山茶籽与葛根素对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用比较

方晓燕 李海 顾建忠 邱迎均 韦福相 陈建海 黎飚

(右江民族医学院组织胚胎学教研室,广西 百色 533000)

老年女性卵巢退化萎缩，体积变小，卵泡数量减少，分泌雌激素逐步减少。雌激素是维持女性骨代谢平衡的重要物质，表现在维持破骨细胞与成骨细胞功能的平衡，即破骨细胞破骨功能和成骨细胞成骨功能的相对平衡，成骨与骨质流失量相当。雌激素减少，破骨细胞的溶骨量大于成骨细胞的合成骨量时，骨质减少，骨质变得疏松，骨密度下降〔1～3〕。经实验室和临床实践证明雌激素防治绝经后骨质疏松(PMOP)也称为Ⅰ型女性骨质疏松具有明显效果，但雌激素疗法毒副作用日益明显〔4～6〕，人们把研究重点转移到无毒副作用的植物所含雌激素，葛根素和山茶籽内含较多雌激素样作用成分，有必要研究葛根素和山茶籽的抗骨质疏松作用，并比较它们作用。

1 材料和方法

1.1材料和仪器 选用32只5月龄雌性SPF级大鼠，葛根注射液(天台药厂100 mg/支，批号：0175053)，雌二醇 (100 μg/支，仙居制药厂,批号：0188072)，骨密度用XR-600双能X骨密仪检测。碱性磷酸酶用建成公司的试剂盒测定。

1.2动物饲养 大鼠分笼同条件饲养,按大鼠颗粒饲料标准,自动饮水机供水。控温(22±5)℃，控湿50%～78%，照射亮度控制在150～190 Lx。

1.3摘卵巢造模 大鼠腹腔麻醉(用10 g/L戊巴比妥钠按3.0 mg/kg给药)，无菌背部双侧入口，摘双侧卵巢，缝合再消毒。切下组织切片镜检确定为卵巢组织。术后用青霉素注射涂擦伤口3 d，预防感染。

1.4动物分组 大鼠随机分成4组，每组8只。假手术(Sham)组：手术过程、处理方法与摘卵巢造模组相同，但暴露卵巢后不摘除卵巢，只切除卵巢外侧的一点脂肪块。术后预防感染方法与摘卵巢造模组相同。山茶籽治疗(Ts)组：摘卵巢造模后，山茶籽醇提物灌胃，10 ml/kg,1次/d (5 g/g生药)。葛根素治疗(Pr)组：摘卵巢造模后，皮下注射葛根素，50 mg/kg，1次/d。Sham组、摘卵巢造模(OVX)组灌胃生理盐水。

1.5实验观察指标和方法 (1)股骨头骨组织显微镜下组织结构。(2)血碱性磷酸酶。(3)股骨骨密度。各组4 w、12 w麻醉采血后处死取其两侧股骨。血液经离心得血清，-18℃冻存待测碱性磷酸酶。碱性磷酸酶以比色测定，操作按说明。左股骨固定、脱水、钙再包埋切片，染色后观察形态结构。右股骨,剥离干净周围组织后置干燥箱,待干燥后，用骨密度XR-600测量仪测量，1.5 cm宽度，4.3 cm长度,速度4.0 s/m 。

1.6统计学方法 采用SPSS20.0软件进行t检验。

2 结 果

2.1各组股骨切片镜下组织结构 Sham组周围骨皮质较厚且均匀，骨陷窝较充实，细胞饱满整齐,小粱粗细均匀,密集；OVX组骨皮质较薄，小梁间隙明显增宽、小梁细而断裂，深处髓腔增大；Pr和Ts组骨皮质明显增厚，小梁均匀密集，变粗，与OVX组比较骨质疏松明显改善。见图1。

图1 各组12 w股骨切片光镜结构组织(HE，×200)

2.2各组双X线骨密度 OVX组的骨密度明显低于同时期Sham组、Ts组、Pr组(P<0.01)；Sham组、Pr组和Ts组骨密度相比无显著差异(P>0.05)。见表1。

2.3各组血碱性磷酸酶比较 OVX组4 w、12 w血碱性磷酸酶均显著高于Sham组、Ts组和 Pr组(P<0.01)，Pr组与Sham组及Ts组碱性磷酸酶相比无明显差异(P>0.05)。见表2。

表2 各组血碱性磷酸酶含量比较

3 讨 论

本研究结果说明绝经后骨质疏松的大鼠造模是成功的。摘除卵巢导致雌激素急剧下降，引起成果细胞与破骨功能平衡失调，破骨大于成骨，骨量减少，骨质疏松出现。而碱性磷酸酶是骨代谢的一个重要指标之一，骨质流失增多，碱性磷酸酶升高〔7,8〕。山茶籽、葛根素治疗后，骨质疏松得到明显好转，骨密度也与对照组没有明显差异。山茶籽、葛根素都含有雌激素样成分，也叫植物性雌激素，进入体内，在雌激素水平偏低时，发挥雌激素样作用〔9，10〕，当雌激素水平较高时，不显示其作用，这叫双向调节。山茶籽、葛根素的双向调节已被动物实验所验证〔11～13〕。