类风湿性关节炎相关自身抗体及血清标志物研究进展

初礼巍

（广西省桂林市人民医院，广西 桂林）

0 引言

类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis, RA）病变包括类风湿结节、血管炎，随着病情延续后期还有其他脏器系统的损害，最终可能会致残[1]。2010年ACR（American College of Rheumatology, ACR）和欧洲抗风湿病联盟（European League Against Rheumatism, EULAR）共同发布《2010类风湿关节炎分类标准》[2]，新标准强调在类风湿因子（Rheumatoid Factor, RF）检测基础上，增加抗环瓜氨酸肽抗体（Anti-cyclic Citrullinated Peptide Antibody, 抗CCP抗体）的检测，但有15%~25%的RA患者两种抗体可阴性，两种抗体阴性的患者虽然发展为侵蚀性关节病的可能性相对较小，但是在临床中却伴有较为明显的关节疼痛等症状[3]。因此，通过临床中对两类抗体阴性患者血清标志物进行寻找具有重要的意义，本文将基于近年来与RA相关的自身抗体及血清标志物进行综述。

1 类风湿因子

自1927年RF被发现以来，针对RF已做出了大量的研究。RF是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体，包括IgM、IgG、IgA、IgE及IgD共5种类型。近年来有研究推测，RF首先于滑膜浆细胞内被瓜氨酸蛋白抗体（Anticitrullinatedprotein Peptide Auto Antibodies, ACPA）或其他形式的免疫复合物（Immune Complexes, ICs）诱导合成，而通过对患者血清与滑液检测发现，RF大多为IgM型。RF作为一种较为敏感的自身抗体，可在患者发病前数年被检测出。在对RA患者的临床研究中发现，有95%的RA患者RF检测结果为阳性。但国内另有报道认为[4]，RF检测为阳性只能说明患者发生关节炎的可能性相对较高，但是却并不能作为诊断RA的唯一依据，因为RF还可存在于其他风湿性疾病、感染性疾病以及少部分正常人群中，因此其特异性不高。孙怡宁等[5]的研究指出，在对RA患者行血清RF检验中发现，敏感度为97.53%，特异度仅为62.72%。虽然RF仍然被临床中作为诊断依据但其特异度相对较低，因此，在临床诊断中通常将RF与其他指标进行联合诊断，从而提高对患者诊断准确率，以降低误诊率。此外，RF水平与RA疾病活动性密切相关，但RF的亚型与RA活动的相关性目前仍有争议[6]。

2 抗环瓜氨酸肽抗体

ACPA是当前临床中较为蟾宫的诊断标志物，可对早期RA患者进行有效的诊断。其中，抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）对于诊断RA具有良好的特异度和敏感度。陈永等[7]对37项抗CCP抗体研究和50项RF研究进行评估发现，抗CCP抗体的敏感性、特异性分别为62%~72%、94%~97%，而IgM型RF值的敏感性、特异性分别为65%~73%、82%~88%，由此可见抗CCP抗体对RA的诊断较RF特异性更强。有研究发现[8]，CCP抗体还与RA疾病关节活动度高度相关，可对关节损伤进展做预测作用。目前对CCP抗体检测方法主要为化学发光法或电化学发光技术、应用第二代抗CCP抗体ELISA检测技术。化学发光法对RA疾病的诊断灵敏度较ELISA法检测技术高，而特异度未有差别，但是化学发光方法更符合临床快速报告的需求。

3 抗核周因子抗体

抗核周因子抗体（APF）是与1964年荷兰血肿在进行颊粘膜细胞实验中偶然发现的，APF在发现时期细胞浆内有均质性球形荧光颗粒，被称之为核周荧光，因此对发光因子称之为APF。在对APF的临床研究中发现，这是一种不溶性蛋白，对冻融较为敏感且对多数化学处理敏感度较低。而通过间接荧光法对APF进行检测后发现，其主要抗体为IgG型，能够通过对RA患者的血清以及关节滑液中检测出，并且与患者的性别以及年龄无相关性。在对RA患者的临床诊断中发现，APF的阳性与患者的病情呈正相关性，患者病情越严重，APF水平越高，因此，当APF从RA患者的血清中被检测出后，就表明患者的预后欠佳，特别是RF阴性患者中检测出APF阳性的患者。通过对APF的特异性与敏感性进行研究发现[9]，APF对RA具有较高的特异性，且高达89%~94%，同时，APF还具有较高的敏感性，高达50%~80%。因此，在临床中，APF也可以作为RA患者的临床诊断标志物。

