兰屿肉桂组织培养技术初探

陈海霞

摘 要 兰屿肉桂既是优美的盆栽观叶植物，也是重要的园林绿化植物。试验以兰屿肉桂的带芽茎段为外植体，研究了不同外源激素配比对兰屿肉桂组织培养的影响。结果表明：带芽茎段诱导腋芽较适宜的培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1 +NAA 0.10 mg·L-1，诱导率为87.5%;适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1，增殖系数为3.15。

关键词 兰屿肉桂;组织培养;外植体

中图分类号：S573.9 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.30.072兰屿肉桂（Cinnamomum kotoense Kanehira et Sasaki）

又名红头屿肉桂、大叶肉桂、台湾肉桂、平安树，为樟科樟属的常绿乔木，主要分布于我国台湾地区南部（兰屿）[1]，在我国南方广泛栽培。兰屿肉桂树型端庄，叶色亮绿，全株能散发清新香气，净化空气，有益于人身心健康，既是理想的室内盆栽观叶植物，又是重要的城市绿化景观植物，具有十分广阔的市场前景。兰屿肉桂传统的繁殖方法是采用播种育苗[2]，关于其组织培养的研究还未见报道。利用现代植物组织培养技术，可加快种苗繁育速度，实现种苗的工厂化生产，给经营者带来丰厚的经济效益。本研究以兰屿肉桂的茎段为外植体，探讨了不同外源激素配比对其离体培养的影响，填补了兰屿肉桂组织培养研究的空白，对兰屿肉桂工厂化育苗具有一定意义。

1 材料与方法

1.1 试验地点与材料

试验在咸宁市园林科学研究所进行，供试材料来自咸宁职业技术学院园艺实训基地生长健壮的兰屿肉桂植株。从采样前60 d开始，每7 d对植株喷施噁霉灵的500倍液1次。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体的处理

选取生长健壮、无病虫害的嫩枝为外植体，去除叶片，先用洗洁净溶液浸泡10～20 min，再在流水下冲洗

30 min，放置在干净的烧杯中备用。在超净工作台上将预处理好的外植体先用75%的酒精浸泡30 s，无菌水漂洗3次;再用0.1%的升汞浸泡10 min，无菌水漂洗7～8次[3]。然后将外植体放在无菌滤纸上吸干表面水分，切割成1.5 cm左右带芽的茎段，接种于诱导培养基中。

1.2.2 外植体的诱导

诱导培养基以MS为基本培养基，添加6-BA

（0.5 mg·L-1、1.0 mg·L-1、1.5 mg·L-1）、NAA（0.05 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.15 mg·L-1），共设计9个处理，试验不同浓度的6-BA和NAA组合对兰屿肉桂诱导培养的影响。接种45 d后，统计腋芽诱导率。每个处理的培养基中均添加30 g·L-1的蔗糖、7 g·L-1的琼脂和2 g·L-1的活性炭。

1.2.2 增殖培养

将初代培养诱导成功的无菌苗切割成2.0 cm左右带芽的茎段，接种到继代培养基上进行增殖培养。增殖培养基以MS为基本培养基，添加6-BA（1.0 mg·L-1、1.5 mg·L-1、2.0 mg·L-1）、NAA（0.10 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.20 mg·L-1），共设计9个处理，每个处理的培养基中均添加30 g·L-1的蔗糖、7 g·L-1的琼脂、2 g·L-1的活性炭。继代培养45 d后，统计增殖芽数，计算增殖系数。

1.3 培养条件

所有培养基pH值均为5.8。培养温度（25±2）℃，光照强度1 000～2 000 lx，光照时间13 h·d-1。

2 结果与分析

2.1 不同培养基对兰屿肉桂诱导培养的影响

在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素对侧芽的萌发生长起着非常重要的作用。由表1可知，兰屿肉桂茎段诱导培养中，在试验浓度范围内，随着6-BA浓度的增大，外植体诱导率上升。当6-BA浓度为1.5 mg·L-1、NAA浓度为0.10 mg·L-1时效果最好，诱导率达87.5%，明显高于其他处理。因此，兰屿肉桂茎段诱导培养较适宜的培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1。

2.2 不同培養基对兰屿肉桂增殖培养的影响

适宜的外源激素配比可以促进中间繁殖体系的增殖，提高芽的增殖速度。由表2可知，在添加有不同激素配比的培养基中，增殖情况有一定的差异。在试验浓度范围内，当NAA浓度不变时，随着6-BA浓度的增大，增殖系数呈先升高后降低的趋势。当6-BA浓度为1.5 mg·L-1、NAA浓度为0.10 mg·L-1时，增殖系数最大为3.15，明显高于其他激素配比。因此，兰屿肉桂适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1。

3 结论

外源激素是培养基中的关键物质，对植物组织培养起着决定性作用。对于不同的培养材料和培养目的，不同种类、浓度和配比的外源激素的效果存在很大差异。本研究以兰屿肉桂的茎段为外植体，研究不同浓度的6-BA和NAA配比对其茎段培养的影响。结果表明：腋芽诱导培养、继代增殖培养均可成功操作;得到较适宜的诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1，诱导率为87.5%;继代增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1，增殖系数为3.15。

参考文献：

[1] 中国植物志第31卷[M].北京：科学出版社，1982.

[2] 刘文，曾晓辉，邓美红，等.兰屿肉桂露地种植技术规程[J].安徽农业科学，2016，44（28）：154-156.

[3] 刘颖嘉，韩艺花，丛中笑，等.肉桂组织快繁技术——外植体消毒及褐化控制的研究[J].现代园艺，2014

（11）：15-16.

（责任编辑：赵中正）