动物免疫抗体检测进行采血的最佳时间节点

卢智文 樵英权

（1.陕西省商洛市商州区畜牧兽医中心，陕西商州 726000；2.陕西省商洛市商州区杨斜镇农业综合服务站 陕西商州 726000）

实际上，动物免疫抗体检测工作，不仅仅是评价动物防疫工作，更重要的是为畜禽进行补免和开展各项重大动物疫病防控措施提供科学依据，同时为业务主管部门科学地制定重大动物疫病预防控制规划和疫病预警，及时开展动物疫病流行病学调查等等。

猪瘟、猪蓝耳病、牲畜口蹄疫、高致病性禽流感、羊小反刍兽疫目前是陕西省规定免疫的五类动物疫病（牲畜口蹄疫、高致病性禽流感、羊小反刍兽疫属于强制免疫病种）。平时在动物免疫后抗体检测工作中，如何确保动物免疫抗体水平达标成为所有养殖场及基层镇（办）村组动物防疫人员的担忧——动物明明做过免疫注射了，免疫抗体怎么就没有产生呢？先假定动物免疫注射是成功的，笔者把2015-2019年商州区动物免疫抗体集中检测结果数据分为7组进行统计：A组（猪瘟）B组（猪O型口蹄疫）C组（牛O型口蹄疫）D组（羊O型口蹄疫）E组（禽流感）F组（鸡新城疫）H组（小反兽疫），每个组检测数据整理后通过2个统计图反映。

1 材料与方法

1.1 检测试剂

猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒、O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试剂盒均系中国农业科学院兰州兽医研究所生产。禽流感试剂盒、鸡新城疫试剂盒均系青岛易邦生物工程有限公司生产；小反兽疫阻断ELISA 检测试剂盒系青岛立见诊断技术发展中心生产。

1.2 血清样品

检测每组血清样品来自个方面：一是镇办送检的防疫考核样品，动物免疫次数与动物日龄未知；二是商州区动物程序化免疫示范养殖场样品，动物免疫时间、次数、日龄档案完整清楚，样品是试验人员亲自采集，通过合同保证试验动物免疫抗体，试验费3000～5000元/场年，试验养殖场按照合同规定对动物免疫。

1.3 检测方法

每组检测项目严格按照各自对应检测试剂盒所附说明书进行操作。

1.4 检测统计结果

经过2015～2019年商州区动物免疫抗体集中检测结果可以看出，鸡新城疫、猪瘟、高致病性禽流感、O型口蹄疫、羊小反刍兽疫疫苗首次免疫后22～28d采样抗体合格率均达到70%以上，最低70%，最高90%，但抗体效价均值为合格以上，稍超过抗体合格标准。二次加强免疫后，抗体合格率可达90%以上，较首免提高20个百分点，抗体效价可达最高值，较首免提高3个滴度以上。其中10月（93%）和4月（100%）二免后鸡新城疫、猪瘟、高致病性禽流感、口蹄疫抗体水平达到最高值。

2 统计结果分析

通过检测结果数据统计就评价动物强制免疫病种采血时机作出如下分析介绍，仅供畜牧同行参考。

一免，通常也称为首免；决定首免的时间有两种，一是养殖场户依据本地该类动物流行病状况、本场动物母源抗体水平决定第一次免疫接种某种动物疫苗的时间（主动安排，这是最合理的）；二是散养户饲养的动物第一次接受村级动物防疫员到户免疫时间（政府每年规定的集中免疫时间，这是被动的，不得已而为之）。动物免疫学上把第一针和第二针疫苗称为致敏接种，使接种者产生抗体，第三针称加强免疫，使产生的抗体效价更高，预防效果更为持久。一免就是为了打好基础。

基础免疫是指预防接种过程中的第一次免疫接种或第一程免疫接种。活疫（菌）苗初次免疫，只需接种一次，免疫效果好而持久（有一定危险比如散毒）如（我们日常使用的猪瘟、鸡新城疫、小反刍兽疫、狂犬病疫苗）；死疫（菌）苗及类毒素初次免疫，抗体出现慢，效果低，持续时间短；多次免疫后效果好，持续时间长，安全、有效（我们日常使用的禽流感、口蹄疫灭活油乳剂疫苗就属于后一类）。

至少应在一定时间内连续免疫2次～3次，称为第一程基础免疫。为保持机体免疫力，常需在一定时间后进行加强免疫（复种）。这也是我们日常检测中，蛋鸡、牛等饲养周期长的动物抗体检测合格率高而且平均的原因。

2.1 猪瘟免疫后抗体检测采血选择哪个阶段的猪

阳性率：猪瘟抗体（阻断率（Blocking）≥40%，判为阳性结果；30%＜Blocking＜40%，判为可疑结果；Blocking≤30%，判为阴性结果）。

免疫合格率：阻断率（Blocking）≥50%的，即为免疫合格（断奶仔猪猪瘟第一次免疫受母源抗体干扰，≥30%可视为合格）。免疫合格的比例即为免疫合格率。大家应该知道，兽医实验室检测人员不会考虑你提供的检测血清来自于那头猪，所以断奶仔猪的血清你就不用选择送检了！而且8周龄前仔猪免疫机制并不完善，母源抗体水平不一致、断奶、转圈等影响因素太多，的确不适合做抗体检测送检对象。自己多次实践证明，首免后猪瘟抗体往往呈下降趋势，间隔一月后二免，二免后30d左右为最佳采集时间段。此时最小猪只应该≥90日龄。

