酶2(CES2)[6]。CES2在人体肠道和很多肿瘤组织中高表达，在酯类或酰胺类药物或前药的口服生物利用度和治疗效果中起重要作用[7]。为了从红树植物中寻找结构新颖，活性显著的次生代谢产物，本研究选取红树植物X.moluccensis的种子，对其化学成分及活性进行了进一步研究。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

薄层层析用硅胶板(烟台化学工业研究所GF2型层预板)；Waters 2998和2489型高效液相色谱仪(美国Waters公司)；AmaZon SL离子阱电喷雾质谱仪(德国Bruker Daltonics公司)；Bruker AV-400型核磁共振波谱仪(德国布鲁克公司)；SHZ-C型循环水式多用真空泵(河南巩义市予华仪器厂)；DLSB-5/25型低温冷却液循环泵(上海霄汉实业发展有限公司型)；Hei-VAP Advantage旋转蒸发仪(德国海道夫公司 )；KQ-25OVDB型超声波清洗仪(上海霄汉实业发展有限公司)；ME204型电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；Synergy H1酶标仪(美国Bio-Tek)；色谱柱(日本YMC公司，YMC-Pack， ODS-5-A，250 mm × 10 mm i.d.，5 μm)；正相柱层析硅胶(青岛海洋化工厂，100～200目)；反相柱层析硅胶(日本YMC公司，YMC-GEL，ODS-RP-C18，75 μm)；氘代试剂(美国剑桥同位素实验室)；乙腈(色谱纯，德国Merck公司)；甲醇(色谱纯，德国Merck公司)；乙醇、乙酸乙酯、甲醇(分析纯，天津市大茂化学试剂厂)；丙酮、氯仿(分析纯，广州化学试剂厂)。

1.2 植物材料

实验材料X.moluccensis种子于2007年9月采集于印度安得拉邦克里希纳港湾红树林湿地，由南方医科大学药学院吴军教授鉴定。样品标本(No. IXM200701)保存于广州市暨南大学药学院海洋药物研究中心。

1.3 提取与分离

干燥的X.moluccensis种子6.0 kg，粉碎后用95%的乙醇常温下浸泡提取6次(6 × 15 L)，每次浸泡48 h。6次提取液减压浓缩得浸膏共824.6 g，浸膏加纯水搅拌混悬，用乙酸乙酯萃取6次(6 × 7.5 L)，浓缩蒸干得乙酸乙酯浸膏299.1 g。

乙酸乙酯萃取物299.1 g经正相硅胶(100～200目)柱层析，(氯仿/甲醇体积比100∶0→5∶1，梯度)洗脱，共得到223个流份。随后经过薄层色谱和高效液相色谱检测分析，合并正相柱层析流份58～67(43.0 g)，经过反相硅胶柱层析(58 × 5.5 cm i.d.，丙酮/水体积比40∶60、50∶50、65∶35、80∶20、90∶10、100∶0，梯度洗脱)，得到136个流份。反相柱层析流份45经半制备HPLC纯化得到化合物1(4.4 mg，YMC-Pack ODS-A，乙腈/水，体积比49∶51，流速3 mL/min)、化合物3(23.2 mg，YMC-Pack ODS-A，甲醇/水，体积比67∶33，流速3 mL/min)；反相柱层析流份36经半制备HPLC(YMC-Pack ODS-A，甲醇/水，体积比70∶30，流速3 mL/min)得到化合物8(4.3 mg)；反相柱层析流份37经半制备HPLC(YMC-Pack ODS-A，乙腈/水，体积比60∶40，流速3 mL/min)得到化合物6(2.0 mg)；反相柱层析流份72结晶得到化合物7(8.1 mg)；反相柱层析流份98经半制备HPLC得到化合物2(45.3 mg，YMC-Pack ODS-A，甲醇/水，体积比65∶35，流速3 mL/min)、化合物5(6.5 mg，YMC-Pack ODS-A，乙腈/水，体积比55∶45，流速3 mL/min)；反相柱层析流份106经半制备HPLC(YMC-Pack ODS-A，甲醇/水，体积比72∶28，流速3 mL/min)得到化合物11(3.5 mg)、化合物4(12.5 mg)。

