HIV早期感染检测诊断中不同HIV抗原/抗体检测方法的应用

张凤桐

（辽宁省大连市长海县疾病预防控制中心，辽宁 大连 116599）

艾滋病属于全球性传染性疾病，对人类生命健康造成极大的损害，主要通过吸毒、性接触、输血等途径传播，患者机体免疫力明显降低，随着病情进展，并发症发生率随之升高，容易加大患者死亡风险[1]。当前，免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测为艾滋病实验室诊断金标准，HIV感染早期未检测到抗体或者未产生抗体时期为窗口期，急性期HIV具有极强的传播能力，因此，在此阶段进行感染治疗能够取得确切疗效[2]。早期患者缺乏特异性表现，而且早期抗原亲和力低、抗体滴度低，临床漏诊率较高，因此，早期进行敏感实验室筛查对于提高病情检出率及促进患者改善预后有重要价值[3]。临床采用多种抗原抗体检查方法筛查HIV病毒，第四代HIV检测试剂能够对HIV p24抗原及抗体进行检测，能够使检测效能得到显著提高，但是不同试剂盒检测结果存在较大差异，此次研究应用第四代HIV检测试剂盒对疑似HIV感染血液样本进行检测，报道如下，

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究以3791份性服务工作者及吸毒人员血液标本为研究对象，严格按照实验室相关规范对血液标本进行分离、离心及保存等操作。

1.2 方法 应用产自美国BBI公司的BBI阳转血清盘，每套含样品4～8份，应用产自英国Abbott公司第4代HIV试剂盒，检测试剂：Murex HIV Ag/Ab，编号A，应用产自荷兰Organon公司第四代HIV试剂盒，检测试剂：Vironostika HIV Uni-form ⅡAg/Ab，编号B，应用产自英国Abbott公司第3代HIV试剂盒，检测试剂：Murex HIV-1.2.0，编号C，应用北京普瑞麦迪实验室技术有限公司生产的HIV间接荧光抗体试验试剂盒，分别检测上述血液样本及BBI阳转血清盘。所用仪器与试剂如下：mini-VIDSA分析仪、Bio-Rad MODEL1575型洗板机、雅培Axsym化学发光免疫分析仪、罗氏ELECYS2010变色龙酶免仪。分别应用两种试剂盒通过酶联免疫法（ELISA）及快速法进行HIV平行检测，若出现检测结果不一致现象，则对阳性血样及血液标本进行双孔复试以便对HIV感染状态进行确定。完成检测后，时候用间接荧光抗体实验法重新确认所有样本，严格根据试剂盒说明进行各项操作。记录和统计初次检出阳性样本采样时间并对两种试剂盒检测窗口期差异进行对比和分析，描述BBI转阳血清盘检测结果。

1.3 评价指标 ①分析试剂A、B检测HIV诊断学评价指标，对比两种试剂的检测特异度、灵敏度及误诊率、漏诊率；②比较两种第4代试剂检出结果；③分析不同试剂对BBI阳转血清盘（PRB924、PRB930、PRB942、PRB944）检出窗口期情况。

1.4 统计学方法 应用及分析本次研究应用SPSS10.0软件包进行数据资料处理及分析，通过χ2检验组间计量资料并分析试剂盒检测结果差异是否存在统计学意义，检验水准α=0.05，P＜0.05，组间对比可见显著差异。

2 结果

2.1 分析试剂A、B检测HIV诊断学评价指标 所检测的3791份血液样本中共计53份样本确诊为HIV感染阳性样本，检出率1.40%。分别应用试剂盒A、B同步检测所有样本，检测结果表明两种试剂盒均检测出54份HIV感染阳性样本，其中，试剂A检测特异度99.65%、灵敏度100.00%、误诊率0.35%、漏诊率0，试剂B检测特异度99.38%、灵敏度100.00%、误诊率0.62%、漏诊率0，两种检测方式检测特异度、灵敏度、误诊率以及漏诊率差异均无统计学意义，P＞0.05。见表1、表2。

表1 分析试剂A及P24检出结果比较

表2 对比分析试剂B及P24检出结果

2.2 比较两种第4代试剂检出结果 对比试剂A及试剂B检测结果差异不存在统计学意义，P＞0.05。见表3。

表3 两种第4代试剂检出结果比较[n（%）]

2.3 不同试剂对BBI阳转血清盘检出窗口期情况比较 分析试剂A、B较C试剂检测窗口期明显提前，但是试剂A、B较P24试剂滞后。见表4。

表4 不同试剂对BBI阳转血清盘检出窗口期情况比较

3 讨 论

艾滋病即获得性格免疫缺陷综合征，主要由于反转录病毒HIV感染破坏全身免疫系统，而且HIV病毒可通过精液、血液以及接触肛门、生殖器、口腔等黏膜组织传染，患者机体免疫力明显降低，容易导致神经系统、呼吸系统、泌尿系统以及消化系统等全身多个器官受累，出现真菌、细菌以及病毒感染的风险也随之升高，若病情得不到及时有效的控制，患者面临极高的残疾风险以及死亡风险[4]。HIV病毒感染患者担心受到社会歧视，自身承受着巨大的心理压力以及精神负担，部分患者还会产生愤世嫉俗甚至报复社会的心理，对社会稳定也会造成不良影响[5-6]。

艾滋病病毒（HIV）抗体诊断试剂自1985年问世以来，不断获得改进，诊断试剂特异性以及敏感性获得了显著提高，主要检测方式包括HIV核酸检测、HIV抗体检测以及HIV抗原抗体联合检测等[7-8]。ELISA检测属于第三代试剂检测方法，与第一代及第二代试剂相比，其检测特异度以及灵敏度均获得一定程度的提高，但是由于抗体产生需要一定的时间和过程，因此，抗体产生前早期HIV感染无法获得检测，HIV检测窗口问题极大地影响HIV早期检出率。第四代试剂盒可同时进行P24抗原及抗体检测，窗口期获得显著缩短，而且与第三代试剂盒相比，检测时间也明显提前[9-10]。

此次研究中，所检测的3791份血液样本中共计53份样本确诊为HIV感染阳性样本，检出率1.40%。试剂A与试剂B两种检测方式检测特异度、灵敏度、误诊率以及漏诊率差异均无统计学意义，P＞0.05。A、B试剂盒检测特异度及灵敏度均较高，原因可能在于第四代试剂同时将P24抗原检测及HIV-1/2抗体检测于一个微孔内同时反应，一次实验可进行两种标志物检测，将生物素-链亲和素放大系统加入P24抗原检测系统中，不但能够显著加大ELISA反应灵敏度，同时还不会对P24抗原检测结果产生影响[11]。

作为评价HIV早期感染检测方法的有效工具，HIV阳转血清盘能够使各种试剂检测窗口期获得准确反映。此次研究中，对比试剂A及试剂B检测结果差异不存在统计学意义，P＞0.05。试剂A、B较C试剂检测窗口期提前，但是试剂A、B较P24试剂滞后。表明第四代试剂艾滋病毒早期感染检出率较高，本研究中，与B试剂相比，A试剂窗口期明显更短，A试剂检测效果可能较B试剂更为理想。与王晓红[12]研究结果一致。

综上所述，第四代HIV抗体试剂盒HIV感染检测能力较强，而且有助于使HIV感染检出窗口期获得提前，能够为临床准确判断患者病情提供重要科学依据，从而可为临床医师制订针对性病情控制方案提供信息，既能够促进患者病情改善，控制HIV传播，还可为用血安全性提供保障。