软颗粒饲料对拟穴青蟹成活、生长和肌肉氨基酸组分的影响

黄伟卿 ，林小金，钟传明，陈云月，张艺，王永贵，臧蔓，施蕾，周振平

（1.宁德市鼎诚水产有限公司，福建 宁德 352100；2.宁德师范学院生命科学学院，福建 宁德 352100；3.福建省闽东水产研究所，福建宁德 352100；4.福建省水产技术推广总站，福建 福州 350000；5.宁德市水产技术推广站，福建 宁德 352100）

青蟹肉味鲜美，营养价值高,适应性强、个体大、生长速度快，已成为许多国家人工养殖的主要海洋蟹类[1]。随着人工繁育、苗种培育和养成技术[2-4]及养殖设施设备的不断改进优化[5-7]，青蟹养殖规模不断扩大，产量不断提高。据统计，2018 年全国青蟹面积23 129 hm2，产量达15.8 万t，福建省青蟹养殖面积4 159 hm2、位居全国第三，产量36 320 t、位居全国第二。随着青蟹产业蓬勃的发展，艾春香等[8-11]、莫兆莉等[12]、苏以鹏[13]和董兰芳等[14]已研出幼蟹、成蟹、亲蟹系列配合饲料，为青蟹人工配合饲料的研发提供了理论基础。

软颗粒饲料采用冰鲜杂鱼与具有特定营养成分或功能的粉料制成，综合了鲜杂鱼等生物饵料和膨化饲料等硬饲料的长处，适口性好,易于吞食消化，还可根据营养需求进行调整，提高饲料效率，减少残饵对海区水质的污染和各种疾病的发生，目前已在鱼类[15-17]中广泛应用。何尔荣等[18]在三疣梭子蟹Portunus trituberculatus 中也开展了相关研究，认为软颗粒饲料有助于提高养殖成活率和生长速度，降低成本；黄伟卿等[19]在培育锯缘青蟹Scylla serrata“红膏蟹”时开展过探索，发现能有效提高成活率和生长速度（P＜0.05），可显著加快了育成膏蟹所需时间（P＜0.05），且投喂后肌肉中蛋白质含量提高高，氨基酸种类齐全而均衡。

拟穴青蟹Scylla paramamosain 是我国青蟹属中最为常见、产量最高的种。本研究在宁德市鼎诚水产有限公司养殖基地室内循环水工厂拟穴青蟹育肥养殖中应用软颗粒饲料，通过分析拟穴青蟹育养殖过程中的成活率、生长速度和肌肉营养成分，以期为开展陆基集约化养殖拟穴青蟹技术提供参考。

1 材料与方法

1.1 软颗粒饲料配方及制备

软颗粒饲料原料由37%鳀、37%鱼粉、10%水、7%复合多维、5%脱壳素和4%石花粉及余下的盐、钙、磷等组成。配置时，先将鳀搅成鱼糜后按比例加入其他原材料，搅拌均匀后，挤压成软颗粒饲料，再经100℃水蒸汽蒸煮15 min，放置-20 ℃冰箱中冷冻保存、备用。制成后的软颗粒饲料的营养成分由福建省农业科学院农业质量标准与检测研究所检测，成分详见表1。

表1 实验用软颗粒饲料的营养成分（湿物质基础）Tab.1 Approximate nutritional composition of soft pelleted diet used in the experiment（wet material basis）

1.2 拟穴青蟹来源及试验设计

从三都湾海域采购，挑选体表完整、活力强的海捕野生拟穴青蟹180 只。试验组与对照组各90只，试验组平均体质量（34.9±15.50）g、壳长（5.32±0.94）cm，对照组平均体质量（38.65±16.31）g、壳长（6.01±1.24）cm。

试验在宁德市鼎诚水产有限公司养殖基地青蟹循环水养殖车间进行；采用“蟹公寓”进行一蟹一盒养殖，每组设3 个平行，每组30 只。试验组投喂软颗粒饲料，对照组投喂缢蛏缢蛏Sinonovacula constricta，日投喂量为青蟹体质量的2%～5%，具体投喂量视青蟹摄食调整。

1.3 养殖管理

水温控制在24～28 ℃之间，日变化量不超过2℃，氨氮控制在0.2 mg/L 以下，溶解氧在4 mg/L 以上，盐度在18～23 之间，日变化量不超过5，pH 维持在7.9～8.2 范围内。