合并正相柱层析流份68～71(22.9 g)，再经过反相硅胶柱层析(60 × 3 cm i.d. 丙酮/水体积比40∶60、50∶50、65∶35、80∶20、90∶10、100∶0梯度洗脱)，得到111个流份。反相柱层析流份63～65合并经半制备HPLC得到化合物9(2.8 mg，YMC-Pack ODS-A，甲醇/水，体积比70∶30，流速3 mL/min)；反相柱层析流份75～76合并结晶得到化合物10(94.9 mg)。

1.4 CES2抑制活性测试

CES2活性测试实验过程参照文献中实验方法[8-10]。首先，向200 μL含有100 mM的磷酸钾缓冲液(pH 7.4)，0.2 μg/mL的人肝微粒体(HLM)，和选择性探针DDAB(10 μM)的体系中加入2 μL化合物1(10 mM)，在37 ℃恒温下孵育30 min后，加入100 μL冰乙腈充分混匀终止反应。之后，将反应液在20 000 g离心20 min，取上清液于酶标仪上检测600 nm处吸收。以不加入化合物的体系作为空白对照。

2 实验结果

从X.moluccensis种子中发现了11个柠檬苦素化合物(图1)，其中1个新的具有CES2抑制活性的化合物krishnolide E(化合物1)。

2.1 化合物的物理常数、波谱数据及结构解析

化合物1白色无定形粉末，易溶于氯仿、丙酮试剂，微溶于甲醇，不溶于水。分子式为C32H42O10。ESI-MS：m/z609.28 [M + Na]+(calcd for C32H42O10Na，609.27)，结合核磁共振氢谱(1H NMR)和碳谱(13C NMR)判断分子式为C32H42O10，不饱和度为12。1H NMR和13C NMR数据(表1)表明有7个不饱和度分别来源于1个酮羰基、3个酯羰基和3个碳碳双键，因此化合物1的结构中应该有五个环系。

图1 化合物1～11的化学结构Fig.1 The chemical structures of compounds 1-11

结合DEPT谱可知化合物1具有7个甲基(其中包括1个甲氧基、4个角甲基和2个取代基上的甲基)、5个亚甲基、9个次甲基(包括3个烯碳次甲基)和11个季碳(其中4个为羰基碳)。

表1 化合物1的1H NMR和13C NMR数据(400 MHz和100 MHz，CDCl3)

化合物1的1H和13C NMR数据与化合物xylomolin A3相似[5]，只有C-6碳数据区别较大，化合物1的C-6(δC33.2，CH2)的化学位移相对xylomolin A3(δC73.0 CH)明显移向高场，结合H-5/C-6，H2-6/C-7的HMBC远程相关信号确定化合物1的C-6位比xylomolin A3少羟基取代。

化合物1的相对立体构型由NOE相关信号确认(图2)。H-17/H-12β，H-17/H-5，H-5/H3-28，H-5/H-30之间的NOE相关信号表明H-5，H-17，H3-28，H-30位β构型，因而与C-30相连的OH为β构型。H-3/2-OH，H3-29/2-OH，H3-19/H-9，H3-18/H-11α，H3-18/H-15α之间的NOE相关信号表明H-3，H-9，H3-18，H3-19，2-OH为α构型。H-3与H3-29之间存在NOE相关信号，但H-3与H-5之间无NOE相关信号，表明H-3为α构型，而与C-3相连的2-甲基丁酰基为β构型。因此，化合物1被鉴定为1个新的墨西哥交酯型柠檬苦素，命名为krishnolide E，其结构如图1所示。化合物1的详细结构鉴定数据原始图谱可从本刊官网免费下载(www.trcw.ac.cn)。

图2 化合物1的关键1H-1H COSY、HMBC和NOE相关Fig.2 Key 1H-1H COSY,HMBC,and NOE correlations for compound 1

