4种常用水产药物对西杂鲟幼鱼的急性毒性试验

曾泽国 温旭 方园 吴真 钟颖良 刘斌 张家海 张建铭 曾庆祥

(1 江西省赣州市水产研究所,江西赣州 341100;2 浙江省德清县农业技术推广中心，浙江湖州 313200)

西杂鲟是雌性史氏鲟(Acipenserschrenckii)和雄性西伯利亚鲟(Acipenserbaerii)的杂交子一代，具有抗逆性强、病害少、适温性广等优良的生物学性状和较高的营养价值及经济价值，是具有特色的名优水产品，发展前景广阔。近年来，西杂鲟在四川、湖北、云南、福建和江西等省份得到了广泛推广和养殖，逐渐成为渔业结构调整的理想养殖品种。目前对西杂鲟的研究主要集中在苗种培育和人工养殖等方面[1-3]，尚未见有关水产药物对西杂鲟幼鱼急性毒性的报道。西杂鲟对水环境的变化反应十分灵敏，当水体中的污染物毒性达到一定程度时，鱼体会产生一系列急性毒性反应，如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变等，甚至出现死亡。高锰酸钾、溴氯海因、氯化钠、聚维酮碘是4种常用的水产消毒药物，研究西杂鲟幼鱼对这些常用水产药物的急性毒性反应，确定每种药物的半致死浓度(LC50)和安全浓度(SC)，可为西杂鲟的健康养殖提供科学依据，有助于促进西杂鲟养殖产业的健康发展。

1 材料和方法

1.1 试验材料

试验用西杂鲟幼鱼来自江西省赣州市龙南县武当镇惠泽鲟鱼养殖场。试验鱼平均体长11.40 cm，平均体质量10.10 g。筛选试验鱼并用氯化钠将其消毒(3%氯化钠水溶液药浴5～10 min)后，在水族箱中驯养7 d。试验用水与驯养用水相同，均为经过滤沉淀的山泉水，水质符合饮用水国家标准。驯养期间，每天保持12～16 h光照，每日定时定量投喂不含任何药物的饲料，清除排泄物，每天换水1次，保持水质清澈透明。驯养48 h后开始记录试验鱼的死亡率，若7 d内死亡率大于10%，则舍弃整批试验鱼；若死亡率在5%～10%，则继续驯养7 d；若死亡率小于5%，则可用于试验。选择身体健康，反应灵敏，大小基本一致的幼鱼，随机分组后进行试验。

每天测定水温、pH和溶解氧。试验期间，水温20～25 ℃，pH 6.0～8.5，溶解氧>5 mg/L。

高锰酸钾、溴氯海因、氯化钠、聚维酮碘试剂均为分析纯，购于南昌毓顿科技有限公司。试验时用蒸馏水将各试验药物稀释配成一定质量浓度的母液，现用现配。

1.2 试验方法

室温条件下，在规格48 cm×34 cm×25 cm(长×宽×高)的塑料方桶中进行试验，并以自然状态作为对照。试验前将方桶在日光下曝晒1周后，用3%的氯化钠水溶液浸泡12 h以上，洗净。试验期间，每12 h更换1次药液，以保持药液浓度。所有试验组24 h连续充氧，不投饲。

先通过静水停食法预备试验[4-9]初步确定试验药物浓度的大致范围，采用等对数间距法设置5个浓度试验组和1个对照组，每组放试验鱼10尾，并设1个重复。在试验过程中，连续观察受试鱼的行为、中毒症状、死亡效应。如5 min内多次刺激无反应即可判断试验鱼死亡。将死亡鱼及时捞出，并记录死亡时间。记录各试验组24、48、72、96 h时鱼的存活情况。

表1 聚维酮碘对西杂鲟幼鱼的毒性急性试验结果

1.3 数据处理

根据试验结果，使用改进寇氏法[6,9]计算半数致死浓度(LC50)。

LC50=Log-1[Xi-i(∑p-0.5)]

(1)

式(1)中，Xi为最高剂量组对数值，i为组距(相邻两组剂量对数值之差)，∑p为死亡率总和。

安全浓度(SC)是长期、连续接触仍对生物的生存、生长、繁殖无不良影响的浓度。安全浓度的计算公式[9-10]如下。

SC=48 h LC50×0.3/(24 h LC50/48 h LC50)2

(2)