每天清除残饵、粪便和死亡拟穴青蟹，日换水量为总水体的10%左右。

1.4 数据采集和分析

养殖70 d 后，统计每组拟穴青蟹成活数量，将蟹体表的水分擦干，用电子天平（上海上天精密仪器有限公司生产，型号YP6102，精确度0.1 g）逐一称重，用直尺（精确度0.1 cm）测量甲壳长。

数量性状测量结束后，每组解剖拟穴青蟹肌肉200 g，委托福建省农业科学院农业质量标准与检测研究所采用国标GB/T 5009.5-2010、GB/T 5009.6-2003、GB/T 5009.3-2010、GB/T 5009.4-2003 和GB/T 5009.124-2003，检测粗蛋白、脂肪、水分、灰分和氨基酸含量。

各数量性状的计算公式如下：

SR=N/n×100%。

式中，SR 为成活率，%；N 为试验终拟穴青蟹存活数；n 为试验初拟穴青蟹数量。

SGR=[（LnWf-LnWi）/t]×100%。

式中：SGR 为特定增长率，%/d；Wf为试验终拟穴青蟹的体质量（g）和甲壳长（cm）；Wi为试验初拟穴青蟹的体质量（g）和甲壳长（cm）；t 为试验天数（d）。

根据氨基酸的分类，统计相关氨基酸组份的含量。

根据联合国粮农组织/ 世界卫生组织（FAO/WHO）建议的氨基酸评分标准模式[20]和中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所提出的全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式[21]：以氨基酸评分（AAS）、化学评分（CS）和必需氨基酸指数（EAAI）来评定拟穴青蟹肌肉蛋白质的氨基酸营养价值，其计算公式如下：

式（3）中：n 为比较必需氨基酸数；t 为待测样品蛋白质必需氨基酸的含量；s 为全鸡蛋蛋白质的必需氨基酸含量；Lys 为赖氨酸，Val 为缬氨酸。

1.5 数据处理

试验数据用（平均值±标准差）表示，采用SPSS 17.0 软件处理，用独立样本T 检验对结果进行显著性水平检验。

2 结果与分析

2.1 软颗粒饲料对拟穴青蟹成活率和生长的影响

投喂软颗粒饲料的试验组中，拟穴青蟹成活率为（82.4±6.72）%，极显著高于对照组（73.9±2.57）%（P＜0.01）；甲壳长和体质量的特定增长率显著大于对照组（P＜0.05）；脱壳间隔时间为（28.5±6.36）d，显著低于对照组（33.0±7.07）d（P＜0.05）（表2）。

2.2 软颗粒饲料对拟穴青蟹肌肉氨基酸组分的影响

拟穴青蟹摄食软颗粒饲料时，肌肉中氨基酸总量（13.06±5.23）%，极显著高于对照组（9.95±3.45）%（P＜0.01）；必需氨基酸（4.33±1.64）%和呈味氨基酸（5.35±2.02）%的含量显著高于对照组（3.36±1.06）%和（3.99±1.25）%（P＜0.05）（表3）。

2.3 软颗粒饲料对拟穴青蟹肌肉营养评价的影响

投喂软颗粒饲料的拟穴青蟹肌肉中蛋白质和脂肪显著高于对照组（P＜0.05），而水分和灰分则低于对照组（表4）。

拟穴青蟹肌肉必需氨基酸含量，以及AAS、CS和EAAI 指数见表4。根据AAS 评价模式，投喂软颗粒饲料与对照组的拟穴青蟹肌肉的必需氨基酸中，不存在限制性氨基酸；根据CS 评价模式，投喂软颗粒饲料与投喂对照饵料的拟穴青蟹肌肉的必需氨基酸中，亮氨酸、甲硫氨酸＋半胱氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸＋酪氨酸为限制性氨基酸。对比发现，投喂软颗粒饲料的拟穴青蟹肌肉必需氨基酸指数（EAAI）为70.44，小于对照组（表5）。

表2 软颗粒饲料对拟穴青蟹养殖成活率和特定增长率的影响Tab.2 Effect of soft pellet feed on survival rate and specific growth rate of crab culture

表3 软颗粒饲料对拟穴青蟹肌肉氨基酸含量的影响Tab.3 Effect of soft pelleted diet on amino acid content in muscle of mud crab