化合物2白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z593.28 [M + Na]+，分子式为C32H42O9。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：5.06(1H，s，H-3)，3.14(1H，dd，J= 9.6，3.2 Hz，H-5)，2.36(2H，d，J= 9.6 Hz，H2-6)，2.04(1H，s，H-9)，1.79(2H，m，H2-11)，1.11(1H，m，H-12α)，1.76(1H，m，H-12β)，3.47(1H，d，J= 21.0 Hz，H-15α)，3.87(1H，d，J= 21.0 Hz，H-15β)，5.65(1H，s，H-17)，1.06(3H，s，H3-18)，1.24(3H，s，H3-19)，7.40(1H，br s，H-21)，6.46(1H，br s，H-22)，7.54(1H，br s，H-23)，0.77(3H，s，H3-28)，0.69(3H，s，H3-29)，1.76(1H，m，H-30α)，3.23(1H，d，J= 15.0 Hz，H-30β)，3.69(3H，s，H3-7-OMe)，2.44(1H，m，H-2′)，1.51(1H，m，H-3′a)，1.76(1H，m，H-3′b)，1.01(3H，t，J= 7.2 Hz，H3-4′)，1.19(3H，d，J= 7.2 Hz，H3-5′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：217.5(C-1)，78.2(C-2)，85.3(CH-3)，39.1(C-4)，40.8(CH-5)，33.3(CH2-6)，174.0(C-7)，125.8(C-8)，52.0(CH-9)，52.1(C-10)，18.7(CH2-11)，29.0(CH2-12)，38.3(C-13)，133.0(C-14)，33.4(CH2-15)，169.6(C-16)，80.5(CH-17)，17.7(CH3-18)，17.7(CH3-19)，120.6(C-20)，142.9(CH-21)，109.9(CH-22)，141.7(CH-23)，20.1(CH3-28)，22.6(CH3-29)，44.0(CH2-30)，52.2(7-OMe)，176.0(C-1′)，41.5(CH-2′)，26.4(CH2-3′)，11.7(CH3-4′)，16.7(CH3-5′)。以上数据与文献[11]报道一致，故化合物2被鉴定为cipadesin N。

化合物3白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。分子式为C31H38O11。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：4.96(1H，s，H-3)，3.32(1H，s，H-5)，5.47(1H，s，H-6)，2.08(1H，m，H-9)，1.94(1H，m，H-11α)，1.76(1H，m，H-11β)，1.81(1H，m，H-12α)，1.17(1H，m，H-12β)，3.78(1H，d，J= 19.2 Hz，H-15α)，3.48(1H，dt，J= 19.2，3.0 Hz，H-15β)，5.60(1H，s，H-17)，1.06(3H，s，H3-18)，1.27(3H，s，H3-19)，7.54(1H，br s，H-21)，6.46(1H，br s，H-22)，7.44(1H，br s，H-23)，1.04(3H，s，H3-28)，0.84(3H，s，H3-29)，3.21(1H，d，J= 14.4 Hz，H-30α)，1.76(1H，m，H-30β)，3.74(3H，s，H3-7-OMe)，2.18(3H，s，H3-2′)，2.19(3H，s，H3-2′′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：216.6(C-1)，78.0(C-2)，86.6(CH-3)，39.4(C-4)，44.3(CH-5)，72.7(CH-6)，171.1(C-7)，125.6(C-8)，52.8(CH-9)，52.4(C-10)，18.6(CH2-11)，29.3(CH2-12)，38.3(C-13)，133.6(C-14)，33.5(CH2-15)，169.5(C-16)，80.7(CH-17)，16.8(CH3-18)，18.0(CH3-19)，120.4(C-20)，141.6(CH-21)，109.8(CH-22)，143.1(CH-23)，22.6(CH3-28)，22.6(CH3-29)，44.4(CH2-30)，53.3(7-OMe)，169.9(C-1′)，21.0(CH3-2′)，169.7(C-1′′)，21.3(CH3-2′′)。ESI-MS：m/z609.28 [M + Na]+。以上数据与文献[12]报道一致，故化合物3被鉴定为khayalenoid H。

