Sysmex UF-1000i 全自动尿液有形成分分析仪性能评价

罗燕萍，王成，蔡珠妹，莫红梅，张秀明

（深圳市罗湖医院集团罗湖区人民医院医学检验科，广东 深圳）

0 引言

尿沉渣有形成分检测对泌尿系统疾病、肾脏疾病、感染性疾病及循环系统疾病的临床诊断与鉴别诊断有重要价值[1-2]。Sysmex UF-10001 全自动尿有形成分分析仪基于流式细胞计数原理分析尿样中的有形成分白细胞(WBC)、红细胞（RBC)、上皮细胞（EC)、管型（CAST)、细菌（BACT)，并可定量显示；《医疗机构临床实验室管理办法》要求，尿液有形成分分析仪在常规使用前，应由实验室对未加修改而使用的已确认的检验程序进行独立验证。本实验室按照《医学实验室质量和能力认可准则在体液学检验领域的应用说明》对尿液有形成分分析仪性能进行评价。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Sysmex UF-1000i 全自动尿液有形成分分析仪（仪器编号：LJ-A-04)及相关配套试剂、校准品、UF CHECK 质控液。

1.2 标本来源

实验标本来源于深圳市罗湖区人民医院住院和门诊及健康体检者的尿液标本，2h 内完成实验。

2 实验方法

2.1 批内精密度

2.1.1 实验方案

按照CLSI EP5-A2 指南，收集高、中、低三个浓度水平的新鲜尿液分别用自动进样模式连续测定11 次，剔除第1 次结果，取后10 次结果计算均值（χ2）、标准差（SD）和变异系数（CV）。

2.1.2 判断标准

所有参数批内精密度的变异系数必须符合厂商声明要求，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST≤40.0%,B ACT ≤20.0%。

2.2 批间精密度

2.2.1 实验方案

使用室内质控在控结果的CV%作为评价指标，至少使用两个水平（包含正常和异常水平）的质控品，在检测当天至少进行一次室内质控，剔除失控数据（失控结果已得到纠正）后按批号或者月份计算在控数据的CV%（至少20 次数据）。

2.2.2 判定标准

应符合Sysmex UF-1000i 说明书要求批间精密度，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST ≤40.0%,BA CT ≤20.0%。

2.3 携带污染率

2.3.1 实验方案

按照CLSI EP10-A3 指南，选择RBC、WBC、BACT 浓度分别在（1000-5000）/μl、（1000-5000）/μl 和（5000-10000）/μl 的高值尿液样本混合均匀后连续测定3 次，测定值分别为H1、H2、H3；再用低值样本(无菌生理盐水)连续测定3 次，测定值分别为L1、L2、L3。按下列公式计算携带污染率[携带污染率%=（L1-L3）/（H3-L3）×100%]。

2.3.2 判断标准

应达到Sysmex UF-1000i 仪器说明书要求的携带污染率，RBC 和WBC 携带污染率≤0.10%，BACT 携带污染率≤0.05%。

2.4 线性范围

2.4.1 实验方案

取富含红细胞、白细胞、细菌和上皮细胞的尿液样本（RBC：10000 个/μl、WBC：2000 个/μl、BACT：10000 个/μl）分别按1:2，1:4，1:16，1:64，1:256 的比例用鞘液进行稀释每个稀释度测定3 次，取均值为检测值，将检测值与理论值作比较，进行线性回归相关分析，计算公式y=ax+b，验证可报告范围。

2.4.2 判断标准

a 值（斜率）在1±0.05 范围内，相关系数r ≥0.975。

2.5 准确度验证

2.5.1 实验方案

使用Sysmex UF-1000i 全自动尿有形成分分析仪UF CHECK 高值质控液按照说明书要求混匀后连续进行5 次测定，计算平均值（χ2），与靶值相比较，计算其偏差值。

2.5.2 判断标准

各参数偏差值要求在质控说明书靶值范围内，见表3。

表3 UF CHECK 质控液靶值

2.6 生物参考区间

2.6.1 实验方案

Sysmex UF-1000i 国内目前没有参考区间，本室对Sysmex 公司提供的日本的参考区间依据WS/T 402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》中相关要求进行验证；选择符合生物参考区间本室纳入标准的健康体检者尿液标本40 份，男女各20 例，年龄20-60 岁，连续上机进行测定，对结果进行统计。参考区间范围见表4。

表4 UF-1000i 报告参数的参考区间

2.6.2 判定标准

符合率R 值计算：R=落在参考区间例数/实验例数，要求R ≥90%为验证通过。

2.7 实验室内仪器间比对试验

2.7.1 实验方案

选择10 份新鲜尿液样本，包括正常与异常样本，与参加SNCS（Sysmex nework communication system）全球室内质控比对且成绩良好的UF-1000i 全自动尿液有形成分分析仪（仪器编号为MJ-A-10）进行仪器间比对实验，每个样本测定3次取其均值，计算两台仪器之间的偏差百分比。

2.7.2 判定标准

符合Sysmex UF-1000i 比对偏差要求的结果应≥80%，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST ≤40.0%,BA CT ≤20.0%。