2 结果

2.1 西杂鲟幼鱼对4种药物的中毒反应

当高锰酸钾、溴氯海因、氯化钠、聚维酮碘达到一定浓度时，西杂鲟幼鱼均有相似的中毒反应，表现为游动缓慢、翻肚、冲撞，逐渐失去行动能力直至死亡。死亡后的鱼体通常表现为尾部卷曲、鳃部出血、吻部及腹部充血、体表黏液增多并伴有体色改变或染有药液颜色。聚维酮碘中毒的鱼体腹部染有黄色，溴氯海因、氯化钠中毒的鱼体发白，高锰酸钾中毒的鱼体腹部染有紫色。

2.2 聚维酮碘的急性毒性试验结果

根据预备试验结果，采用等对数间距法设置6.50、7.15、7.87、8.65、9.50 mg/L共5个质量浓度梯度组。试验结果见表1。当聚维酮碘质量浓度为9.50 mg/L时，1 h内试验鱼即开始出现死亡，24 h死亡率达86.70%，48 h幼鱼全部死亡。当聚维酮碘质量浓度为8.65 mg/L时，6 h出现幼鱼死亡，24 h死亡率达30.00%，96 h死亡率达83.30%。当聚维酮碘质量浓度为7.87 mg/L时，10 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率为3.30%，96 h死亡率为20.00%。当聚维酮碘质量浓度为7.15 mg/L时，24 h内未出现幼鱼死亡，28 h开始出现死亡，48 h内死亡率为3.30%，96 h死亡率为10.00%。当聚维酮碘质量浓度为6.50 mg/L时，96 h试验幼鱼未出现死亡。随着作用时间的延长，聚维酮碘对试验鱼的半致死质量浓度(LC50)逐渐降低，24、48、72、96 h的半致死质量浓度分别为8.81、8.50、8.34、8.17 mg/L，安全质量浓度(SC)为2.37 mg/L。

2.3 溴氯海因的急性毒性试验结果

根据预备试验结果，采用等对数间距法设置了0.70、0.79、0.90、1.02、1.15 mg/L共5个质量浓度梯度组。试验结果显示，当溴氯海因质量浓度为1.15 mg/L时，第2 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率达83.30%，48 h试验幼鱼全部死亡。当溴氯海因质量浓度为1.02 mg/L时，5 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率达53.30%，96 h死亡率达83.30%。当溴氯海因质量浓度为0.90 mg/L时，6 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率为30.00%，96 h死亡率为40.00%。当溴氯海因质量浓度为0.79 mg/L时，11 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率为3.30%，96 h死亡率为13.30%。当溴氯海因质量浓度为0.70 mg/L时，96 h内试验幼鱼未出现死亡。随着作用时间的延长，溴氯海因对幼鱼的半致死质量浓度(LC50)逐渐降低，24、48、72、96 h的半致死质量浓度分别为0.98、0.95、0.94、0.91 mg/L，安全质量浓度(SC)为0.27 mg/L(见表2)。

表2 溴氯海因对西杂鲟幼鱼的毒性急性试验结果

表3 氯化钠对西杂鲟幼鱼的毒性急性试验结果

2.4 氯化钠的急性毒性试验结果

根据预备试验结果，采用等对数间距法设置了11 800.00、12 684.00、13 407.00、14 171.00、14 900.00 mg/L共5个质量浓度梯度组。试验结果显示，当氯化钠质量浓度为14 900.00 mg/L时，1 h即出现幼鱼死亡，48 h试验幼鱼全部死亡，死亡率达100%。当氯化钠质量浓度为14 171.00 mg/L时，4 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率达40.00%，96 h死亡率达93.30%。当氯化钠质量浓度为13 407.00 mg/L时，7 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率达33.30%，96 h死亡率达56.70%。当氯化钠质量浓度为12 684.00 mg/L时，18 h时出现幼鱼死亡，24 h死亡率为6.70%，96 h死亡率达40.00%。当氯化钠质量浓度为118 000 mg/L时，96 h内未出现幼鱼死亡。随着作用时间的延长，氯化钠对西杂鲟幼鱼的半致死质量浓度(LC50)逐渐降低，24、48、72、96 h的半致死质量浓度分别为13 954.78、13 545.83、13 292.42、13 139.48 mg/L，安全质量浓度(SC)为3 829.06 mg/L(见表3)。

