EB病毒DNA检测在鼻咽癌IMRT疗效分析中的价值

李赓，高健全

梧州市红十字会医院放疗三区，广西梧州543000

前言

鼻咽癌是咽与鼻腔之间发生的一种恶性肿瘤，好发于我国华南地区［1］。由于鼻咽癌患者在早期无明显临床症状，且发病位置较为隐蔽，常导致误诊甚至漏诊［2］。EB病毒是一种在人体主要以潜伏感染存在的疱疹病毒，有研究表明它与鼻咽癌的发生发展密切相关［3］。通过EB病毒DNA的检测可对鼻咽癌进行早期筛查以及对其治疗疗效分析［4］。本研究通过检测EB病毒DNA的变化监测鼻咽癌患者调强放射治疗（IMRT）前、中、后及其近期疗效与远期生存分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取梧州市红十字会医院肿瘤科放疗三区接受治疗的50 例鼻咽癌患者为研究对象，其中，男28 例、女22 例，平均年龄（56.32±25.63）岁，临床I期4 例、Ⅱ期15 例、Ⅲ期18 例、Ⅳa 期13 例。纳入标准［5］：（1）经鼻咽镜活检及病理检查确诊为鼻咽癌；（2）初治无远处转移的鼻咽癌患者；（3）有随诊条件。排除标准［6］：（1）入院治疗前有化疗、放疗、免疫治疗等治疗史；（2）自身免疫性疾病；（3）合并其他无法接受放疗的疾病。

1.2 方法

对入组的50例鼻咽癌患者予IMRT放疗：在放疗基础上加用同期化疗或诱导化疗。放射治疗靶区确定及放射方法按我院方法进行。鼻咽剂量68～70 Gy、颈治疗剂量68～70 Gy、亚临床病灶60 Gy、预防剂量54 Gy，分32～33 次进行。诱导化疗选择顺铂（DDP）加吉西他滨（GEM）方案，在放疗前治疗2 个疗程；同期化疗选择DDP，第1周与第4周进行。

1.3 评价指标

（1）荧光定量PCR 法检测患者放疗前、中、结束后即刻以及放疗后第6、9、12、18月复查外周血标本的EB 病毒DNA，结果以EBV DNA＞500 copy/mL 为阳性。（2）根据WHO疗效评价标准，评价治疗疗效［7］。①完全缓解（CR）：所有肿瘤完全消失持续至少1 个月，对于颅底有破坏患者，软组织影消失可以判定为CR。②部分缓解（PR）：肿瘤至少缩小一半以上。③稳定（SD/NR）：肿瘤缩小25%～50%，或肿瘤大小无变化。④疾病进展（PD）：出现新病灶，或肿瘤继续长大。（3）对患者生存期评价［8］：①总生存率（OS）：自确诊至患者死亡或末次随访的时间。②无进展生存率（PFS）：自患者确诊至局部复发/远处转移或末次随访的时间。③无病生存率（DFS）：从随机化开始至疾病复发或（因任何原因）死亡之间的时间。④无复发生存率（RFS）：根治性治疗（手术、放化疗达CR）至复发的生存时间。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0 软件对所得数据进行处理，其中计数资料采用χ2检验，以%表示，计量资料采用t检验，以均数±标准差表示，检验水准设定为α=0.05，当P＜0.05时，差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 EB病毒DNA水平与放疗敏感性

通过荧光定量PCR 法分别对50 例患者放疗前、中、结束后即刻以及放疗后第6、9、12、18月外周血中EB 病毒DNA 进行了检测，在放疗前EB 病毒DNA 阳性率为63.2%，放疗中EB病毒DNA 阳性率为30.1%，放疗后即刻检测EB 病毒DNA 阳性率为10.6%，放疗后第6、9、12、18月复查时阳性率分别为8.56%、7.32%、6.58%、5.35%，随时间呈下降趋势。放疗后外周血中EB 病毒DNA 阳性率与放疗前相比具有统计学差异（P＜0.05）。