4 抗角蛋白抗体

AKA是与1979年H Rotan[10]行大鼠实验是采用免疫荧光法检测到的一种IgG型抗体，并且通过对AKA的临床研究发现，AKA对RA具有极高的特异性，且高达94%~98%，但是AKA的敏感性与RF相比却略低。在对AKA的临床研究中表明，AKA能够与RA临床表现发生前进行检测，且AKA水平与患者RA病情程度有着极大的相关性，通常AKA的出现表明患者预后不良[11]。但是在通过对RA患者的临床试验中发现，RA患者血清中所识别的大鼠食管角质层中的蛋白并非角蛋白，而是分子量为40KD的蛋白，并于细胞分裂晚期的聚角蛋白微丝蛋白中出现，但是在临床中仍然将其称之为AKA。并且在临床试验中发现，所有RA患者血清经检测后发现APF为阳性的患者，其血清中所含有的AKA均为阳性，但是AKA阳性患者血清中对APF进行检测则部分为阳性。因此，我们可以认为，APF与AKA之间具有显著的相关性[12]。

5 抗 RA33 抗体

临床研究中发现，抗RA33抗体是一种异质性核糖核蛋白的核心蛋白A2，其对应抗体在RA患者血清中可被检出。根据相关研究报道[13]，在针对RA患者血清抗RA33抗体的检测中发现，RA33抗体敏感性为31%~34%，但其特异性为89%~90%。虽然RA33抗体的诊断准确率较低，但是在对CCP抗体与RF隐性RA患者的检出中具有显著的诊断意义，可与临床中其他抗体对患者进行联合检测。

6 葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6PI）抗原

G6PI抗原是一种多功能蛋白，在细胞内是糖酵解及糖异生的关键酶，在细胞外则有细胞因子的活性。而在临床研究中发现，G6PI抗原具有较高的灵敏度与特异度，根据袁莉敏[14]的研究指出，G6PI抗原对RA进行诊断发现，其灵敏度为76.52%，特异度为94.27%，其特异度与CCP抗体相当，并且将G6PI抗原与抗CCP抗体联合RF对RA患者进行诊断，其特异度高达97.63%。临床研究中发现[15]，G6PI抗原主要存在于RA患者组织中，而患者G6PI抗原的升高能导致其自身抗体增加。相关文献表示[16]，RA患者血清中G6PI酶活性显著高于非免疫炎性关节炎患者。同时，还有研究指出[17]，RA患者血清G6PI水平显著高于其他炎症疾病水平，并且G6PI血清水平与RA疾病程度呈正相关性。

7 抗 Filaggrin 抗体

在对抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）的临床研究中表明[18]，这是一种碱性且带正电的蛋白，通常出现于上皮细胞的分化后期。其前身为聚角蛋白微丝蛋白，且在胞浆透明角质中聚集。随着对AFA的临床研究表明，AFA与AKA以及APF均可在RA早期中被检测出。并且根据相关实验表明，AFA与RA患者的病情程度有着极大的相关性。AFA具有较高平的特异性，约为96%，而阳性率约为40%，且具有较大波动。

8 其他的抗体

临床研究中发现，RA的抗体还包括抗p68抗体、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体BI（BRAF）等[19]。抗p68对RA患者诊断具有较高的特异性与敏感性，其敏感性为67.8%，特异性为91.4%，其抗体与RA发生时间呈正相关性。BRAF是一种诱导细胞增殖与转化的抑癌基因，与RA中的关节炎症以及骨质破坏密度有着极为密切的关系。在对RA患者血清中的BRAF抗体进行表达，其阳性率为47.6%，因此可作为抗CCP的抗体诊断补充指标。

9 总结

通常RA患者发病3个月内便会发生关节滑膜破损，若不给予患者尽早治疗，则会导致一部分患者在发病后的两年内出现极为严重的骨质破坏。由此可见，尽早对RA患者给予有效的治疗以及诊断是非常重要的。目前临床针对RA患者诊断依据仍为RF检测、X线检查以及临床表现情况等，早期的RA较为隐匿且多变，当患者完全符合相关标准时可能早已发生骨关节损坏。此外，传统指标RF针对疾病诊断的特异性不高，使得RA患者的早期干预治疗以及早期诊断受到阻碍[20]。王菲等[21]的研究的结果指出，RF在疾病诊断中感性为88.89%，特异性仅为74.00%。由于其他感染性疾病以及正常人群、自身免疫疾病人群中均能检测出RF，所以使得RA诊断在应用过程中受到了一定的限制。

随着医学领域不断深入探究发现，新型标志物AKA、抗CCP、APF、抗RA33以及AFA等一系列抗体不断在早期的RA患者中被检测出来[22]。李亚芹等[23]的研究发现，对照组与非RA组患者RF、抗CCP抗体和抗RA33抗体指标阳性率显著低于RA组患者，且多抗体联合检测针对RA诊断存在极高的特异性以及敏感性，因此建议临床加大对多抗体联合检查力度。

针对RA疾病诊断的新型标志物随着自身免疫性疾病研究的发展跃然而生，但新型标志物无论在疾病诊断还是评价预后方面都不能完全取代传统自身抗体，仍然需要进一步的相关研究考证。相信随着自身免疫疾病相关研究的大力拓展，人们逐渐加深对相关疾病的认识，未来会在疾病预防、临床诊断和治疗方面都能取得更大的突破。