化合物4白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z551.31 [M + Na]+，分子式为C29H36O9。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：3.05(1H，m，H-2)，3.63(1H，d，J= 9.6 Hz，H-3)，3.45(1H，br s，H-5)，5.45(1H，s，H-6)，2.02(1H，m，H-9)，1.89(1H，m，H-11α)，1.76(1H，m，H-11β)，1.84(1H，m，H-12α)，1.15(1H，m，H-12β)，3.45(1H，d，J= 21.0 Hz，H-15α)，4.00(1H，d，J= 21.2 Hz，H-15β)，5.52(1H，s，H-17)，1.01(3H，s，H3-18)，1.15(3H，s，H3-19)，7.54(1H，br s，H-21)，6.47(1H，br s，H-22)，7.41(1H，br s，H-23)，0.99(3H，s，H3-28)，0.94(3H，s，H3-29)，3.17(1H，dd，J= 14.4，2.4 Hz，H-30α)，2.00(1H，m，H-30β)，3.75(3H，s，H3-7-OMe)，2.17(3H，s，H3-2′)，3.69(1H，s，H-6-OH)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：218.9(C-1)，49.9(CH-2)，78.4(CH-3)，39.8(C-4)，43.0(CH-5)，73.5(CH-6)，171.3(C-7)，128.1(C-8)，52.6(CH-9)，54.1(C-10)，18.6(CH2-11)，28.8(CH2-12)，37.9(C-13)，131.8(C-14)，33.2(CH2-15)，171.3(C-16)，80.3(CH-17)，17.7(CH3-18)，17.0(CH3-19)，120.7(C-20)，141.5(CH-21)，110.0(CH-22)，142.8(CH-23)，23.1(CH3-28)，23.5(CH3-29)，33.6(CH2-30)，53.1(7-OMe)，169.9(C-1′)，21.0(CH3-2′)。以上数据与文献[13]报道一致，故化合物4被鉴定为6-O-acetylswietenolide。

化合物5白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z551.25 [M + Na]+，分子式为C29H36O9。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：4.87(1H，s，H-3)，3.28(1H，dd，J= 8.6，3.4 Hz，H-5)，2.36(2H，m，H2-6)，2.27(1H，m，H-9)，1.62(1H，m，H-11α)，1.17(1H，m，H-11β)，1.42(1H，m，H-12α)，1.67(1H，m，H-12β)，2.25(1H，m，H-14)，2.84(1H，m，H-15α)，2.90(1H，m，H-15β)，5.70(1H，s，H-17)，1.09(3H，s，H3-18)，1.23(3H，s，H3-19)，7.80(1H，br s，H-21)，6.47(1H，br s，H-22)，7.42(1H，br s，H-23)，0.81(3H，s，H3-28)，0.76(3H，s，H3-29)，5.38(1H，br s，H-30)，3.72(3H，s，H3-7-OMe)，2.13(3H，s，H3-2′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：215.0(C-1)，76.9(C-2)，84.9(CH-3)，39.1(C-4)，41.7(CH-5)，32.7(CH2-6)，173.9(C-7)，136.5(C-8)，56.4(CH-9)，49.5(C-10)，20.3(CH2-11)，34.2(CH2-12)，36.7(C-13)，44.9(CH-14)，30.0(CH2-15)，169.3(C-16)，77.2(CH-17)，22.0(CH3-18)，15.8(CH3-19)，120.6(C-20)，141.9(CH-21)，109.7(CH-22)，143.0(CH-23)，19.7(CH3-28)，21.9(CH3-29)，129.1(CH-30)，52.3(7-OMe)，170.9(C-1′)，20.5(CH3-2′)。以上数据与文献[14]报道一致，故化合物5被鉴定为ruageanin D。

化合物6白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z535.28 [M + Na]+，分子式为C29H36O8。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：3.50(1H，t，J= 7.6 Hz，H-2)，4.76(1H，br d，J= 9.4 Hz，H-3)，3.36(1H，dd，J= 7.6，4.2 Hz，H-5)，2.37(1H，m，H-6a)，2.17(1H，m，H-6b)，2.38(1H，m，H-9)，1.17(1H，m，H-11α)，1.64(1H，m，H-11β)，1.42(1H，m，H-12α)，1.67(1H，m，H-12β)，2.24(1H，m，H-14)，2.82(1H，br d，J= 18.2 Hz，H-15α)，2.92(1H，dd，J= 18.2，6.0 Hz，H-15β)，5.71(1H，s，H-17)，1.08(3H，s，H3-18)，1.14(3H，s，H3-19)，7.80(1H，br s，H-21)，6.47(1H，br s，H-22)，7.42(1H，br s，H-23)，0.82(3H，s，H3-28)，0.79(3H，s，H3-29)，5.36(1H，br d，J= 7.6 Hz，H-30)，3.72(3H，s，H3-7-OMe)，2.18(3H，s，H3-2′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：217.0(C-1)，56.4(CH-2)，77.3(CH-3)，38.1(C-4)，48.4(CH-5)，33.0(CH2-6)，174.1(C-7)，138.4(C-8)，41.6(CH-9)，49.9(C-10)，20.4(CH2-11)，30.1(CH2-12)，36.7(C-13)，45.2(CH-14)，34.4(CH2-15)，170.9(C-16)，77.5(CH-17)，20.4(CH3-18)，15.9(CH3-19)，120.7(C-20)，142.9(CH-21)，109.8(CH-22)，141.9(CH-23)，20.4(CH3-28)，22.1(CH3-29)，122.9(CH-30)，52.2(7-OMe)，169.6(C-1′)，22.5(CH3-2′)。以上数据与文献[15]报道一致，故化合物6被鉴定为3β-acetoxy-1-oxo-Δ8-30-methylmdicate。

