复方香芍口服液治疗动物实验性胃溃疡的药效和安全性研究

韩宪忠 沈正泽（通讯作者） 王柏桉 景良红 丁家昱

（1 重庆市人民医院＜中国科学院大学重庆医院＞药学部 重庆 400014）

（2 重庆医科大学附属永川医院药学部 重庆 402160）

（3 重庆涪陵中心医院药剂科 重庆 401331）

胃溃疡是指发生在胃角、胃窦、贲门和裂孔疝等部位的一种常见的消化性溃疡。以上腹部疼痛为主要症状，也可出现在左上腹部或胸骨、剑突后疼痛，严重者可出现胃出血、穿孔等并发症。中医药改善患者整体状态、促进胃溃疡愈合，以健脾益胃、理气止痛为根本。目前市场上治疗腹痛的中成药较多，但同时具有健脾益胃、止痛、理气的药物不多，如现有的中药制剂元胡止痛片止痛效果虽好，但理气活血止痛之功似嫌不足。复方香芍口服液处方由木香、白芍、厚朴、吴茱萸、甘草组成。本文对复方香芍口服液进行了初步的药效学、安全性的研究[1-3]，结果表明本制剂具有良好地促进动物实验胃溃疡的作用，且长期动物实验主要脏器未出现明显病理改变。

1.实验方法与材料

1.1 复方香芍口服液的制备

白芍、甘草切成片，与吴茱萸加12 倍量水煎煮1.5 小时，滤过，药渣加10 倍量水煎煮1 小时，滤过，合并滤液，备用；厚朴粉碎成粗粉，木香切成片，加10 倍量水蒸馏6 小时，收集挥发油，蒸馏后的水煎液滤过，滤液与以上提取液混合，滤过，滤液减压浓缩，浓缩液，备用。浓缩液加入吐温-80 搅拌均匀，加入已溶解羟苯甲酸乙酯的乙醇溶液混合均匀，然后加入亚硫酸氢钠充分搅拌均匀溶解后，再加入已溶解挥发油的乙醇溶液，加纯化水到1000ml，调pH 值至6 ～7，分装，即得。

1.2 实验动物

雄性Sprague-Dawley 大鼠，180 ～220 克，购自重庆医科大学实验动物中心。动物成对饲养在透明的饲养笼里（47 厘米×32 厘米×21 厘米），笼底铺有玉米芯制成的垫料，动物可自由饮水和进食。饲养室每天上午8 点开始灯光照明，晚上8 点自动熄灯，保持12 小时昼夜更替。每天实验从早上9 点开始进行。

1.3 实验试剂

冰醋酸，分析纯，临用前配成10%使用。法莫替丁来源与本院药房。复方香芍口服液（批号：181223），由重庆市人民医院制剂室提供。按“2.1 复方香芍口服液的制备及质量标准研究”方法制备的制剂为临床剂量组、低剂量组为临床剂量组1/2 的剂量，用生理盐水稀释。

1.4 复方香芍口服液对大鼠实验性胃溃疡的治疗作用

五十只大鼠随机分为5 组，即空白对照组、生理盐水阴性组、复方香芍口服液低剂量组、复方香芍口服液临床用量组、法莫替丁组，每组10 只。动物术前24 小时起禁食不禁水，手术当天用异氟烷麻醉动物，无菌条件下在剑突下腹中线剖开腹腔，暴露胃，在胃前壁近幽门外用微量注射器由浆膜面注入胃黏膜下层处注入30 微升20%的醋酸（空白对照组注射双蒸水），分层缝合伤口。术后第2 天开始给药，空白对照组和生理盐水阴性组灌胃生理盐水（3ml/kg），复方香芍口服液低剂量组、复方香芍口服液临床用量组分别灌胃复方香芍口服液1/2 剂量和原液，法莫替丁组灌胃1mg/kg。术后14 天麻醉处死动物，取胃，用游标卡尺测量出溃疡的最长径和最宽径，相乘算出溃疡面积，并取溃疡或相应位置胃黏膜切片送病理检查。

1.5 复方香芍口服液重复给药的毒性作用

30 只大鼠随机分为生理盐水组、临床剂量组、高剂量组，动物按“2.2 实验动物”所描述方式饲养，每天灌胃1 次，灌胃量为3mL/kg，生理盐水组灌胃生理盐水，临床剂量组灌临床用制剂原浓度，高剂量组灌胃临床用制剂生药量5 倍高浓度制剂，连续灌胃30d。末次灌胃24h 后，二氧化碳处死动物，取动物大脑、小脑、胃、心、肝、肺器官组织，送病理检查。

1.6 统计学分析

所有统计分析采用SPSS22 统计分析完成。计量资料以均数±标准差表示，各组之间的差异采用完全随机方差分析，各组之差的差异采用Bonferroni 事后检验进行分析，P ＜0.05 作用有统计学差异的标准。