2.2 猪口蹄疫免疫后抗体检测采血选择哪个阶段的猪

根据猪口蹄疫O型灭活疫苗的说明书，①不建议给8周龄内的仔猪和妊娠母猪前后期接种口蹄疫疫苗；②接种后2～3周才产生免疫抗体；③免疫期6个月；因此血清采集的最佳时间应该在3月龄之后，免疫三周后的猪身上采集，并不超过免疫时间6个月内。

根据实验室检测结果分析发现，猪只如果从需要让同时检测上述二种动物疫苗抗体情况，如果想保证抗体合格率，需要采集至100～150日龄之间的猪最好，太小猪只有可能没有加强免疫无法保证抗体合格率，猪只太大，除非再次加强免疫，否则部分免疫病种超过有效保护期。

2.3 牛、羊口蹄疫免疫后抗体检测采血时间段

正常情况下，政府提供疫苗每年根据实际情况会选择不同类型和毒株，口蹄疫疫苗主要包括O型、A型、亚洲I型三种类别（未论毒株）。通常又会选择不同组合成二价、三价疫苗。如：口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗（OHM/02株+AKT-Ⅲ）就是今年提供的二价疫苗，实际可以提供给牛、羊使用，牛2ML/头，羊1ML/头；因上级要求仅用于牛，另选单价苗（口蹄疫O型灭和疫苗（OS株））给羊使用。自己仅从抗体角度分析，不涉及疫苗选用之缘由。所以从抗体检测目的（免疫效果评价）出发，首先必须按照规定选择使用疫苗。

口蹄疫免疫，首免后2周产生抗体，3周后70%合格，4周后可达100%合格；但是其中使用多价疫苗的，不同型会产生差异，并且会受到免疫次数影响。比如春防曾经免疫过某单价苗（如O型），秋防是使用了二价苗（如O、A型），就会出现两次免疫中相同的（O型）迅速产生抗体并且很高，而其中的A型就相当于首免，产生效果远不及同时免疫的O型。

动物免疫学上把第一针和第二针疫苗称为致敏接种，使接种者产生抗体，第三针称加强免疫，使产生的抗体效价更高，预防效果更为持久。根据调查了解分析，牛因为饲养周期长，如连续两年（或更多年份）接种过疫苗注射，那抗体产生的效果就会十分理想。这也是羊群体大、周期短导致免疫后抗体检测效果相对较差的原因之一。

通过检测结果数据汇总分析，牛、羊免疫后抗体检测目的的采血时间段应该是，加强免疫1月后至6月内。

2.4 羊小反刍兽疫免疫后抗体检测采血时间段

山羊接种小反刍兽疫疫苗系活疫苗，产生抗体速度快，1周即有抗体产生，3周后检测抗体可获得较高抗体滴度。根据疫苗使用说明书，保护期暂定3年。这样一来，多数养殖场在羔羊（断奶后）阶段接种一次即可基本保护其一生。但从抗体检测达标目的来说，考虑为获得较高抗体滴度，应该参考其他动物活疫苗免疫抗体涨消之规律，建议采集当季免疫后1月～6月内的羊只血液送检方可确保有效。

我们根据实验室检测结果数据统计分析分析，如果仅从牛、羊中选择一种作为评价抗体检测之用，牛口蹄疫抗体合格率概率大于羊；但是如果需要同步检测小反，加上时常在开展的布病排查检测工作，山羊血液采集工作比牛的更多、更方便；这样的检测结果也更科学！通过检测数据统计结果反映采血时间段在免疫1个月之后、6个月之前最好。

2.5 鸡新城疫免疫后抗体检测采集哪个时间阶段

通常情况下，我们只提供新城疫La Sota株疫苗，一般在雏鸡7日龄首免，间隔2～3周加强免疫一次。免疫后一周可产生抗体。日常管理中，多数养殖场采取二免后，每45～60d接种弱毒苗一次的办法，可有效保护鸡只。如此推算，鸡新城疫免疫后2周～8周之间采血检测可以获得比较理想的抗体检测成绩。

2.6 禽流感免疫后抗体检测采集哪个时间阶段

目前我们提供的有新城疫+禽流感二联冻干苗（H5），禽流感H5+H7油苗两种疫苗，一般检测抗体需要查H5/H7两种毒株的，所以需要接种油苗。通过查询得知，一般在鸡只两周龄接种禽流感油苗，禽流感（H5+H7）二价灭活疫苗在免后14d可产生较高的抗体、35d达到抗体峰值，到63d仍维持较高的抗体水平，完全可以为家禽提供良好的免疫保护。蛋鸡一般会在开产前再加强免疫一次。据此分析，禽流感抗体检测应该在鸡只免疫后35～120d间开展采样检测。

我们根据实验室检测结果数据统计分析发现，鸡只如果需要检测新城疫和禽流感两种疫苗免疫情况，一般应该采集免疫两种疫苗接种后35～60日之间的鸡只（如果超过60d，新城疫需要加强免疫，当然使用过新城疫油苗的除外）。