2019—2020年酒泉市猪肉样品猪链球菌污染情况调查及耐药性分析

夏冰芝

（酒泉职业技术学院，甘肃 酒泉 735000）

猪肉消费一直是我国传统，但生猪在饲养、屠宰、分割、运输和售卖等环节易受到病原菌污染，其中运输和售卖环节受外界致病菌污染情况相对严重，且部分致病菌可感染人，对消费者健康产生威胁[1]。猪链球菌为典型的机会致病菌，且该病原在猪场、菜市场和饭店等公众环境中广泛存在，猪链球菌存在多种血清型，部分血清型（如2型）可感染人。猪链球菌可通过黏膜或消化道等途径感染宿主，导致脑膜炎和败血症等，甚至是死亡[2]。近年来，人感染猪链球菌病的案例频繁发生，其中大部分患者都有猪肉接触、食用或屠宰生猪时受伤等情况发生[3-5]，提示污染猪链球菌的猪肉对从事生猪养殖、屠宰、售卖及消费猪肉的人员健康威胁巨大。

彭少静等对重庆地区猪肉样品猪链球菌污染情况进行调查，其结果发现该地区猪肉样品中链球菌平均检出率达24.5%[2]；景小金等调查结果显示，贵州省鲜猪肉链球菌污染率为10.7%（12/112）[6]，提示我国市售猪肉猪链球菌污染情况严重。本研究于2019—2020年从酒泉市部分地区采集新鲜猪肉样品300份，调查样品中链球菌污染情况，并随机挑选部分菌株进行药敏试验，旨在了解该地区市售猪肉链球菌污染情况及耐药情况，为采取相应防控措施提供科学借鉴。

1 材料与方法

1.1 样品来源

本研究于2019年6—10月和2020年6—9月从酒泉市肃州区、玉门市和金塔县部分地区收集市售新鲜猪肉样品共300份，其中2019年和2020年分别收集样品194份和106份；从当地屠宰场、超市、菜市场和饭店分别采集样品84份、103份、59份和54份。每份样品重约30 g，装入洁净封口袋内，标记后低温送至酒泉职业技术学院保存，检测。

1.2 样品中链球菌的分离与鉴定

用接种环蘸取少量样品表面和深处组织液，在鲜血琼脂培养基表面进行平板划线，37 ℃环境下培养18 h，挑取单一、表面光滑、湿润且透明菌落进行革兰氏染色鉴定，根据菌落形态学特征对其进行鉴定，确定样品中链球菌检出情况。

1.3 细菌药敏试验

采用纸片扩散法对部分获得的链球菌进行药敏试验，将单一链球菌菌株进行扩菌培养，其后将菌液稀释至1×107CFU/mL，均匀涂布在普通营养琼脂培养基表面，在每个平皿上放4个药敏纸片，37 ℃培养24 h后，测定不同药敏纸片的抑菌圈直径。

2 调查结果

2.1 酒泉市市售猪肉链球菌污染情况调查结果

对酒泉市部分地区市售猪肉链球菌污染情况进行调查，300份样品中共84份检测含有猪链球菌污染，平均检出率为28.00%。按样品地区来源进行归纳，玉门市和金塔县来源样品检出率较肃州区稍高，分别为33.70%、32.14%和20.97%；受新冠疫情影响，本研究于2019年6—10月和2020年6—9月采集样品数量分别为194份和106份，猪链球菌平均检出率分别为31.44%和21.70%。其结果详见表1。

表1 酒泉市市售猪肉链球菌污染情况调查结果

2.2 不同来源猪肉样品链球菌污染情况调查结果

为评估市售猪肉在不同环境下链球菌污染情况差异，本次研究分别从当地屠宰场、超市、菜市场和饭店收集新鲜猪肉样品84份、103份、59份和54份，检测结果表明，饭店来源猪肉样品链球菌检出率最高，为44.44%；屠宰场来源样品检出率最低，为11.90%；而超市和菜市场来源样品检出率分别为26.21%和38.98%，详见表2。

表2 不同来源猪肉样品链球菌污染情况调查结果

2.3 分离菌株耐药性分析结果

为初步分析酒泉市市售猪肉链球菌耐药情况，本研究从分离获得的84株链球菌分离株中随机挑选21株，调查这些菌株对阿莫西林、氨苄西林、头孢噻肟、头孢拉定、头孢唑林、庆大霉素、四环素、链霉素、大观霉素、复方新诺明、磺胺甲氧嘧啶、环丙沙星、氯霉素和呋喃唑酮共14种常见抗生素的耐药情况。结果如表3所示，随机挑选的21株链球菌分离株对复方新诺明、磺胺甲氧嘧啶、庆大霉素和氯霉素产生耐药性比例均高于70.00%，其中对复方新诺明的耐药率达100.00%；对头孢类药物（如头孢噻肟、头孢拉定等）、氨苄西林、阿莫西林和呋喃唑酮等抗生素耐药率较低，提示此类药物可以作为治疗当地猪链球菌病的首选药物。

表3 链球菌分离株耐药性检测结果

3 讨论

本研究对酒泉市部分地区市售猪肉链球菌污染情况进行调查，发现该地区市售猪肉样品链球菌平均检出率达28.00%（84/300），其检出率高于2016年重庆地区调查结果（24.5%，132/538）[2]，同时也提示酒泉市市售猪肉链球菌污染情况十分严重。进一步分析结果显示，2019年和2020年被调查样品链球菌污染率分别为31.44%和21.70%。笔者猜测受新冠疫情影响，国民对肉制品微生物污染问题逐渐重视，同时也提高了猪肉制品卫生管理水平和消毒频率，这在一定程度上降低了猪肉链球菌污染率。此外，不同来源猪肉样品链球菌污染情况存在差异，其中饭店来源样品检出率最高（44.44%），超市和菜市场来源样品检出率居中，而屠宰场来源样品检出率最低（11.90%），提示猪肉样品在加工和售卖过程中容易受到细菌性病原污染，说明猪肉在此类工作中应该注意消毒或卫生管理水平等。

此外，本次研究分离的猪链球菌菌株对不同抗生素耐药性存在较大差异，其中对复方新诺明、磺胺甲氧嘧啶和庆大霉素等常见抗生素具有较强的耐药性，可能是此类药物在猪场十分常见，导致耐药株出现几率较大；但对阿莫西林、氨苄西林和头孢类药物较为敏感，提示未来猪场链球菌病的防控可以选择此类药物，但需注意穿梭用药，以防止耐药菌的出现。