化合物7白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z609.27 [M + Na]+，分子式为C31H38O11。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：5.56(1H，s，H-3)，3.50(1H，s，H-5)，4.75(1H，s，H-6)，2.31(1H，m，H-9)，1.81(1H，m，H-11α)，2.21(1H，m，H-11β)，1.46(1H，m，H-12α)，1.77(1H，m，H-12β)，2.27(1H，m，H-14)，2.87(1H，m，H-15α)，2.88(1H，m，H-15β)，5.64(1H，s，H-17)，1.07(3H，s，H3-18)，1.08(3H，s，H3-19)，7.71(1H，br s，H-21)，6.45(1H，br s，H-22)，7.44(1H，br s，H-23)，1.27(3H，s，H3-28)，0.92(3H，s，H3-29)，5.36(1H，br s，H-30)，3.74(3H，s，H3-7-OMe)，2.19(1H，s，CH3-2′)，2.12(1H，s，CH3-2′′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：214.0(C-1)，76.9(C-2)，85.6(CH-3)，39.4(C-4)，44.9(CH-5)，72.5(CH-6)，171.0(C-7)，136.4(C-8)，57.0(CH-9)，49.6(C-10)，20.8(CH2-11)，34.3(CH2-12)，36.6(C-13)，44.8(CH-14)，29.9(CH2-15)，170.7(C-16)，77.2(CH-17)，20.4(CH3-18)，15.6(CH3-19)，120.7(C-20)，141.4(CH-21)，109.5(CH-22)，143.1(CH-23)，21.9(CH3-28)，22.1(CH3-29)，129.4(CH-30)，53.4(7-OMe)，169.1(C-1′)，22.1(CH3-2′)，169.7(C-1′′)，21.0(CH3-2′′)。以上数据与文献[16]报道一致，故化合物7被鉴定为humilinolide D。

化合物8白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z579.29 [M + Na]+，分子式为C31H40O9。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：4.89(1H，s，H-3)，3.33(1H，dd，J= 8.6，3.0 Hz，H-5)，2.37(1H，m，H-6a)，2.17(1H，m，H-6b)，2.33(1H，m，H-9)，1.17(1H，m，H-11α)，1.62(1H，m，H-11β)，1.42(1H，m，H-12α)，1.67(1H，m，H-12β)，2.25(1H，m，H-14)，2.89(1H，m，H-15α)，2.90(1H，m，H-15β)，5.68(1H，s，H-17)，1.23(3H，s，H3-18)，1.11(3H，s，H3-19)，7.80(1H，br s，H-21)，6.47(1H，br s，H-22)，7.42(1H，br s，H-23)，0.81(3H，s，H3-28)，0.77(3H，s，H3-29)，5.38(1H，br s，H-30)，3.72(3H，s，7-OMe)，2.67(1H，m，H-2′)，1.19(1H，d，J= 7.2 Hz，H-3′)，1.19(1H，d，J= 7.2 Hz，H-4′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：215.1(C-1)，76.9(C-2)，84.6(CH-3)，39.5(C-4)，41.5(CH-5)，32.7(CH2-6)，173.8(C-7)，136.6(C-8)，56.6(CH-9)，49.4(C-10)，20.5(CH2-11)，34.3(CH2-12)，36.8(C-13)，45.0(CH-14)，29.8(CH2-15)，169.2(C-16)，76.9(CH-17)，21.9(CH3-18)，15.7(CH3-19)，120.8(C-20)，142.0(CH-21)，109.7(CH-22)，143.0(CH-23)，19.9(CH3-28)，21.9(CH3-29)，129.0(CH-30)，52.3(7-OMe)，176.7(C-1′)，34.0(CH-2′)，19.1(CH3-3′)，18.6(CH3-4′)。以上数据与文献[17]报道一致，故化合物8被鉴定为methyl-2-hydroxy-3β-isobutyroxy-1-oxomeliac-8(30)-enate。

