‘琯溪蜜柚’中乙螨唑、啶虫脒的残留测定及套袋对残留的影响

胡彧娴

摘要：为评价乙螨唑、啶虫脒在‘琯溪蜜柚’上使用的安全性以及套袋对残留量的影响，对其残留消解动态进行研究。在蜜柚上施药进行田间试验，2种施药剂量分套袋和无套袋处理，QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱进行残留检测。结果表明，乙螨唑和啶虫脒在蜜柚中的残留消解动态均符合一级动力学方程，乙螨唑套袋处理的半衰期（T1/2）为5.30～5.47天，无套袋处理的T1/2为4.34～4.54天；啶虫脒套袋处理的T1/2为3.42～3.80天，无套袋处理的T1/2为3.04～3.70天。乙螨唑套袋处理的半衰期略长于无套袋处理的半衰期，而套袋对啶虫脒的半衰期影响不大。施药后65天在蜜柚中没有检出乙螨唑和啶虫脒残留。

关键词：乙螨唑；啶虫脒；琯溪蜜柚；残留；套袋

中图分类号：S481.8文献标志码：A论文编号：cjas2020-0162

基金项目：2018年漳州市自然科学基金项目“琯溪蜜柚中多残留QuEChERS HPLC-MS/MS检测方法的建立及套袋控残技术研究”（ZZ2018J30）。

Determination of Etoxazole and Acetamiprid Residue in Citrus maxima‘Guanxi miyou’and Effect of Bagging on Residues

Hu Yuxian

（Zhangzhou Agricultural Test and Inspection Centre，Zhangzhou363000，Fujian，China）

Abstract： To evaluate the safety of etoxazole and acetamiprid in Citrus maxima‘Guanxi miyou’and the effect of bagging on residues， a study on the residual degradation dynamics of etoxazole and acetamiprid was carried out. A field experiment was conducted on Citrus maxima‘Guanxi miyou’， two dosages were sprayed in bagging and non-bagging treatments， and then the residue was determined by QuEChERS combining with HPLC- MS/MS. The results showed that the residual degradation dynamics of etoxazole and acetamiprid followed the first-order kinetic equation， the half-life （T1/2） of etoxazole was 5.30-5.47 d in the bagging treatment， and 4.34-4.54 d in the non-bagging. T1/2 of acetamiprid was 3.42-3.80 d in the bagging treatment， and 3.04-3.70 d in the non-bagging. T1/2 of etoxazole was a little longer in the bagging treatment， but the T1/2 of acetamiprid had no obvious difference between the bagging and non- bagging treatment. The residues of etoxazole and acetamiprid in Citrus maxima‘Guanxi miyou’were not detected on the 65thday after spraying.

Keywords： Etoxazole； Acetamiprid； Citrus maxima‘Guanxi miyou’； Residue； Bagging

0引言

乙螨唑屬于噁唑类杀螨剂[1]，广泛用于柑桔、棉花、花卉、蔬菜等作物上的叶螨防治[2]，具有杀卵、杀幼虫活性[3]。啶虫脒是一种广谱的速效性杀虫剂，具有触杀、胃毒和较强的渗透作用[4]，在国内广泛用于防治蔬菜、水果等作物的蚜虫[5]，对柑桔蚜虫防治效果尤其突出[6]。‘琯溪蜜柚’是国内柚类主栽良种之一[7]，原产于福建省平和县[8]，是当地的主要经济作物。由于‘琯溪蜜柚’产生的经济效益较高，近年来种植规模不断扩大，现在平和已成为国内最大的柚类生产基地县和出口基地县[8]。然而，随着单一化种植及农药、化肥的不合理使用，蜜柚上的虫害发生日趋严重，已影响到蜜柚的品质和产量。乙螨唑和啶虫脒作为防治蜜柚虫害的主要农药品种之一，在生产上被广泛使用。

国内对乙螨唑的研究主要集中在药效试验与复配研发方面[9-11]，对其检测方法和残留代谢研究报道并不多，仅在枸杞[12]、苹果[13]、柑桔[14]上有相关报道。对啶虫脒的检测方法和残留动态方面已有诸多报道，主要集中在毛叶枣[15]、辣椒[16]、草莓[17]、黄瓜[18]、苹果[19]、开心果[20]等作物上。但乙螨唑和啶虫脒在蜜柚中的残留及消解规律均没有相关研究数据。

