一起犬细小病毒病的诊断

钟远宣，尹丽萍

（1.广西平乐县大发瑶族乡水产畜牧兽医站，广西 平乐 542403；2.广西平乐县动物疫病预防控制中心 广西 平乐）

犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canine Parvovirus，CPV)引起的一种急性传染病，是危害犬类的最主要的烈性传染病之一。健康犬经消化道感染病毒后，病毒主要攻击两种细胞，一种是肠上皮细胞，一种是心肌细胞，临床上分别表现胃肠道症状和心肌炎症状，心肌炎以幼犬多见，这两种类型均对养犬业造成巨大的经济损失。当前有部分养犬场对该病重视不够，对犬细小病毒的免疫预防工作处于真空状态，容易引起犬场暴发细小病毒病，造成严重的经济损失。

2019年5 月，桂林市所辖某养殖户所养147头7月龄犬有部分表现食欲异常，据畜主介绍发病初期精神沉郁，厌食，偶见发热，排软便或轻微呕吐，3d后发展成为频繁呕吐和剧烈腹泻。起初粪便呈灰色，黄色或乳白色，带果冻状粘液，其后排出恶臭的酱油样或番茄汁样血便。第5天病犬表现出脱水，消瘦，眼窝深陷，被毛凌乱，皮肤无弹性，耳鼻，四肢发凉，精神高度沉郁，休克，死亡。发病第6天，死亡病犬34只。

1 临床症状

部分病犬病初食欲减退，体温高达40.5℃，食欲不振的次天有些病犬出现呕吐，呕吐物呈黄色液体并有少量白色泡沫，个别出现排恶臭红色混有黏液的稀薄粪便，粪便带有腥臭味，第3天病犬站立不稳，四肢无力，皮肤干燥，缺乏弹性，消瘦较快。

2 病理变化

对急性死亡的11只病犬进行解剖发现有部分犬只心脏呈现灰黄色并有明显肿大，表面有出血斑，触摸心脏质地柔软；肝脏呈现黄褐色并有局部性坏死，包膜紧张；胃黏膜坏死并有少量黏液，小肠壁较正常的厚，肠腔内有紫红色粥样内容物并有血液块。

3 实验室诊断

3.1 血凝试验(HA) （1）采集26只病死犬的肝脏、脾脏收集于26个无菌培养皿保存内待用，在经过消毒处理过的匀浆机放入与肝脏、脾脏相同体积的生理盐水进行匀浆，将经过处理的匀浆回收到离心管中，置于离心机中3000g离心15min，收集上清液待检。（2）在96孔“V”型微量反应板从左至右每孔加100µl生理盐水。（3）用移液枪取50µl处理过的待检上清液加入96孔“V”型微量反应板左侧的第一孔，混合均匀后，吸50µl至第二孔，继续混匀后，吸50µl至第3孔，依次倍比稀释，至第11孔，吸弃50µl，12孔作为对照。（4）在96孔“V”型微量反应板从左至右依次在每个孔内加入50µl，1%猪红细胞悬液置于微量混合器上振荡，以便猪红血球与病毒充分混合均匀，然后将“V”型微量反应板置于37℃恒温箱中保温30min，取出观察结果。（5）根据观察发现“V”型微量反应板100%红血球凝集出现在第9孔即血凝试验HA血凝价为1:512。

3.2 血凝抑制试验(HI) （1）依据血凝试验结果，配成4个血凝单位病毒即1:128。（2）在96孔“V”型微量反应板第1-10孔各加入50µl生理盐水，第11、12孔分别加入50µl，4单位CPV细胞病毒培养液和抗犬细小病毒阳性血清对照。（3）在第1孔加入50µl犬细小病毒阳性血清，混合均匀，吸50µl至第2孔，依次倍比稀释至第10孔，吸弃50µl。（4）在第1孔至11孔各加50µl，4单位待测病毒液，第12孔加50µl血清，混合均匀，置于37℃温箱反应30min。（5）结果判定：26份检测样品的HI抗体滴度＞1:1024

4 结果分析

（1）结合临床症状、解剖病理变化及实验室血凝抑制试验结果，该养犬场的发病犬只感染犬细小病毒，诊断为犬细小病毒病。（2）通过对养殖场进行流行病学调查，该起犬细小病毒病发生的主要原因是由于养殖场主没有对所饲养的犬只进行过犬细小病毒疫苗免疫。（3）犬细小病毒病是由细小病毒引起的急性传染性疫病，预防该病的主要手段是要预防为主，对出生50日龄的健康犬只用犬五联苗进行免疫接种，初次免疫后的第14天应再次加强免疫注射一次犬五联疫苗，以便使犬只产生可靠的免疫效果。（4）对发病犬只及时隔离治疗，用犬细小病毒高免血清进行静脉注射，对栏舍及活动场用烧碱进行全面消毒，杀灭病犬排出的病毒。