化合物9白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z593.26 [M + Na]+，分子式为C32H42O9。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：3.31(1H，dd，J= 17.2，8.0 Hz，H-2)，4.91(1H，d，J= 8.0 Hz，H-3)，3.48(1H，d，J= 8.0 Hz，H-5)，2.37(1H，m，H-6a)，2.32(1H，m，H-6b)，1.83(1H，d，J= 13.0 Hz，H-9)，1.66(1H，m，H-11α)，1.53(1H，m，H-11β)，2.00(1H，m，H-12α)，1.28(1H，m，H-12β)，6.12(1H，s，H-15)，5.18(1H，s，H-17)，1.28(3H，s，H3-18)，1.13(3H，s，H3-19)，7.51(1H，br s，H-21)，6.50(1H，br s，H-22)，7.44(1H，br s，H-23)，0.77(3H，s，H3-28)，0.85(3H，s，H3-29)，2.47(1H，dd，J= 15.6，6.8 Hz，H-30α)，3.18(1H，dd，J= 15.6，6.8 Hz，H-30β)，3.71(3H，s，7-OMe)，2.39(1H，m，H-2′)，1.51(1H，m，H-3′a)，1.72(1H，m，H-3′b)，0.96(3H，t，J= 7.0 Hz，H3-4′)，1.19(3H，d，J= 7.2 Hz，H3-5′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：217.5(C-1)，44.7(CH-2)，77.6(CH-3)，39.8(C-4)，41.5(CH-5)，33.1(CH2-6)，173.9(C-7)，72.7(C-8)，60.8(CH-9)，48.4(C-10)，20.7(CH2-11)，33.6(CH2-12)，38.7(C-13)，168.3(C-14)，116.0(CH-15)，164.8(C-16)，79.8(CH-17)，23.1(CH3-18)，18.6(CH3-19)，119.8(C-20)，141.8(CH-21)，110.5(CH-22)，143.1(CH-23)，23.2(CH3-28)，23.0(CH3-29)，35.9(CH2-30)，52.1(7-OMe)，175.5(C-1′)，41.4(CH-2′)，26.7(CH2-3′)，11.8(CH3-4′)，16.9(CH3-5′)。以上数据与文献[18]报道一致，故化合物9被鉴定为xylomexicanin B。

化合物10白色无定形粉末;易溶于DMSO，微溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z681.32 [M + Na]+，分子式为C35H46O12。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：4.78(1H，s，H-3)，2.51(1H，m，H-5)，2.29(2H，m，H2-6)，2.00(1H，t，J= 9.0 Hz，H-9)，1.90(1H，m，H-11α)，2.13(1H，m，H-11β)，1.21(1H，m，H-12α)，1.90(1H，m，H-12β)，6.23(1H，s，H-15)，4.86(1H，s，H-17)，1.12(3H，s，H3-18)，0.99(3H，s，H3-19)，7.74(1H，br s，H-21)，6.53(1H，br s，H-22)，7.72(1H，br s，H-23)，0.59(3H，s，H3-28)，1.21(3H，s，H3-29)，5.53(1H，s，H-30)，3.59(3H，s，7-OMe)，2.55(1H，m，H-2′)，1.02(3H，d，J= 7.0 Hz，H3-3′)，1.02(3H，d，J= 7.0 Hz，H3-4′)，2.37(1H，m，H-2′′)，1.06(3H，d，J= 7.2 Hz，H3-3′′)，1.06(3H，d，J= 7.2 Hz，H3-4′′)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：108.7(C-1)，79.8(C-2)，81.2(CH-3)，38.6(C-4)，40.4(CH-5)，31.9(CH2-6)，174.2(C-7)，80.9(C-8)，50.9(CH-9)，42.8(C-10)，14.6(CH2-11)，25.2(CH2-12)，38.6(C-13)，159.4(C-14)，118.6(CH-15)，163.4(C-16)，81.1(CH-17)，19.7(CH3-18)，21.0(CH3-19)，120.3(C-20)，141.9(CH-21)，110.4(CH-22)，144.1(CH-23)，24.1(CH3-28)，22.1(CH3-29)，75.2(CH-30)，52.1(7-OMe)，175.7(C-1′)，33.9(CH-2′)，18.9(CH3-3′)，19.1(CH3-4′)，175.7(C-1′′)，33.9(CH-2′′)，19.1(CH3-3′′)，19.4(CH3-4′′)。以上数据与文献[19]报道一致，故化合物10被鉴定为xylogranin A。