目前，果实套袋已成为生产绿色果品的主要栽培技术之一，其具有降低农药残留[21]、减少果实病虫为害及提高果实品质[7，22]等优点。笔者以‘琯溪蜜柚’为试材，建立QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱快速检测方法，研究乙螨唑和啶虫脒在蜜柚中的残留动态，并研究套袋对其残留量的影响，旨在评价农药使用的安全性，为‘琯溪蜜柚’在种植过程中的科学用药及其绿色化发展提供理论依据。

1材料与方法

1.1试验材料与仪器设备

供试‘琯溪蜜柚’为7年生。供试农药为20%乙螨唑悬浮剂（100 mL/瓶，河北威远生物化工有限公司）、 20%啶虫脒可溶粉剂（25 g/袋，江苏龙灯化学有限公司）。

乙螨唑、啶虫脒标准品（100 mg/L，农业部环境保护科研监测所）；无水MgSO4和NaCl均为分析纯；N-丙基乙二胺（PSA，德国CNW公司）；乙腈、甲酸、甲醇均为色谱纯。

T-18 basic ULTRA TURRAX高速匀浆机（德国IKA公司）；3-18K高速离心机（德国Sigma公司）；DIONEX Ultimate 3000- Thermo TSQ Quantum Ultra EMR高效液相色谱-串联质谱联用仪（美国ThermoFisher公司）。

1.2田间试验设计

参照《农药残留试验准则》[23]，于漳州市平和县小溪镇厝丘村蜜柚园中实施田间试验。试验设4个处理，2种施药剂量，并分套袋和无套袋2种处理。每个处理6株蜜柚，设3个重复；以清水喷雾的无套袋处理为空白对照（表1）。

于2018年7月8日（此时蜜柚已谢花约90天）按常规方法对整株蜜柚进行均匀施药，施药后2天内无降雨，套袋处理待蜜柚表面的药液完全干燥才能进行。采用1次施药多次采样的方法，分别于施药后0（约 2 h，此时果实表面药液已干）、1、3、7、15、30、65天采集蜜柚样品测定残留量。

1.3分析方法

1.3.1提取与净化参考蔡恩兴[24]建立的QuEChERS方法。称取10 g（精确至0.01 g）搅碎成匀浆的蜜柚全果样品于50 mL离心管中，加入20.0 mL乙腈、1.0 g NaCl和4.0 g无水MgSO4，在匀浆机中高速匀浆提取2 min，4500 r/min离心5 min，吸取2.0 mL上清液加到内含0.10 g PSA和0.30 g无水MgSO4的离心管中，涡旋1 min，过0.22μm有机滤膜，待高效液相色谱-串联质谱测定。

1.3.2检测条件

（1）液相色谱条件。色谱柱为Atlantis T3 Column（100 mm×2.1 mm，3μm）；流动相为0.1%甲酸（A相）和甲醇（B相）；流速为0.25 mL/min；进样体积为2.0μL；乙螨唑保留时间为7.31 min；啶虫脒保留时间为5.28 min；流动相及梯度洗脱程序见表2。

（2）质谱条件。质谱扫描模式为电喷雾正离子扫描（ESI+）；离子传输管温度为300℃；喷雾温度为270℃；喷雾电压为4000 V；鞘气（N2）流速为3.62 L/min，辅助气（N2）流速为5.38 L/min，放电电流为4.0μA，SRM检测模式；乙螨唑和啶虫脒质谱检测参数见表3。

2结果与分析

2.1质谱条件的优化

选择ESI+离子源，将1 mg/L的农药标样经注射泵注入质谱，调节合适的注射泵流速及离子源气流、电压、温度等使待测物信号大于106响应，且响应达到稳定状态。通过全扫描确定母离子，选择反应监测（SRM模式）进行二级质谱自动优化，分析质谱图及碰撞能量，最终确定单个农药的质谱检测参数。

2.2线性范围和灵敏度

将蜜柚空白样品按上述QuEChERS方法进行处理，得到空白基质溶液，配制基质匹配系列标准溶液并进样分析，以质量浓度为横坐标、对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。2种农药在0.5～500μg/L浓度范围内线性关系良好，乙螨唑的线性回归方程如式（1），啶虫脒的线性回归方程如式（2）。

以3倍和10倍信噪比（S/N）计算检出限和定量限，乙螨唑的检出限为0.05μg/kg、定量限为0.17μg/kg，啶虫脒的检出限为0.06μg/kg、定量限为0.20μg/kg。

