不同营养水平与投喂频率对棘胸蛙蝌蚪生长的影响

谢永广，张进，王怀昕，罗华辉，魏朝宇，钟光跃，陈敦学

（1.贵州大学动物科学学院/贵州大学渔业资源与环境研究中心，贵州 贵阳 550025；2.清远市现代棘胸蛙良种研究中心，广东 清远 513000；3.遵义市农科院，贵州 遵义 563100；4.四川省内江市农业科学院，四川 内江 642000）

棘胸蛙（Quasipaa spinosa）又名石蛙、棘蛙，是一种重要的两栖类经济动物。蝌蚪期是其生长周期中的重要阶段，研究蝌蚪期的生长对提高棘胸蛙的养殖产出具有重要意义。营养组成是蝌蚪成活率的限制因子，同时也影响蝌蚪变态和幼蛙成活率[1]；投喂频率是影响水产动物生长速度的重要因子，不合理的投喂频率会降低水产动物的生长速度或者降低饲料利用率，进而造成养殖成本上升与养殖环境恶化[2]。改进饲料配方和投喂频率，是实现棘胸蛙养殖“节本增效”的有效手段。

饲料中蛋白营养水平会显著影响蛙类的生长，饲料中添加动物性蛋白饲料会促进蛙类生长和提高变态存活率[3-6]。王鹏倞发现棘胸蛙蝌蚪饲料中，蛋白质种类多，蛋白比例相对平衡，会促进蝌蚪对蛋白的吸收，使其具有较快的生长速度[7]。肖调义等认为动物性饲料能加速蝌蚪发育，植物性饲料则能延缓蝌蚪的变态，因此在不同的阶段需要使用不同的饲料，以确保蝌蚪养殖效益[8]。关于饲料投喂频率对水产动物影响的研究已经有较多报道[9-11]，例如卵形鲳鲹的生长率就与饲料投饲频率呈正相关，并在投饲频率达到3 次/d 时达到最佳生长效率[12]，点篮子鱼随着投喂频率由1 次增加到4 次时，其特定增长率也显著增加[13]。不同的养殖品种有不同的最佳投饲频率，该研究将结合投饲频率和饲料营养水平对棘胸蛙蝌蚪生长的影响，摸索出适合养殖蝌蚪的饲喂模式和符合蝌蚪营养水平的饲料，从而解决了棘胸蛙蝌蚪饲养关键基础瓶颈，对棘胸蛙的推广养殖具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 试验动物来源与养殖设施

试验所需棘胸蛙来自英德市盈信农业有限公司生态石蛙养殖基地，选取3 龄以上，体质量220 g左右的棘胸蛙作为试验亲本，进行抱对产卵，将蛙卵集中孵化后，选取个体大小一致（平均6～9 mm）的蝌蚪（8 100 尾）进行分组试验。蝌蚪落池3 d 后开始摄食。试验所用养殖池为3 m×3 m×1 m 的水泥池，池子底部呈“锅底型”且中间开孔布置纱布网，用于池底排污。养殖池采用射水式进行增氧，确保水体溶解氧≥5.0 mg/L，遮光率60%，池内水深固定在15 cm，放置60 cm×60 cm 的瓷片一块，供蝌蚪躲藏。

1.2 试验设计与饲料配比

将试验所用8 100 尾蝌蚪随机分为A、B、C 3组，每组3 个平行池，每池900 尾，水温22 ℃，按照每天两次（8：00 和19：00）进行投喂（蝌蚪体质量的5%进行投喂），各种饲料配比与营养成分详见表1。

表1 饲料主要营养成分与营养水平

1.3 试验投喂方式设置

选取A 组饲料配方进行投喂频率试验，设置不同的投喂频率，分别为每日投喂2 次、3 次、4 次、5次，标记为D、E、F、G 组，该4 组按照“四定原则”进行投喂，日投喂量为蝌蚪体质量的5%。

1.4 蝌蚪生长发育测量

利用人工孵化的同一批棘胸蛙蝌蚪在养殖基地水泥池中饲养，每隔10 d 随机捞取池中30 尾测量相关数据。用游标卡尺记录蝌蚪的全长（自吻端至尾端的长度），长度精确到0.01 cm，利用分析天平测定蝌蚪的体质量，精确到0.01 g。试验期间每天记录摄食与死亡情况。体质量采用电子天平进行称重，对测量结果利用SPSS16.0 软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同饲料对棘胸蛙蝌蚪规格的影响

A、B、C 3 种饲料营养配方对棘胸蛙蝌蚪体长与体质量的影响见表2。其中A 组饲料（自配，总蛋白含量39%）具有最好的生长速率，70 d 时，体长（7.80±0.19）cm 与体质量（1.92±0.12）g 显著高于B组（总蛋白含量47%）和C 组（购买商品饲料，总蛋白含量48%），说明在蝌蚪生长过程中，并非蛋白含量越高越好，更加需要氨基酸及微量元素平衡，同时A 组饲料中添加了虫酵蛋白（13.8%）和黄粉虫砂（2%）可能对蝌蚪生长具有重要意义。

