PCR检验法和细菌培养法对阴道细菌检验效果的对比研究

（辽宁省健康产业集团铁煤总医院检验科，辽宁 调兵山 112700）

阴道炎是一种常见的妇科疾病，因为此病的出现与进展十分缓慢，大部分阴道炎患者早期没有显著表现，如果患者出现显著症状表现，通常已经引发腹部与盆腔疾病出现[1]。相关研究显示：如果患者阴道炎长时间不愈，会引发不孕。所以，早期诊断阴道炎成为现阶段研究的重点[2-3]。细菌培养法是临床对阴道炎诊断的常用方法，伴随研究的不断加深，发现细菌培养法的时间较长，阳性率不高，患者通常需要进行多次细菌培养才可以确诊。PCR检验法是一种新型的检测方法，其对阴道炎的诊断价值显著[4-5]。为了探究阴道细菌检验中应用PCR检验法与细菌培养法的检验效果对比，选取本院2017年5月至2018年8月进行阴道细菌检验的97例患者，全部患者分别接受PCR检验法与细菌培养法检验，并对不同检验方法对阴道细菌检验准确率进行对比，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 于2017年5月至2018年8月随机选取本院进行阴道细菌检验的97例患者，全部患者都为育龄期女性，入院时都存在一定的白带分泌增多与阴道瘙痒等症状，都满足阴道炎的诊断标准，所有患者都自愿参与此次研究；并将处在妊娠期患者、月经期患者、48 h内有过性生活患者以及近期应用过阴道局部用药患者等充分排除。97例患者最小年龄31岁，最大年龄46岁，平均年龄（39.25±8.37）岁；最短病程4个月，最长病程20个月，平均病程（12.26±8.54）个月；通过临床及检验确诊显示：棒状杆菌、加特纳菌、肠球菌分别有30例、32例、35例，所占比例分别为30.93%、32.99%、36.08%。

1.2 方法 ①采集阴道分泌物的方法：于阴道后穹隆处，用无菌棉签蘸取阴道分泌物，并把阴道分泌物放在无菌盐水内贮存，留置进行阴道细菌检验。②PCR检验法：选择1000 μL阴道分泌物和生理盐水混合液进行离心处理，离心时间15 min，每分钟离心12 000转，将上层清液充分弃掉，把剩余组织裂解液在60 ℃水中放置10 min，取出后再进行15 min的离心处理，每分钟12 000转，并把获得的上清液应用在DNA模板的制作中。检验人员需选择阴性作为参考，其中不加模板DNA，于DNA模板扩增过程中，需在其中添加引物或缓冲对等，把标本有效置入PCR仪并进行循环处理。③细菌培养法：选取阴道分泌物和生理盐水混合液在培养基内放置，并于二氧化碳孵箱内持续培养3 d。培养基内长成菌落后，选择灰色、光滑并且露滴状细菌进行细菌生化鉴定。

1.3 观察指标 观察与记录不同检验方法对阴道细菌检验阳性率与阴道细菌分布检验准确性。

1.4 统计学分析 选择统计软件SPSS21.0对数据进行分析，计数资料（如阴道细菌检验阳性率等）以百分率（%）表示，行χ2检验，P＜0.05表示组间比较差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检验方法对阴道细菌检验阳性率的对比 PCR检验组患者阴道细菌检验阳性率87.63%，与细菌培养组患者的75.26%相比较存在统计学方面的意义（P＜0.05）；PCR检验组患者阴道细菌检验阴性率12.37%，与细菌培养组患者的24.74%相比较存在统计学方面的意义（P＜0.05）。见表1。

表1 不同检验方法对阴道细菌检验阳性率的对比[n（%）]

2.2 不同检测方法对阴道细菌分布检验准确性的对比 PCR检验组患者对加特纳菌、棒状杆菌检验准确率分别为34.02%、28.87%，与细菌培养组患者的20.62%、16.49%相比较存在统计学方面的意义（P＜0.05）；PCR检验组患者对肠球菌检验准确率26.80%，与细菌培养组患者的27.84%相比较不存在统计学方面的意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同检测方法对阴道细菌分布检验准确性的对比[n（%）]

3 讨论

多数研究显示：白带检验结果反映机体健康状态，所以女性如果有白带分泌物增多表现，需马上到医院就诊，并对疾病充分重视，为妇科病的诊断与治疗提供有利条件[6-7]。最近几年，伴随女性工作压力、生活压力的增大，再加上生活节奏的转变与饮食结构的变化，女性阴道病的发病率越来越高，最常见的为阴道炎[8-9]。阴道炎是一种常见的女性疾病，和女性阴道中寄生菌群失衡有直接联系。通常情况下，女性阴道中的寄生菌群平衡，细菌分泌不同物质会使阴道中的环境维持稳定状态。如果阴道菌群失衡，维持菌群平衡的重要细菌会大量死亡，导致病菌快速增生，于繁殖期多数营养物质被消耗，导致阴道上皮细胞应有的代谢功能丧失，导致阴道内酸碱水平异常。阴道上皮细胞失去了屏障保护功能，会导致炎症出现，症状表现为外阴瘙痒等，对患者生活质量造成不利影响[10-11]。所以，探究一种能够及早判定患者有无感染的出现，确定致病菌种的检查方法十分重要。临床上细菌检验结果可为疾病诊断提供有利参考，对临床治疗也有重要作用，阴道检验精确度对阴道疾病的诊断有积极影响，所以，要求阴道检验准确性较高。阴道分泌物检查是对阴道炎诊断的辅助方法，可反映出阴道内菌群与炎性感染程度。细菌培养法与PCR检验法是对阴道细菌检查的常见方法。细菌培养法对阴道菌群检测的应用效果较好，但此种方法存在较大的不足，如 准确率低以及检验时间长等。PCR检验法是一种新型的检验方法，其属于荧光定量检测方法，其融合了DNA杂交特异性与RCP敏感性，具有多种优势，如精度准及准确率高等[12]。通过分析发现，PCR检验法操作简便，但对设备有较高的要求，可在检验中达到无菌操作标准，防止细菌感染的出现，进而避免检验结果出现异常。并且PCR检验法的检验时间比较短，可快速获得检验结果，防止患者反复进行检验，使其在阴道细菌检验中的花费时间和精力明显减少。多数报道表明：PCR检验法的操作简单、所用时间较短，且特异性与灵敏度都比较好，在阴道细菌检验中较为适用。与PCR检验法相比，细菌培养法的理论知识比较简单，但所用时间较长，极易在检验时产生细菌污染的情况，对检验结果的准确性造成影响[13]。

本研究结果显示：PCR检验组患者阴道细菌检验阳性率87.63%，高于细菌培养组的75.26%；PCR检验组患者对加特纳菌、棒状杆菌检验准确率分别为34.02%、28.87%，高于细菌培养组的20.62%、16.49%；PCR检验组患者对肠球菌检验准确率26.80%，与细菌培养组的27.84%相比较不存在统计学方面的意义。杨青青等[14]学者探究了细菌培养法与PCR检验法对阴道细菌检验的临床价值对比，其选取81例阴道炎患者分别进行细菌培养法与PCR检验法检验，结果显示：PCR检验法的检验阳性率77.78%高于细菌培养法的39.51%，此研究结果与本研究一致。

总之，PCR检验法具有操作简单、检验准确率高以及所用时间短等优势，其对阴道细菌检验的准确率优于细菌培养法。