3 讨论

3.1 用软颗粒饲料养殖拟穴青蟹采的可行性

为了解决拟穴青蟹脱壳中互相残杀导致低成活率等问题，目前拟穴青蟹养殖正逐步形成“一蟹一盒”的陆基工厂化立体养殖模式[7]。该养殖模式的兴起，除了考虑养殖盒的设计参数，还应解决养殖中投喂鲜杂鱼、缢蛏等鱼贝类带来残饵清除不便利，污染养殖水体及影响拟穴青蟹摄食效果等问题。王兴春等[15]、林建斌[22]和林旋[23]的研究结果证实，投喂软颗粒饲料的残饵较鲜杂鱼少，排放的总氮、总磷和化学需氧量（COD）等对环境污染物也显著小于投喂鲜杂鱼，起到了保护水产养殖环境的作用。黄明坚[16]、全汉锋等[24]和林建斌等[25]用软颗粒饲料养殖军曹鱼Rachycentron canadum、大黄鱼Pseudosciaena crocea 和点带石斑鱼Epinephelus coioides，提高了鱼类的生长和成活率。也有研究证实，软颗粒饲料在应对病虫害的感染时，能取到缓解的作用[26]。用软颗粒饲料培育三疣梭子蟹[18]和锯缘青蟹“红膏蟹”[19]，验证了软颗粒饲料同样适用于甲壳类养殖中，具有促进生长和提高成活率和经济效益的作用。本研究中，用软颗粒饲料在室内循环水中育肥拟穴青蟹，成活率和生长速度均高于投喂生物饵料；肌肉营养评价也比对照组佳。该结果为工厂化拟穴青蟹养殖投喂软颗粒饲料的可行性提供了实践依据。

表4 软颗粒饲料对拟穴青蟹肌肉基础成分的影响Tab.4 Effect of soft pelleted diet on proximate components in muscle of mud crab

表5 软颗粒饲料对拟穴青蟹肌肉AAS、CS 和EAAI 评价的影响Tab.5 Evaluation of AAS,CS and EAAI in muscle of mud crab fed soft pelleted diet

3.2 软颗粒饲料对拟穴青蟹存活和生长的影响分析

拟穴青蟹养殖过程中，饵料不新鲜或用量不当，容易造成水质恶化，为相应的病原菌的滋生提供环境，引起包括弧菌病、丝状细菌病、甲壳溃疡病和霉菌病等细菌和霉菌性疾病的发生，造成拟穴青蟹的大面积死亡[27,28]。本试验投喂软颗粒饲料的拟穴青蟹的成活率为（82.4±6.72）%，极显著高于对照组的（73.9±2.57）%（P＜0.01），主要是软颗粒饲料制备工艺中，增加了100℃水蒸汽蒸熟，一定程度上抑制了病原菌的携带；软颗粒饲料的残留物粒径小，容易随粪便一同被排出，对水环境的污染小。

蜕壳不遂病是拟穴青蟹养成期中危害最严重的病害之一，在养殖后期严重影响养殖的成活率和生长速度。该病的原因至今尚未完全弄清楚，但其中缺乏钙质、甲壳素、蜕壳素等拟穴青蟹蜕壳所必需的物质是导致久不蜕壳、蜕不了壳的主要原因之一[29]。本次试验的软颗粒饲料中钙质达3.16%，可有效加快拟穴青蟹脱壳周期，促进拟穴青蟹的生长发育，提高了拟穴青蟹的成活率。

3.3 软颗粒饲料对拟穴青蟹肌肉蛋白质和氨基酸组分的影响

有研究表明，配合饲料中蛋白质含量为38.0%～45.9%能满足成蟹的蛋白质需求[8,9]。本次制备的软颗粒饲料（湿物质基础）中蛋白质的含量为26.6%比较低，这也导致投喂后拟穴青蟹肌肉中蛋白质的含量为（14.05±4.31）%，低于黄伟卿等[19]（19.9%～20.2%）、王雪锋等[30]的15.57%～17.42%和檀东飞等[31]的结果（15.33%）。但投喂后，仍极显著高于投喂生物饵料的拟穴青蟹肌肉蛋白质含量（11.11±3.10）%（P＜0.05）。这一现象与黄伟卿等[19]研究发现投喂软颗粒饲料可以提高拟穴青蟹肌肉中粗蛋白质的含量一致。

食物蛋白质的营养价值高低主要取决于其所含必需氨基酸的种类、数量和组成比例；呈味氨基酸的高低，也直接决定了食物的鲜美程度和被消费者的接受程度[32]。本研究发现，投喂软颗粒饲料组肌肉EAA 的含量为（4.33±1.64）%，显著高于对照组（P＜0.05），必需氨基酸的种类除Met 外均显著高于对照组（P＜0.05），且肌肉呈味氨基酸的含量为（5.35±2.02）%，显著高于对照组（P＜0.05）。认为，产生这一结果的主要原因是软颗粒饲料适口性好，饲料中的营养物质被拟穴青蟹所吸收、利用和转化的效果较好。