2.3添加回收试验

在蜜柚空白样品中分别加入2、20和200μg/kg 3个水平的混合标准工作溶液进行添加回收试验，每个水平重复5次。按1.3.1和1.3.2方法进行前处理和上机测定，乙螨唑的回收率为86.6%～97.6%、相对标准偏差（RSD）为2.6%～12.0%，啶虫脒的回收率为80.2%～ 109.4%、RSD为7.2%～9.6%。表明该方法适用于蜜柚中乙螨唑和啶虫脒的残留测定。

2.4残留动态及消解规律

2.4.1残留量与消解率乙螨唑和啶虫脒在蜜柚中的残留消解动态试验结果（表4～5）显示，不同施药剂量处理的原始沉积量存在一定差异。按推荐剂量（5000倍液）处理，乙螨唑和啶虫脒在蜜柚上的原始沉积量分别为0.115～0.121、0.132～0.143 mg/kg，而加倍剂量（2500倍液）处理分别为0.213～0.232、0.241～0.255 mg/kg，说明2种农药的原始沉積量与其施药剂量有关。

在施药剂量和采样时间相同的条件下，2种农药套袋处理的消解率均略低于无套袋处理，但在施药后30天消解率均大于98%，最终趋于一致。

2.4.2残留消解规律及最终残留对2种农药进行回归分析（表6～7），其残留消解动态均符合一级动力学方程。乙螨唑在蜜柚中4种处理的相关系数（r）在0.9925～0.9960之间，消解系数（k）在0.1267～0.1596之间，套袋处理的半衰期（T1/2）为5.30～5.47天，消解99%所需要的时间（T0.99）为35.1～36.3天；无套袋处理的T1/2为4.34～4.54天，T0.99为28.8～30.1天，套袋处理的半衰期略长于无套袋的半衰期。

啶虫脒4种处理的相关系数（r）在0.9941～0.9999之间，消解系数（k）在0.1824～0.2278之间，套袋处理的T1/2为3.42～3.80天，T0.99所需要的时间为22.7～25.2天；无套袋处理的T1/2为3.04～3.70天，T0.99为20.2～24.5天，套袋对啶虫脒的半衰期影响不大。

在蜜柚成熟收获时（施药后65天）进行采样，测定其最终残留量，2种农药的4种处理均未检出其残留。

3讨论

本试验建立了QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱快速检测方法，对蜜柚中乙螨唑和啶虫脒的残留量进行测定。乙螨唑的检出限为0.05μg/kg，定量限为0.17μg/kg，回收率为86.6%～97.6%；啶虫脒的检出限为0.06μg/kg，定量限为0.20μg/kg，回收率为80.2%～ 109.4%。该分析方法操作简单，灵敏度较高，符合农药残留分析的要求。

2种农药在蜜柚中的残留消解动态均符合一级动力学方程，乙螨唑套袋处理的T1/2为5.30～5.47天，无套袋处理的T1/2为4.34～4.54天，套袋处理的半衰期略长于无套袋的半衰期，原因可能是套袋后乙螨唑受光解、雨淋等外界环境因素影响较小，因而消解较慢。而啶虫脒套袋处理的T1/2为3.42～3.80天，无套袋处理的T1/2为3.04～3.70天，套袋对啶虫脒的半衰期影響不大，这可能与啶虫脒具有内吸性有关，在一定程度上受外界因素干扰较少，但有待于进一步研究确认。

目前，在GB 2763—2019[25]中最新规定乙螨唑、啶虫脒在蜜柚上的最大残留限量（MRL）分别为0.1、2 mg/kg，根据残留消解动力学方程测算（表6），乙螨唑套袋处理的安全间隔期分别为0.9、6.2天，无套袋处理的安全间隔期分别为0.9、5.7天，不同的施药剂量对其安全间隔期有较大的影响；而啶虫脒在蜜柚上的MRL值较大，按常规方法进行喷施则无安全间隔期问题。本研究先充分施药再进行套袋，采用1次施药多次采样检测的方法，并在果实成熟后测定其最终残留量，2种农药的4种处理均未检出其残留，表明2种农药在蜜柚上使用具有较好的安全性。对蜜柚进行套袋可以减少农药使用次数，节省生产成本，促进蜜柚产业绿色发展。

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