酶联免疫吸附法与冷凝集试验在早期肺炎支原体感染中的诊断比较

孙娟子，孙苏娟，白娇红，李园园

（1.河南科技大学第一附属医院 检验科，河南 洛阳471000 2.洛阳市妇女儿童保健中心 检验科，河南 洛阳 471000）

支原体肺炎是由肺炎支原体感染引起的一种流行性疾病，多发于儿童，临表现为发热、咳嗽、咽痛、头痛等症状［1］。肺炎支原体主要通过呼吸道飞沫方式传播，具有一定的潜伏性，在早期并无明显临床症状，导致早期诊断难度较大［2］。实验室检查是目前临床检测早期肺炎支原体感染的主要手段，以往，临床常采用冷凝集试验（CAT）进行诊断，但其操作较为复杂。而酶联免疫吸附法（ELISA）为近年来实验室检查常用的检测方法之一，具有操作简单、检测时间短等优点。基于此，本研究选旨在分析ELISA 在早期肺炎支原体感染诊断中的应用价值，以为临床提供参考。具体信息如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018 年2 月至2019 年12 月河南科技大学第一附属医院收治的80 例疑似为肺炎支原体感染患儿作为研究对象，其中男37 例，女43 例；年龄2～8 岁，平均（5.36±1.21）岁；病程4～10 d，平均（7.02±2.05）d。本研究经河南科技大学第一附属医院医学伦理委员会批准。

1.2 入选标准

纳入标准：①X 线检查显示肺部存在片状阴影；②支原体培养阳性，白细胞计数（WBC）≥12.0×109，红细胞沉降率（ESR）≥15 mm/h；③均行CAT 及ELISA 两种方法检测患者；④患儿监护人签署知情同意书。排除标准：①伴有先天性心脏病者；②凝血功能障碍者；③过敏体质者；④合并传染性疾病者；⑤合并肝、肾等器官功能衰竭者。

1.3 方法

采集样本：采集患儿空腹静脉血2 mL，以3 000 r/min 转速离心10 min，取上层清液保存待检。检测方法：①ELISA：使用上海市海天医疗器械生物有限公司生产的肺炎支原体免疫球蛋白M（IgM）抗体试剂盒进行检测，检测的具体步骤严格按照说明进行，若患儿血清标本吸光度值与标准品的吸光度值的比值≥1.1，即可判定为阳性。②CAT：常温下，使用患儿自身红细胞与5 倍0.9%氯化钠溶液配置人红细胞悬液，取相同10 支试管，分别标上1～10 号，分别加入0.1 mL 血清与0.9%氯化钠溶液，并摇晃使两者融合，然后吸取第1 支试管0.1 mL 放置第2 支试管中，按照此方法加至第9 支试管，以第10 支试管为对照，分别在10 支试管中加入0.1 mL 配置好的红细胞悬液，放置在4℃下冷置60 min，若出现红细胞凝集，立即加入37℃水浴中，若凝集消失即可判定为阳性，滴度>1∶32 即有参考意义。

1.4 评价指标

以痰培养检查结果作为金标准，记录ELISA与CAT 检测结果，并计算ELISA 与CAT 诊断该疾病的准确度［（a+b）/n］、灵敏度［a/（a+c）］、特异度［d/（b+d）］、阳性预测值［a/（a+b）］、阴性预测值［d/（c+d）］；其中a 为ELISA 与CAT 检测结果与痰培养均为阳性；b 为ELISA 与CAT 检测结果为阳性，痰培养为阴性；c 为ELISA与CAT 检测结果为阴性，痰培养为阳性；d 为ELISA 与CAT 检测结果与痰培养均为阴性；n为总例数。

1.5 统计学方法

采用SPSS 24.0 软件进行数据处理，计数资料用百分率（%）表示，采用χ2检验，采用Kappa一致性检验分析CAT、ELISA 诊断肺炎支原体感染与痰培养的一致性，Kappa≥0.74 提示一致性好，0.4～0.74 提示一致性一般，<0.4 提示一致性差。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ELISA 诊断早期肺炎支原体感染的效能分析

本研究80 例患儿中，有58 例痰培养结果为阳性，占比72.50%（58/80），22 例痰培养结果为阴性，占比27.50%（22/80）。CAT 诊断早期肺炎支原体感染的准确度、灵敏度、特异度，阳性预测值、阴性预测值分别为81.25%（65/80）、86.21%（50/58）、68.18%（15/22）、87.72%（50/57）、65.22%（15/23）。ELISA 诊断早期肺炎支原体感染的准确度、灵敏度、特异度，阳性预测值、阴性预测值分别为91.25%（73/80）、96.55%（56/58）、77.27%（17/22）、91.80%（56/61）、89.47%（17/19），高于CAT。见表1。

2.2 一致性分析

经Kappa 一致性检验结果显示，CAT 诊断肺炎支原体感染与痰培养的一致性一般，Kappa 值为0.536；ELISA 诊断肺炎支原体感染与痰培养的一致性较好，Kappa 值为0.771，优于CAT。

3 讨论

肺炎支原体通过空气中的飞沫传播后可侵入患儿呼吸道黏膜，并大量增殖，引起支气管红细胞增多、局部水肿，进而发展为支原体肺炎［3］。支原体肺炎不仅会对患儿呼吸系统造成损伤，且会引起肾炎、心肌炎、脑膜炎等其他系统并发症，对患儿生命健康造成一定影响，若未得到及时治疗，将严重影响患儿预后［4］。因此，寻找准确、快捷的方式诊断该疾病具有重要意义。

临床用于肺炎支原体感染辅助诊断的监测方法较多，包括明胶颗粒凝集法、CAT、ELISA、金标斑点法、支原体培养法等［5］。其中明胶颗粒凝集法诊断肺炎支原体感染的敏感性最高，且检测方法简单，不需使用仪器设备，但该方法检测试剂成本较高，无法在临床得到广泛推广及应用；金标斑点法敏感度较低，临床很少采用此方法，痰培养为诊断肺炎支原体感染的金标准，但由于其培养条件苛刻，且培养时间较长（约为6 周），而患儿的病情需及时治疗，导致无法尽早诊断肺炎支原体感染，导致临床早期快速鉴别诊断受限［6-7］。而CAT、ELISA 为目前临床诊断肺炎支原体感染常用的两种方法，具有检测时间短、操作简单特点，但临床对于哪种方法更适合在临床推广尚存在一定争议［8］。本研究结果显示，ELISA诊断肺炎支原体感染的准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于CAT，且经一致性检验结果显示，ELISA 诊断肺炎支原体感染与痰培养的一致性优于CAT，提示ELISA 可作为临床诊断早期肺炎支原体感染的首选方式，以提高诊断准确度，降低漏诊、误诊率。

综上所述，ELISA 检测诊断早期肺炎支原体感染具有较高的临床价值，可为临床早期治疗提供可靠的参考依据。