早期急性脑梗死患者血清MMP-9、S100水平与血脑屏障损伤相关性研究

黄文娟 张雯雯 岳婵娟 程星 张侠 陈巍巍

221000徐州市中心医院神经内科1，江苏徐州

221000徐州市中心医院检验科2，江苏徐州

资料与方法

2019年1月-2020年2月收治急性脑梗死患者53 例，作为急性脑梗死组，男31 例，女22 例；年龄38～87 岁，平均(61.49±9.85)岁；所有患者均为首次发病，在发病12 h 内入院，按照第四届全国脑血管病修订诊断标准，经头颅CT排除出血后入组。对照组为健康体检者36例，男21 例，女15 例；年龄49～73岁，平均(61.61±10.48)岁；经神经系统及CT排查排除颅内病灶。急性脑梗死组脱落2例，均为男性患者。

脱落标准：①中途转院或退出研究；②依从性差或不合作。

排除标准：①病情危重；②生命体征不稳定或昏迷状态；③自身免疫系统和血液系统疾病；④代谢免疫性疾病；⑤恶性肿瘤；⑥心肝肾功能衰竭、感染等严重合并症；⑦近期有手术或创伤、近3个月内有激素使用史及可能影响血清MMP9、S100、CRP、NSE水平的疾病。

方法：①标本采集：急性脑梗死患者于发病72 h 抽取晨起空腹静脉血1次，对照组于体检时采血1 次。静脉血标本5 mL 采用抗凝管收集，4℃低温离心机，2 500 r/min离心15 min，收集上清液，-80℃冰箱储存，用于ELISA 检测MMP9；S100、NSE、C 反应蛋白送至医院检验科进行检测。②头颅CT检查：全部入组患者均在入院当天及第10 天复查头颅CT。应用Pullicino 公式：长×宽×CT 扫描阳性层数×π/6 计算梗死体积，梗死体积＜5 cm3为小面积梗死灶，5～10 cm3为中面积梗死灶，＞10 cm3为大面积梗死灶。③NIHSS 评分：在患者入院当天(发病后12 h内)进行NIHSS评分，主要通过意识水平、眼位、面瘫、语言、肢体活动及感觉等方面。＜4分为轻度脑梗死，5～15 分为中度脑梗死，＞15 分为重度脑梗死。

统计学处理：数据应用SPSS 23.0 软件处理；计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验；计量资料以(±s)表示，采用t检验；多样本间两两比较采用单因素方差分析；P＜0.05为差异有统计学意义。

结果

两组临床资料及生化指标水平比较：急性脑梗死组年龄、性别、高血压病、糖尿病、吸烟等情况与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。急性脑梗死组HCY 水平显著高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

血脑屏障损伤程度与脑梗死严重程度的关系：按照NIHSS 评分将急性脑梗死组患者分为轻、中、重组。急性脑梗死组血清S100、MMP9 水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。轻度组CRP、NSE 水平与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 S100、MMP9、CRP、NSE 随着神经功能损害程度加重而逐渐升高，中度损伤组较轻度损伤组，重度损伤中较重度损伤组之间的S100、MMP9、CRP、NSE 水平均有明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

血脑屏障与梗死面积的相关性：按照急性梗死组患者颅内梗死面积大小，将急性脑梗死患者分为小面积、中面积、大面积脑梗死。随着急性脑梗死面积的增大，血清S100、MMP9、NSE水平逐渐升高，且各组间比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。小面积组和中面积组CRP 无显著差异，大面积组CRP 显著高于中面积组和小面积组。见表3。

表1 两组临床资料及生化指标水平比较[(±s)，n(%)]

表1 两组临床资料及生化指标水平比较[(±s)，n(%)]

注：与对照组相比，⋆P＜0.05。

组别n平均年龄(岁)男女吸烟高血压糖尿病血同型半胱氨酸(HCY)(μmol/L)对照组3661.61±10.48211513(36.11)22(61.11)11(30.56)10.00±3.90急性脑梗组5161.49±9.85292220(39.21)32(62.75)17(33.33)17.80±5.26⋆

表2 血脑屏障损伤程度与脑梗死严重程度的关系(±s)

表2 血脑屏障损伤程度与脑梗死严重程度的关系(±s)

注：与对照组相比，aP＜0.05；与轻度梗死组相比，bP＜0.05；与重度梗死组相比，cP＜0.05。

组别nS100MMP9NSECRP对照组3675.97±17.9921.84±8.097.05±2.756.44±3.27 NIHSS分级轻(＜4分)15119.97±25.52a117.58±17.08a7.37±2.986.72±2.86中(5～15分)23200.25±48.85ab165.35±17.68ab20.67±7.29b10.94±4.70b重(＞15分)13396.41±82.64abc217.23±22.44abc46.48±17.52bc43.14±33.76bc

表3 血脑屏障损伤与梗死面积相关性(±s)

表3 血脑屏障损伤与梗死面积相关性(±s)

注：与小面积组相比，aP＜0.05；与中面积组相比，bP＜0.05。

组别nNIHSSS100MMP9NSECRP＜5 cm3144.60±3.34136.71±33.62128.91±23.809.84±4.598.24±3.24 5～10 cm31912.22±8.92a215.50±121.37a158.87±34.93a20.42±12.34a8.71±4.80＞10 cm31820.50±9.46ab340.68±81.77ab205.95±37.08ab33.18±14.35ab33.72±31.12b

讨论

急性脑梗死是由于多种原因引起的局部脑血液供应障碍，缺血、缺氧引起脑屏障破坏，中枢神经系统的免疫豁免地位随之改变，大量免疫细胞渗透入脑实质，引起免疫相关反应，最终导致特殊的固有免疫和适应性免疫反应[1-2]。蛋白质在血液中含量丰富，它可以在疾病表现出可察觉的临床症状之前，即出现可监测的变化。通过检测血液指标中的MMP9、S100 观察血脑屏障损伤水平，应用CRP 观察血脑屏障破坏后中枢神经系统的炎性反应，通过检测NSE 观察炎性反应导致的神经元损伤情况。

血脑屏障是由毛细血管周围星形胶质细胞足突，内皮细胞及其紧密连接的基膜、周细胞组成，起到维持中枢神经系统内环境稳定的作用[3-4]。急性脑梗死发病过程常伴随着血脑屏障的破坏、受损脑组织中大量炎性细胞的产生、浸润和聚集，炎性因子的分泌增多、黏附分子的表达上调等。强烈的炎症反应可以导致急性脑梗死后继发的脑组织损伤。急性脑梗死患者随着梗死面积及受损程度的加重，CRP 水平呈逐渐上升趋势，因此随着血脑屏障受损加重，会造成更严重的炎性反应[5-6]。本试验同步检测NSE 水平，入组的急性脑梗死患者，轻度、中度、重度脑梗死组NSE水平呈上升趋势，神经元随着炎性反应损伤逐渐加重。