2.5 高锰酸钾的急性毒性试验结果

根据预备试验结果，采用等对数间距法设置了2.10、2.34、2.61、2.90、3.20 mg/L共5个质量浓度梯度组。试验结果显示，当高锰酸钾质量浓度为3.20 mg/L时，1 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率达86.70%，48 h内试验幼鱼全部死亡。当高锰酸钾质量浓度为2.90 mg/L时，5 h开始出现幼鱼死亡，24 h死亡率36.70%，96 h死亡率达66.70%。当高锰酸钾质量浓度为2.61 mg/L时，17 h出现幼鱼死亡，24 h死亡率为10.00%，96 h幼鱼死亡率为16.70%。当高锰酸钾质量浓度为2.34 mg/L时，48 h内未出现幼鱼死亡，96 h死亡率为3.30%。当高锰酸钾质量浓度为2.10 mg/L时，96 h内未出现幼鱼死亡。随着作用时间的延长，高锰酸钾对西杂鲟幼鱼的半致死浓度(LC50)逐渐降低，24、48、72、96 h的半致死质量浓度分别为2.94、2.89、2.82、2.77 mg/L，安全质量浓度(SC)为0.84 mg/L(见表4)。

表4 高锰酸钾对西杂鲟幼鱼的毒性急性试验结果

3 讨论

3.1 聚维酮碘的药效及使用

聚维酮碘是碘伏消毒剂，被广泛用于鱼体皮肤消毒，是较为有效的广谱消毒杀菌剂[11]。本试验结果显示，聚维酮碘对西杂鲟幼鱼的安全质量浓度为2.37 mg/L，稍高于同类的杂交鲟(1.89 mg/L)[6]，说明西杂鲟对聚维酮碘的耐受性较杂交鲟强。与许多常见养殖鱼类相比，西杂鲟幼鱼对聚维酮碘的耐受性更强一些，其安全质量浓度是泥鳅(0.27 mg/L)[12]的近10倍，是黄颡鱼(0.062 9 mg/L)[13]的37倍，略高于黄尾鲴(2.06 mg/L)[14]。这可能是由于西杂鲟皮肤裸露、无鳞片且分泌有大量黏液，这些黏液对鱼体有良好的保护作用。试验表明，聚维酮碘对西杂鲟幼鱼的安全浓度高于生产中常用剂量，因此可作为生产中首选的消毒杀菌药物。

3.2 溴氯海因的药效及使用

溴氯海因是1种氧化性杀菌剂，通过氧化生物体内的磷酸脱氢酶灭杀微生物，在渔业生产中的常用剂量为0.3～0.4 mg/L[5]。本试验结果显示，溴氯海因对西杂鲟幼鱼的安全质量浓度为0.27 mg/L，略低于渔业生产中常用的剂量。有研究表明，溴氯海因对黄颡鱼的安全质量浓度为0.86 mg/L[15]，对福瑞鲤的安全质量浓度为11.70 mg/L[16]，对草鱼的安全质量浓度是4.68 mg/L[17]，对白斑狗鱼的安全质量浓度是1.10 mg/L[5]，均高于对西杂鲟的安全浓度，可见西杂鲟对溴氯海因的敏感性高于许多常见鱼类。因此，不建议在养殖生产中使用溴氯海因。

3.3 氯化钠的药效及使用

NaCl是淡水养殖中常见的消毒药物，可防治细菌性、真菌和寄生虫等鱼类病害[10]。NaCl是通过改变病原体渗透发挥功效的，但当NaCl浓度过高时，会引起鱼体脱水、体表黏液减少，从而降低鱼体活力[10]。本试验结果显示，NaCl对西杂鲟幼鱼的安全质量浓度为3 829.06 mg/L，是梭鲈鱼(980.02 mg/L)[18]的约3.9倍，是金鱼(704.20 mg/L)[19]的约5.4倍。这说明西杂鲟对盐度的耐受性较许多养殖鱼类更强。因此，氯化钠在生产过程中可放心使用，但应当适当控制用量和时间。

3.4 高锰酸钾的药效及使用

KMnO4在水产养殖中一般用于防治细菌性疾病和吸虫类的寄生虫[13,20]，在西杂鲟养殖过程中使用较多，常用于治疗烂尾病等。但当养殖水体呈现碱性或弱酸性时，KMnO4会产生MnO2，引起养殖鱼体的病理变化，进而影响养殖生产[21]。本试验结果显示，KMnO4对西杂鲟幼鱼的安全质量浓度为0.84 mg/L，远高于同类品种杂交鲟(0.1 mg/L)[6]，说明西杂鲟对KMnO4的抗逆性比杂交鲟强。另外，KMnO4对西杂鲟的安全质量浓度相对于花鳗鲡(0.74 mg/L)[10]、泥鳅(0.75 mg/L)[22]、鲢(0.42 mg/L)[23]等许多鱼类要高。但KMnO4属强氧化性药物，对于鱼体的抗氧化系统和肝脏组织会有一定的损伤。因此建议，在使用高锰酸钾后，应适当投喂添加抗氧化剂和保肝药物的饵料，以利于鲟鱼恢复。