2.2 肿瘤消退度评价

自患者放疗后6个月随访开始对肿瘤消退程度进行评估，通过数据分析每位患者的鼻咽原发灶CR、PR、SD、PD，患者放疗后大体恢复情况较好，且时间越久近期疗效越好（表1），与EB病毒DNA表达量变化一致。与放疗后6个月相比，具有统计学差异（P＜0.05）。

表1 治疗后原发灶消退情况（%）Tab.1 The regression of primary tumor after treatment(%)

2.3 治疗12、18个月EBV DNA与临床疗效的关系

依据治疗后12、18 个月临床转归情况，将50 例入选患者分为缓解组（CR、PR、SD）和进展组（PD），其中缓解组分别占97.3%、97.5%，进展组分别占2.7%、2.5%。缓解组治疗后12、18 个月EBV DNA 阳性率（6.47%、5.32%）比治疗前（63.2%）均显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；进展组治疗后12、18 个月EBV DNA阳性率（53.7%、57.6%）比治疗前（63.2%）降低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.4 生存情况

随访截止至2020年3月，中位随访时间14 个月（3～18 个月）。所有50 例入选患者，其中45 例预后良好，4例死亡，1例失访，失访率为2.00%。患者放疗后12、18 个月时的OS、PFS、DFS、RFS 数据见表2，这与EB病毒DNA表达量变化结果相一致。

2.5 疗效

50例患者均接受全部治疗，治疗结束后3个月时对患者治疗情况进行评价，43 例患者肿瘤全部消退，7 例存在残留肿瘤，其中4 例患者肿瘤在随访期间逐渐消退，2 例仍有残留，2 例发生远处转移，转移患者EB 病毒DNA 水平均高于正常值。分析每位患者的DNA结果，与疾病的恢复情况相一致。

表2 放疗后生存情况分析（%）Tab.2 Analysis of survival after radiotherapy(%)

3 讨论

鼻咽癌的发生与环境因素、遗传因素、EB病毒感染等相关，我国华南地区是其高发病区，且我国的发病率占全世界的70%［9-10］。放疗是鼻咽癌的首选治疗方式，但单一放疗对于治疗效果不够理想，由于远处转移及局部复发，其5年生存率仅为50%～60%。近年来国内外学者将放疗与化疗相结合治疗鼻咽癌降低了复发率，提高了鼻咽癌患者5年生存率［11-13］。EB病毒与传染性单核细胞增多症、霍奇金淋巴瘤等多种疾病相关，属于一类致癌物质，它与鼻咽癌的发生密切相关［14-15］。

目前，影像学是鼻咽癌患者早期诊断及预后评价的主要手段，然而影像学检查存在对于微小病灶和隐蔽部位容易漏诊、费用高等问题［16-17］。有研究表明在鼻咽癌患者的血浆中可以检测到EB 病毒中的DNA，并且通过进一步的研究发现EB 病毒DNA 表达量与病情相关，其浓度反映了肿瘤的分期与预后，病情严重、有远处转移的患者被检测到的DNA 的拷贝数越高［18-19］。EB 病毒DNA 表达量能够很好地反映患者体内负荷的肿瘤［20］。

本研究对入组的50例鼻咽癌患者予IMRT，并分别在放疗前、中、结束后即刻以及放疗后第6、9、12、18月复查时采取外周血标本，采用荧光定量PCR 法检测其EB病毒DNA浓度，分析其与鼻咽癌近期疗效以及OS、PFS、DFS、RFS的关系。研究发现随着患者接受IMRT至随访结束，DNA阳性率随时间增加呈下降趋势，而这一结果与它的近期疗效评价及生存分析中OS、PFS、DFS、RFS结果相一致。

综上所述，可以通过检测EB病毒DNA对鼻咽癌患者进行早期诊断，以及在治疗期间的疗效评估，在保证肿瘤清除效果的同时，给予患者个性化的治疗方案，与影像学相比更为简便、准确且为患者减轻一定的经济压力。将EB 病毒DNA 检测用于鼻咽癌IMRT疗效分析具有一定价值。