3 实验结果

3.1 批内精密度

3.1.1 批内精密度实验结果

见表6。

表6 批内精密度实验结果

3.1.2 结论

各检测项目的CV%均小于厂商声明要求，验证通过。

3.2 批间精密度

3.2.1 批间精密度实验结果

见表7、表8。

3.2.2 结论

各检测项目低值和高值的批间精密度均符合Sysmex UF-1000i 说明书要求，验证通过。

3.3 携带污染率

3.3.1 携带污染率实验结果

见表9。

3.3.2 结论

RBC、WBC、BACT 携带污染率均小于Sysmex UF-1000i仪器说明书要求标准，验证通过。

表7 高值批间精密度实验结果

表8 低值批间精密度实验结果

表9 RBC、BACT 携带污染率数据统计

表10 线性范围实验结果

表11 准确度验证实验数据

3.4 线性范围

3.4.1 线性范围实验结果

见表10。

3.4.2 结论

RBC、WBC、BACT、EC 和CAST 的a 值（斜率）均在1±0.05范围内，R2均≥0.975，验证通过。

3.5 准确度验证

3.5.1 准确度验证实验结果

见表11。

3.5.2 结论

各参数偏差值要求均在质控说明书靶值偏差范围内，准确度验证通过。

3.6 生物参考区间验证

3.6.1 生物参考区间验证结果

见表12、表13。

3.6.2 结论

男性、女性各项目参考区间符合率R 值计算均≥90%，验证通过。

3.7 实验室内仪器间比对

3.7.1 实验室内仪器间比对结果

见表13。

3.7.2 结论

各项目比对偏差均符合要求，仪器间比对验证通过。

表12 男性生物参考区间验证结果

表13 女性生物参考区间验证结果

表13 仪器间比对偏差（%）结果

4 讨论

随着科技的不断进步，人们健康意识日趋增强，尿液检测量大幅提升，尿有形成分人工显微镜检查凸显不足，自动化尿有形成分分析仪应运而生。目前，国内、外已较普遍使用能对尿有形成分进行自动化分析的仪器，迄今为止，这些设备主要原理为流式细胞术和显微镜数据成像技术，均可直接检测不离心新鲜尿液标本，快速定量计算尿中各种有形成分，其结果重复性与人工镜检结果比较有显著提高，同时能与实验室信息系统接口，便于检索和结果报告；大大提升了尿液检测效率。Sysmex UF-1000i 全自动尿液有形成分分析仪的核心技术是以半导体激光作为激发光源，用核酸荧光染料对尿中各有形成分进行染色，以流式细胞术作为有形成分计数和分类手段，并以强大计算机软件系统作为有形成分分析平台，创立尿有形成分分析自动化的新方法[3]。

精密度是指在一定的测试条件下进行多次测定时，所得测定结果之间的符合程度，表示测量结果中随机误差的大小，是仪器性能评价的重要指标[4]。本实验结果的批内精密度和批间精密度均符合厂家声明要求，说明仪器的重复性好，这是进行其他性能评价的前提。携带污染率是评价仪器测定两个样本间干扰的程度[5]，本实验的RBC、WBC 和BACT 的携带污染率结果为0.01%、0.02%、0.01%，由于仪器说明书对EC和CAST 携带污染率未作明确要求，但结果显示其携带污染率结果均为0，说明前一高值样本并未对后一低值样本的检测结果造成影响。本研究对RBC、WBC、EC、CAST、BACT 的线性范围进行评价，结果显示a 值（斜率）均在1±0.05 范围内，r2均≥0.975，表明其有良好的线性范围。因高浓度样本较难收集，WBC、EC、BACT 的上限标本比厂家声明要求低，故证实的线性范围比仪器厂商声称的低。对于超过线性的标本，可按要求用鞘液稀释后进行测定，将测定结果乘以稀释倍数得出最终测定值。但张崇唯等[6]研究表明，在临床诊治过程中稀释后的高值标本其检测意义不大，因此无需进行稀释，可直接报告。由于卫生部临检中心至今仍没有有尿有形成分室间质评质控品，目前对于准确度的评价仍未有统一标准[7]，本实验用UF CHECK 高值质控液按照说明书要求混匀后连续进行5 次测定，均值与靶值相比较，计算其偏差值；结果显示各参数偏差值要求均在质控说明书靶值偏差范围内，说明其准确度高[8]。另外，还对仪器厂家提供的生物参考区间进行验证，结果表明其生物参考区间适用于本实验室。同一型号不同仪器间检测结果会存在一定的差异，其可比性对检验质量和临床诊断治疗至关重要,《医疗机构临床实验室管理办法》和CNAS-CL02-A002《医学实验室质量和能力认可准则在体液学检验领域的应用说明》[9-12]对检验结果的可比性有明确的要求，本室对两台UF-1000i 检测结果进行比对，结果显示符合率均≥80%，表明检测结果一致性好，可比性强，其结果可互认。

综上所述，Sysmex UF-1000i 全自动尿液有形成分分析仪的主要定量参数白细胞(WBC)、红细胞（RBC)、上皮细胞（EC)、管型（CAST)、细菌（BACT)的批内精密度、批间精密度、携带污染率、线性范围、准确度、生物参考区间、实验室内仪器间比对等指标均符合厂商声明要求，可应用于临床。