RAB1A在晚期卵巢癌中的表达及与预后的关系

边 燕，黄娟娟，杨宝龙

(1.延安大学附属医院产科；2.延安市人民医院肿瘤科，陕西延安716000)

卵巢癌(Ovarian Cancer)目前是继宫颈鳞癌和子宫内膜癌之后名列第3的妇科恶性肿瘤，卵巢癌发病较为隐匿，目前发病率全世界均呈现出逐年上升态势，预后较差，死亡率高，2/3卵巢癌确诊时已是Ⅲ期或Ⅳ期。根据美国癌症协会研究，美国2018年将有超过24万例新增卵巢癌患者，另有超过14万例卵巢癌死亡病例[1-2]。依据国家癌症中心陈万青教授报道[3]，我国晚期卵巢癌患者5年生存率仅为38.9%。随着卵巢癌靶向治疗研究药物的出现，目前对于晚期卵巢癌三、四线治疗方面有较多药物可以选择，但是上皮性卵巢癌的5年生存率却没有能够得到显著提高[4-5]。寻找卵巢癌新的预测指标具有非常重要的意义。目前前沿研究结果表明，RAB1A是存在于细胞膜上的一种小分子跨膜转运蛋白，它参与从内质网到高尔基体的转运过程，既往一系列基础研究已经证实其参与信号传导、细胞迁徙等[6]；临床研究报道RAB1A能够在结直肠癌中发挥促癌作用，但是我们尚未见到其在卵巢癌中的研究报道。本研究将对其在卵巢癌中所起作用进行如下报道。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2010年6月至2018年6月来自延安市人民医院及延安大学附属医院的181例卵巢癌术后患者癌组织及癌旁正常组织标本作为研究对象，样本平均年龄60.2±10.9岁。全部卵巢癌样本均经术后病理确诊，患者年龄、病理诊断、分期、生存时间资料收集完整；随访时间最短8个月，最长88个月，中位随访时间47.5个月，追踪随访资料完整。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 实时荧光定量PCR

1.2.1 试剂 中国达安基因TRIzol试剂盒、中国凯杰生物TAKARA反转录试剂盒、深圳欣博生物RAB1A兔多克隆抗体、北京索莱宝科技超敏发光液；

1.2.2 实验方法 TRIzol试剂来提取totalRNA，并使用TAKARA反转录试剂盒(PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser)反转录制备cDNA文库；试验仪器选用我院7900HT PCR仪，qPCR mix选用SYBR Green PCR Master Mix，反应体系根据说明书配置，试验过程严格按照PCR实验流程进行，结果采用卡方检验法进行分析。

1.3 统计学方法

数据处理使用SPSS 22.0(IBM公司)进行统计学分析，所有数据处理均进行双侧检验，α=0.05，P<0.05认为存在统计学意义。数据处理使用配对t检验分析RAB1A表达水平的差异，采用卡方检验分析RAB1A表达水平和卵巢癌患者临床特征之间的关系，采用K-M法进一步绘制出卵巢癌患者生存曲线图，用log-rank检验患者不同RAB1A表达水平存在的总生存时间差异。

2 结果

2.1 RAB1A在卵巢癌组织中高表达

本次研究采用qPCR检测了所有181对卵巢癌组织-癌旁正常组织，发现RAB1A在癌组织中出现高表达，癌旁组织中表现为低表达；卵巢癌组织中的表达量是癌旁正常组织表达量的1.98倍(Mean±SD，0.0081±0.0264vs.0.0041±0.0097，P=0.024，见图1)。

2.2 RAB1A表达水平与卵巢癌患者多因素分析

分析RAB1A表达水平与卵巢癌患者年龄、吸烟史、饮酒史、TNM分期之间的关系；RAB1A高表达与卵巢癌患者年龄(P=0.009)、吸烟(P=0.010)、肿瘤临床分期(P=0.011)、是否淋巴结转移(P<0.001)、是否发生远处转移(P=0.013)均有关(见表1)。

表1 RAB1A表达水平与卵巢癌患者临床特征之间的关系

2.3 RAB1A高表达与卵巢癌患者生存期缩短相关

通过进一步分析RAB1A表达量与卵巢癌患者总生存时间的关系，我们将本研究样本分为RAB1A高表达组和低表达组，使用Kaplan-Meier法进行总生存分析，使用Log-rank进一步检验高表达组和低表达组生存率之间的差异，显示低表达组中位生存时间为78.6个月，高表达组中位生存时间为27.0个月，总生存(Overall Survival，OS)差异具有明显统计学意义，RAB1A高表达组OS明显低于RAB1A低表达组(χ2=14.8，P<0.01；见图2)。

3 讨论

卵巢癌是女性常见恶性肿瘤，在各种肿瘤的死亡率中却居首位[7-9]，对女性健康造成了严重威胁。因卵巢癌早期无症状或症状较轻，待有症状到最终确诊大多数已是肿瘤中晚期[10-11]，晚期卵巢癌目前预后仍然不理想，故对卵巢癌的诊断和治疗提出了挑战。

目前消化道肿瘤方面文献已经报道显示出RAB1A与肿瘤的发生、侵袭、转移相关[12-15]，李平，等[16]研究发现MiR-150-5p通过靶向调控RAB1A抑制乳腺癌细胞MDA-231的上皮-间质转化。韩起，等[17]研究发现MiR-139-3p靶向调控RAb1A表达促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。余劲松，等[18]研究发现RAB1A蛋白高表达对胃腺癌的发生发展具有促进作用。程正武，等[19]研究发现RAb1A的表达和结肠癌细胞增殖和迁移侵袭能力相关。黄廷磊，等[20]研究发现RAB1A通过调节JAK1磷酸化水平影响非小细胞肺癌细胞迁移。检索国内外文献尚未发现RAB1A在卵巢癌中预后判断的报道。该研究对RAB1A在卵巢癌中所起作用和临床意义的探索性研究，通过病理标本检测RAB1A的表达量，我们从中发现RAB1A在卵巢癌组织中的表达量显著高于癌旁正常组织表达，高表达组生存期明显低于低表达组，依据本研究最后可以确定测量RAB1A表达水平可以作为卵巢癌患者预后的判断指标。

更多的证据表明RAB1A与卵巢癌发生淋巴结转移，远处转移密切相关，但是我科目前研究存在一定的局限性，仅仅发现有限的关联和简单的预测验证，到目前为止RAB1A在癌症发生和发展中所起的具体机制尚不明确，有待我们进一步研究证实。