化合物11白色无定形粉末;易溶于氯仿、丙酮。ESI-MS：m/z487.27 [M + H]+，分子式为C27H34O8。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.67(1H，d，J= 10.4 Hz，H-1)，5.93(1H，d，J= 10.4 Hz，H-2)，1.95(1H，br s，H-5)，3.94(1H，m，H-6a)，4.10(1H，m，H-6b)，3.32(1H，d，J= 10.8 Hz，H-9)，1.57(1H，m，H-11α)，1.46(1H，m，H-11β)，1.50(1H，m，H-12α)，1.78(1H，m，H-12β)，3.68(1H，s，H-15)，5.42(1H，s，H-17)，1.23(3H，s，H3-18)，1.19(3H，s，H3-19)，7.38(1H，br s，H-21)，6.33(1H，br s，H-22)，7.38(1H，s，H-23)，1.26(3H，s，H3-28)，1.07(1H，s，H3-29)，1.26(1H，s，H3-30)，3.80(3H，s，7-OMe)，2.16(1H，s，H-6-OH)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：152.4(CH-1)，126.4(CH-2)，203.4(C-3)，45.0(C-4)，51.4(CH-5)，61.2(CH2-6)，176.4(C-7)，43.2(C-8)，43.2(CH-9)，50.9(C-10)，21.7(CH2-11)，32.6(CH2-12)，37.9(C-13)，68.2(C-14)，51.5(CH-15)，166.7(C-16)，78.4(CH-17)，19.5(CH3-18)，18.3(CH3-19)，119.9(C-20)，141.0(CH-21)，109.9(CH-22)，143.1(CH-23)，24.4(CH3-28)，23.3(CH3-29)，15.3(CH3-30)，53.4(7-OMe)。以上数据与文献[20]报道一致，故化合物11被鉴定为deacetylsecomahoganin。

2.2 化合物1的生物活性

对分离得到的新化合物1进行了人羧酸酯酶2的抑制活性测试，结果表明，在100 μM浓度下化合物1对人羧酸酯酶2的抑制率为63%。

3 结论

本文通过对印度红树植物X.moluccensis种子中的次生代谢产物研究，分离鉴定了11个柠檬苦素，全部化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物1～10为墨西哥交酯型柠檬苦素，化合物1～4、5～8、9分别含有Δ8,14、Δ8,30、Δ14,15双键，化合物10含有1,8-半缩醛结构。化合物11为Secomahoganin型柠檬苦素，结构上由gedunin的B环氧化为C-7为羰基的内酯环，内酯环开环衍生而来，是X.moluccensis中较少见的柠檬苦素类型。其中化合物1为一个新的墨西哥交酯型柠檬苦素，通过NMR和MS手段并结合文献，确定了该化合物的结构及相对立体构型。研究结果表明印度X.moluccensis种子中富含柠檬苦素化合物，为进一步丰富该属植物的柠檬苦素结构多样性，研究地域性对木果楝属植物的次生代谢产物的影响提供了基础数据。对新化合物1进行了羧酸酯酶2的抑制活性测试，结果表明该化合物在浓度100 μM下对CES2的抑制率为63%。目前文献中关于柠檬苦素类化合物的羧酸酯酶2的抑制活性报道较少，本研究对进一步扩展柠檬苦素的药理活性及作用机制研究，从红树植物中发现具有CES2抑制活性的先导化合物提供了实验依据。