2.结果

2.1 复方香芍口服液的制备及质量控制

根据提取、制剂工艺研究制定的制备工艺，制得复方香芍口服液（批号：181223）1 批。其质控指标芍药苷含量为7.31mg/L。

2.2 复方香芍口服液对大鼠实验性胃溃疡的治疗作用

完全随机方差分析表明各组间具有显著差异（F（4，45）=37.138，P ＜0.001，n=10），Bonferroni 事后检验表明生理盐水组的胃溃疡面积较空白组显著增加（P ＜0.001），复方香芍口服液临床用量组和法莫替丁组能显著缩小胃溃疡面积（P ＜0.001），几乎接近空白组动物（见表1）。病理图片显示，醋酸可以致典型胃溃疡结构，表现为黏膜表面见炎性渗出及坏死碎屑，其下见纤维素样坏死及肉芽组织形成，纤维化取代肌层达浆膜层，胃壁全层见大量急慢性炎细胞浸润（图1B）。复方香芍口服液低剂量组动物表现类似的病理结构（图1C），而复方香芍口服液临床用量组动物及法莫替丁组动物胃黏膜结构基本正常，黏膜层、肌层及浆膜层排列正常，未见明显糜烂及溃疡（图1D 和E）。本实验结果显示，高剂量复方香芍口服液组对溃疡的修复作用明显，低剂量组对溃疡无修复作用。

表1 复方香芍口服液显著减少胃溃疡面积

2.3 复方香芍口服液重复给药的毒性作用

动物在反复给药过程中无死亡。病理切片显示，生理盐水组及临床剂量组动物大脑、小脑、胃、心、肝、肺器官组织均未见异常结构；高剂量组动物有1 只动物肝脏有水肿变性表现，其余动物及脏器未见异常病理结构。表明复方香芍口服液临床使用剂量长期使用安全，5 倍生药量的高剂量长期的反复给药有可能导致肝脏水肿变性（图2）。

3.讨论

本文研究初步发现，复方香芍口服液对于动物实验性胃溃疡具有明显的治疗作用，临床使用剂量长期使用安全，超大剂量长期使用有可能会导致肝脏水肿变性。

我们拟研制的复方香芍口服液经临床验证表明，该研究组方合理，肝胃并治，气血同调。对胃痛、腹痛、胁痛都有较好的止痛作用，并能消除胀满、增进食欲，且无明显副作用。本制剂处方组成为木香、白芍、厚朴、吴茱萸、甘草。木香始载于《神农本草经》，列为上品，为菊科植物木香的干燥根。具有行气止痛、温中和胃、利尿通淋等功效。其主要有效成分为挥发油、木香内酯、生物碱等，临床主要用于胃肠气胀、消化性溃疡，临床上常与吴茱萸合用，治疗消化道溃疡及胃肠胀气 。白芍始载于《神农本草经》，列为中品，为毛茛科植物芍药的根。具有解痉、肌松、抗菌、保护消化道溃疡等作用[4]，其主要有效成分为芍药苷，用于头痛眩晕，胁痛，腹痛，四肢挛痛，血虚萎黄，月经不调，自汗，盗汗等，临床上常与甘草合用，用于治疗面肌抽搐、偏头痛、止痛、解痉、消化性溃疡等[5]。如白芍甘草汤，加味芍药甘草汤。甘草始载于《神农本草经》，列为上品，为豆科植物甘草的干燥根或根茎。具有清热解毒，润肺止咳，补脾益气，缓急止痛，调和诸药之功效。其主要有效成分为甘草酸，甘草次酸，甘草甜素等，用于脾胃虚弱，倦怠乏力，脘腹、四肢挛急疼痛等。临床常与白芍合用，用于消化道溃疡和胃肠道解痉等，如白芍甘草合剂。厚朴始载于《神农本草经》，列为中品，为本兰科植物厚朴或凹叶厚朴的干燥皮。具有燥热散满、消食散痞，脘腹止痛之功效。其主要有效成分为挥发油、生物碱、厚朴酚、和厚朴酚等。用于湿滞伤中，脘痞吐泻，食积气滞，腹胀便秘，痰饮喘咳。临床常与木香、半夏合用，用于胃腹胀气，行气散结等。如半夏厚朴汤、厚朴排气口服液。吴茱萸始载于《神农本草经》，列为中品，为靶香科植物吴茱萸的未成熟果实。具有散寒止痛，疏肝理气，温脾利湿之功效。其主要有效成分为生物碱类，毒性成分为挥发油，用于厥阴头痛，寒疝腹痛，塞湿脚气，行经腹痛，脘腹胀痛等。常与木香合用，用于治疗消化道溃疡及胃肠胀气，如香连丸。

目前，探索一种治疗胃痛、腹痛、胁痛的新型复方中药制剂已日趋成为医疗市场发展的需要。本文研究表明，复方香芍口服液的组方合理，质量稳定，能明显促进胃溃疡的愈合，临床剂量使用安全，超大剂量长期反复使用有可能导致肝脏水肿样变性，其机制需进一步研究。