一例羊传染性胸膜肺炎的诊断与分析

熊 杰，张昕彤，蒋成伟，胡生富，蒲杨柳，梁易晓

（1.攀枝花市动物疫病预防控制中心，四川 攀枝花 617000；2.攀枝花市动物卫生监督所）

羊传染性胸膜肺炎，又称羊支原体性肺炎（MPSG），是由多种支原体引起的绵羊和山羊的一种高度接触性传染病，以高热、咳嗽、纤维素性胸膜肺炎为主要特征，典型病理特征是胸腔有大量淡黄色浆液纤维素性渗出物；胸膜充血；肺胸膜与肋胸膜粘连；心包积液；肺脏肝变。笔者就2020 年5 月攀枝花某散养户山羊发生羊传染性胸膜肺炎的发病情况、临床症状、病理变化、实验室诊断，提出思考和分析。

1 发病情况及临床症状

攀枝花某农户，养殖本地山羊32只，2020年5月26日开始发病，出现眼结膜苍白、发绀，精神沉郁，死前口吐泡沫、低嚎和腹部膨胀等症状，到27日已死亡7只，死亡率达21.9%。

2 病理变化

对死亡24 h内的山羊进行解剖，发现心脏质地软化，肺与胸壁，肝与腹壁少量粘连，肺脏肝变、真胃出血，胃黏膜坏死脱落，胆囊肿大积液。

经过对临床症状和病理变化分析，初步怀疑为羊传染性胸膜肺炎感染，现场采集心、肝、肺、肠系膜淋巴结至实验室进行荧光定量PCR检测。

3 实验室诊断

3.1 样品处理及核酸提取

将现场采集的心、肝、肺等组织用组织研磨仪（宝予德，EasyextractS）进行组织匀浆后，8 000 rpm离心2 min取上清液，按照DNA 提取试剂盒（离心柱提取法）提取组织DNA。

3.2 荧光定量PCR

将提取的DNA按照无锡优联生物科技有限公司羊传染性胸膜肺炎（MPSG）核酸检测试剂盒（荧光-PCR法）（生产批号：20040101）说明书进行羊传染性胸膜肺炎（MPSG）支原体检测。

4 结果

羊传染性胸膜肺炎（MPSG）支原体检测结果：阳性对照Ct 值≤32 并出现特异性扩增曲线，阴性对照CT 值＞38或无CT值，试验结果成立。所有被检样品CT值≤35并出现特异性扩增曲线，表明所有样品羊传染性胸膜肺炎（MPSG）支原体阳性。

5 讨论

山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）、丝状支原体山羊亚种（Mmc）和绵羊肺炎支原体（Mo）是引起羊传染性胸膜肺炎的主要病原体，其中Mccp 和Mmc 属于丝状支原体簇，均感染山羊，Mo 感染山羊和绵羊。三种致病支原体中，Mccp 引起的山羊传染性胸膜肺炎（CCPP）危害最大，发病率高达100%，病死率60%～70%，世界动物卫生组织（OIE）将其列入必须上报的动物疫病目录，我国为将其与其他支原体引起的山羊肺炎区别，将其命名为山羊接触传染性胸膜肺炎，并制定了国家标准。Mccp、Mmc和Mo的正确及时诊断是羊传染性胸膜肺炎防控的重点，其中Mccp 的实验室诊断则最为困难。病原分离与鉴定是鉴别诊断支原体的黄金标准，但是由于Mccp 体外生长难度大并且容易受到其他支原体污染，此方法多适用于科研院所，较少应用于基层兽医实验室。血清学诊断和分子诊断技术是目前常用的方法，虽然Mccp与Mmc同属于丝状支原体簇成员，存在血清学交叉反应，但随着诊断技术的改进，有研究人员开发出了特异性强、敏感性高、重复性好的血清学诊断方法。相比于血清学诊断方法，基于基因或者DNA 的分子诊断方法具有更高的特异性和敏感性，目前常用的分子诊断方法有PCR、荧光定量PCR、环介导等温扩增技术（LAMP）和重组酶聚合酶扩增（RPA）。

羊传染性胸膜肺炎在我国长期存在，20世纪20年代，我国新疆伊犁地区最早发现此病，随后在新疆、甘肃、西藏、四川、内蒙古等地流行，给我国养羊业带来了重大损失。攀枝花地处山区，山羊多采取放养的养殖模式，疫苗免疫率低，发病风险高，该次试验采用荧光定量PCR方法进一步验证了羊传染性胸膜肺炎在攀枝花流行，为下一步攀枝花市羊传染性胸膜肺炎的流行病学调查与支原体分型鉴定奠定了基础。