表2 不同饲料配方对棘胸蛙蝌蚪苗种规格的影响

2.2 不同饲料对蝌蚪变态成活率的影响

A、B、C 3 种饲料对饲喂的棘胸蛙蝌蚪变态成活率也有明显影响，结果见表3。其中A 组变态成活率最高，100 d 时达到95%的变态成活率，显著高于B 组和C 组，同时A 组在饲养70 d 时，出现较为规整的变态率（90%），便于养殖管理与后续幼蛙分池，因此我们认为A 组配合饲料具有最好的养殖效果。

表3 不同饲料配方饲养蝌蚪变态率统计

2.3 不同投喂频率对蝌蚪生长的影响

根据前期结果，作者选用A 组饲料进行投喂频率试验，试验结果见表4，投喂2 次/d、3 次/d、4 次/d、5 次/d 蝌蚪体质量增长差异不具统计学意义，其中投喂4 次/d 和5 次/d 蝌蚪体质量略有增加，且70 d 变态率也有提高，但是综合考虑投入成本，建议以投喂2 次/d 为最优，可以达到最大投入产出比。

在20—30 d 阶段，蝌蚪体长增长相对较慢，30 d 后体长增长明显加快，直到开始长出后腿为止。有研究报道，蝌蚪在生长过程中有生长停滞的现象，认为是蝌蚪在储藏能量，为变态作准备。该试验也发现类似的现象，即在20—30 d 阶段，蝌蚪的体长增长几乎停滞或者生长缓慢，然而体质量增长并没有减慢（见图1），说明在该阶段蝌蚪主要是体质量增长。

表4 不同投喂频率下，棘胸蛙蝌蚪体长体质量增长情况

2.4 棘胸蛙蝌蚪生长曲线

以A 组饲料为标准饲料，以投喂频率为2 次/d，每隔10 d 每个池随机选取30 尾蝌蚪，测量体长和体质量。构建棘胸蛙蝌蚪的生长曲线，见图2，得到体质量（Y）与体长（X）的关系满足：Y=0.0054 X0.3131（R2=0.97），通过该关系式可知蝌蚪的生长属于等速生长。利用该关系式可以用来预测和检验人工养殖棘胸蛙蝌蚪的生长。例如蝌蚪营养不良，测量数据会偏离预测值。

3 讨论

3.1 不同营养水平对棘胸蛙蝌蚪生长的影响

在规模化养殖生产中，为了促进蝌蚪苗的快速生长发育，就必须保证饲料当中蛋白质的适宜含量。不少研究认为蝌蚪饲料中，蛋白含量高，会促进生长[15-16]，李新红等[4]研究不同营养结构的饲料对中国林蛙生长发育的影响，认为动物性饲料比例大，蛋白含量高，蝌蚪发育会加快，完成变态所需时间短，而在植物性饲料中添加一定的动物性饲料，会使蝌蚪变态后的幼蛙个体较大, 体质健壮。肖调义等[8]在研究棘胸蛙蝌蚪的变态发育过程中，也认为动物性饵料能加速蝌蚪的变态发育, 植物性饵料则能延缓蝌蚪的变态[17-18]。然而并不是动物性蛋白含量越高越好[19]，一方面需要考虑养殖经济效益，另一方面蝌蚪的生长速度及代谢机能也是有限的，倘若蛋白水平太高，不但不能促进机体的生长发育，反而影响机体的正常代谢，饲养效率降低，严重时甚至导致动物中毒，再加上饲料原料成本较高，致使整个养殖生产经济效益降低。在该试验中，A 组饲料蛋白含量（39%）和动物蛋白比例（60%）均低于B组，其70 d 时生长性能（体长、体质量）均显著高于B 组，且变态成活率也高于B 组和C 组，且变态更加规整，便于管理，因此我们认为棘胸蛙蝌蚪生长不仅仅与蛋白含量（动物蛋白比例）相关，更大程度上取决于氨基酸以及微量元素的平衡。

3.2 不同投喂频率对棘胸蛙蝌蚪生长的影响

在水产动物的人工养殖过程中，确定适宜的投喂频率对于提高养殖品种的生长速度、存活率[20]以及减少饲料浪费，提高养殖个体规格规整度[21]具有重要意义。然而最适的投喂频率因养殖品种差异而不同。Andrews 等[22]发现每天投喂2 次，斑点叉尾的生长率和饲料转化率最好。Eglal 和Gunther[23]发现镜鲤最适饲喂频率为4～6 次/d。目前主要有两种理论：一是随着投饲频率增加，水产动物饲料转化效率与蛋白保留率均上升；二是水产动物生长率主要受摄食率的影响。谢全森等[24]研究泥鳅投喂频率时，发现投喂频率从2 次/d 到4 次/d，泥鳅的增重率显著提高，从4 次/d 到6 次/d，泥鳅的增重率有所提高但没有特别大的差异。周歧存研究南美白对虾时，提高投喂频率，对虾的生长反而出现下降的势头。姜建湖等[25]研究青鱼幼鱼投喂频率从1 次/d到3 次/d 时，青鱼生长率显著增加，进一步提高投喂频率，生长差异不具统计学意义，因此确定青鱼最适投喂频率是3 次/d。在该研究中，随着投喂频率从2 次/d 增加到5 次/d，生长率和变态成活率有所提高，但是没有统计学意义差异，考虑饲料和人工成本，我们推荐2 次/d 为最佳投喂频率。