免疫学检验技术的研究进展

2021-01-11天津市第五中心医院300450戴随

首都食品与医药 2021年2期

天津市第五中心医院（300450）戴随

伴随科技不断进步，免疫检验技术也随之迅速发展，从单一免疫诊断技术不断向着微量化、多基因、单细胞等方面发展。现阶段生物及相关科学快速进步，医疗技术不断发展，为免疫学检验提供了发展的坚实基础，在医学方面大大促进了免疫检验技术的发展[1]。本文就免疫学检验研究进展作一综述，并结合临床经验，以期为免疫学检验技术的临床研究与进展提供具有指导性的意见。

1 传统免疫学检验技术

传统免疫学检验技术又被称为血清学试验，主要是通过对沉淀物的形成、聚集、扩散以及溶血等现象进行观察，根据观察结果对样本中是否含有抗体或抗原等进行检验，结合样本进行中和、溶血、凝聚、沉淀等反应，上述各项方法均为人工操作，用时相对较长，操作步骤繁多复杂，其中梅毒快速诊断试验为最具有代表性的传统检验技术[2]。

1.1 甲胺苯红不加热血清反应素试验（TRUSR） TRUSR主要以甲苯胺红燃料颗粒为主，检验结果较为准确、稳定性较高、试验速度较快，但该检验方式易受到抗心磷脂抗体、高血脂等干扰，检验结果可能出现假阳性情况。

1.2 快速血浆反应素环状卡片试验（RPR） RPR是检验血清非特异性抗体的常用反应素，主要以牛心肌脂抗原作为主要抗原，在其中加入活性坦颗粒，检测过程中需充分混匀检验试剂以及血清或血浆，且在8min后检查结果，该实验操作相对便捷、试验结果准确、检查速度较快。RPR是明确有无感染风险、是否复发、临床诊断等的重要标准。但RPR在为类风湿性关节炎、乙肝、疟疾、孕妇等进行检验时，可能出现检验结果假阳性的情况[3]。

2 胶体金免疫学检验技术

在临床中，胶体金是一种应用较为广泛的标记技术，主要原理为根据氯金酸在还原剂作用后形成金颗粒，通过静电作用促进金颗粒形成稳定胶体状态，将其称为胶体金。胶体金标记能够通过还原法将胶体金制作成为颜色不同、形状各异的胶体金颗粒，对蛋白质发挥吸附作用，同时非共价结合抗生素、酶、毒素、免疫球蛋白等，是临床有效的检验工具，胶体金免疫学检验技术主要分为斑点免疫渗滤试验、免疫层析试验两种[4]。

2.1 斑点免疫渗滤试验斑点免疫渗滤试验主要包括间接法测抗体和夹心法测抗原，前者主要是将SPA显色/金标记抗体、抗体、抗原于膜上固定，后者则将特异性单克隆抗体、抗原、抗体于膜上固定。斑点免疫渗滤试验在结核分枝杆菌等抗体或抗原检测中应用较为广泛[5]。

2.2 免疫层析试验快速免疫层析试验主要是通过将抗体固定在硝酸纤维素膜中，随后在其干燥部位浸入样本，由于毛细管不断作用，能够促进样品向前移动，在移动至抗体部位时，样品中抗体与抗原能够进行特异性结合，通过免疫没染色或免疫胶体金能够促进其颜色的改变，进而取得试验结果[6]。

3 化学发光分析技术

CLTA（化学发光免疫分析技术）主要是指免疫反应结合化学发光测定技术，用以检测抗体或抗原的分析技术，现阶段CLTA属于较为成熟的超微量活性物质检测技术，具有检测速度快、限行范围宽、特异性强、灵活度高等特点，但在我国该分析技术的可靠程度以及灵敏度仍存在一定不足[7]。

ECLIA（电化学发光免疫分析技术）主要是将免疫检测技术结合电化学发光技术，具有速度快、稳定性高、干扰因素少、成本低、无需催化剂等特点，能够有效简化试验步骤，显著提升试验速度，但ECLTA相关试剂价格过高，在临床较难广泛推广使用。ECLTA技术试验原理相对简单、检验速度较快，干扰素较少、结果相对准确，对于体内药物浓度、维生素、血浆以及分泌激素等具有显著的检验作用[8]。

4 标记免疫学检验技术

4.1 元素标记免疫学技术钌元素、镧系元素均为元素标记免疫检验技术中常见的标记元素，分别通过电化学发光免疫分析技术、分辨荧光免疫分析技术进行检验，前者主要通过电场作用被反复刺激从而放大信号，而分辨荧光免疫分析技术能够应用于两种指标的同时测定中。

4.2 量子点标记免疫学技术量子尺寸相对较小，因其能够连续能带变成分立能级结构，接受激发而产生荧光，故其实质上属于探针的一种。现阶段，Ⅲ～V族或Ⅱ～Ⅵ族元素所组成的纳米微粒是应用最多的量子点标记类型，在生物多组分、免疫示踪定位、疾病早期诊断以及细胞成像中具有较为显著的推广应用价值。

4.3 核酸标记免疫学技术核酸标记检验技术主要是将核酸的转录翻译或扩增作为设计原理，核酸转录翻译主要是通过标记的抗体DNA与抗原发生反应后进行胞外转录翻译成酶后进行测定，而核酸扩增主要是DNA通过聚合酶链反应在短期内根据几何级数不断扩增而达到数百万倍。核酸的转录翻译与扩增均具有较高的灵敏度。

5 生物传感器免疫学检验技术

5.1 生物传感器生物传感器是能够在规定范围进行感应与测量，根据测量结果规律将其转变为有效的信号输出装置，主要是由识别元件感受器、存在光学或电化学检测元件组成的信号转换器两部分组成，是由医学、电子学、化学、生物学等多种学科组合而成，主要优势在于检验速度快、成本低、灵活度高、选择性好等，能够实现在线持续监测，伴随近年来生物传感器技术的不断发展，使得该检验技术得到医学方面的支持和广泛推广。

5.2 生物芯片技术生物芯片又被称为微阵列，属于一种高新技术，在生命科学领域中生物芯片发展较为快速，主要是指微电子技术或微加工技术于固相载体芯片上形成微型生物化学分析系统，能够实现对细胞、组织及蛋白质的有效检测，生物芯片包括芯片实验室、蛋白芯片以及基因芯片三部分，生物因子速度相对较快，能够获取较为准确的生物信息，具有较高的监测效率，对于医学检验技术的发展具有重要影响意义。