ATX-LPA 和MAPK 信号通路与类风湿性关节炎临床征象的关系研究

2020-12-23马衍慧章建峰刘丽敏

浙江中西医结合杂志 2020年12期

马衍慧章建峰刘丽敏

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）临床常见，可累及全身多个关节及其周围组织，临床表现为关节肿胀、疼痛、活动受限，患者生存质量明显降低[1-2]。RA 发病机制复杂，涉及免疫、炎症等多个环节，受到多个免疫炎症相关信号通路的影响[3]。自分泌运动因子-溶血磷脂酸（ATX-LPA）是与机体免疫相关的信号通路，丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路与关节炎症密切相关[4-5]。本研究探讨ATX-LPA和MAPK 信号通路与RA 临床征象的关系，旨在为通过ATX-LPA 和MAPK 信号通路干预进行RA 防治提供证据，报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料前瞻性连续选取2017 年1 月—2018 年3 月浙江中医药大学附属湖州中医院收治的RA[6]患者72 例为RA 组，并以同期30 例膝骨关节炎（OA）[7]患者为OA 组，以30 名健康志愿者为健康对照组。本研究经医院伦理委员会审核通过，符合《赫尔辛基宣言》伦理原则，三组研究对象均签署知情同意书。

1.2 纳入标准 RA 组、OA 组患者均根据影像学检查、临床症状、实验室检查等确诊，健康对照组无急慢性病症；三组研究对象在3 个月内未使用糖皮质激素；性别不限，年龄均在18 周岁以上。

1.3 排除标准合并其他骨关节疾病、其他免疫系统疾病、严重外伤感染者；合并全身重要脏器功能障碍者；哺乳期或孕期女性；因各类原因无法配合完成相关治疗或检查检测者等。

2 方法

2.1 观察指标及方法（1）RA 组、OA 组治疗前，健康对照组入组次日取空腹静脉血5mL，置于肝素抗凝管中，上高速离心机，以5000r/min 转速、3cm 半径在4℃环境中离心处理10min，待分层后取上层血清冷藏待测。ELISA 法检测三组血清ATX、LPA、MAPK、类风湿因子（RF）表达水平，检测试剂盒（批号2017006、20160025、20170003、20160442）均购自上海恒远生物科技有限公司，检测仪器为美国Awareness STAT FAX2100 酶标仪，具体检测按照仪器和试剂盒说明书进行。（2）采用疼痛视觉模拟评分（VAS）[8]分析关节疼痛程度。（3）采用DAS28 评分分析RA 组疾病活动度，DAS28 评分≤5.1 分为病情低中度活动，DAS28 评分＞5.1 分为病情高度活动[9]。比较RA 组不同病情活动情况患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 评分。

2.2 统计学方法应用SPSS 24.0 统计软件；计量资料以均数±标准差（）表示，多组比较采用方差分析，两组比较采用t 检验；计数资料比较采用卡方检验；相关性分析采用Pearson 线性相关法；P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 三组研究对象基线资料比较三组研究对象基线资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，见表1。

表1 三组研究对象基线资料比较

3.2 三组研究对象血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平比较与健康对照组比较，RA 组血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平均升高，OA 组血清MAPK 水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与OA 组比较，RA组血清ATX、LPA、RF 水平均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 三组研究对象血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平比较（）

注：RA 为类风湿性关节炎；OA 为膝骨关节炎；ATX 为自分泌运动因子；LPA 为溶血磷脂酸；MAPK 为丝裂原活化蛋白激酶；RF 为类风湿因子；与健康对照组比较，aP＜0.05；与OA 组比较，bP＜0.05

3.3 RA 组不同病情活动程度患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 评分比较 RA 组72 例中，病情低中度活动患者27 例，病情高度活动患者45例。与病情低中度活动患者比较，高度活动患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平以及VAS 评分均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

3.4 RA 组患者血清ATX、LPA、MAPK 水平与血清RF 水平、DAS28 评分以及VAS 评分相关性分析Pearson 线性相关分析结果显示，RA 组血清ATX、LPA、MAPK 水平与血清RF 水平、DAS28 评分及VAS 评分均呈正相关（ATX：r=0.796、0.889、0.886；LPA：r=0.843、0.875、0.898；MAPK：r=0.858、0.752、0.879，P＜0.05）。

4 讨论

RA 临床主要表现为关节肿胀疼痛以及关节活动受限，甚至残疾，严重影响患者生存质量[10-11]。RA的发生发展与多个病理过程及其相关信号通路有关[12-13]。ATX 为分泌型糖蛋白，可将溶血磷脂酸胆碱水解为LPA，LPA 参与细胞增殖、迁移等生物学效应，ATX-LPA 与肿瘤浸润转移、血管发育、神经系统发育、神经病理性疼痛和瘙痒、肥胖、糖尿病等均密切相关[14-15]。本研究显示，RA 患者血清ATX、LPA、RF表达水平均明显高于OA 患者及健康人群（P＜0.05），提示ATX-LPA 信号通路与RA 发生发展可能相关。本研究中病情高度活动的RA 患者血清ATX、LPA、RF 水平以及VAS 评分均高于病情低中度活动患者（P 均＜0.05），进一步Pearson 线性相关分析显示，RA患者血清ATX、LPA 水平与病情指标血清RF 水平、疼痛评价指标VAS 评分以及疾病活动度DAS28 评分均密切相关（P 均＜0.05），认为ATX-LPA 信号通路参与RA 发生发展，可作为其防治干预靶点。

MAPK 为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族，是重要的激酶传导信号通路，多项研究证实其与软骨细胞损伤和凋亡相关，且可通过影响多条信号通路而加速骨关节炎的进展[16-18]。本研究结果显示，RA 患者血清MAPK 表达水平与OA 患者无明显差异，而RA与OA 患者血清MAPK 表达水平均明显高于健康人群（P＜0.05），提示MAPK 亦可能参与RA 和OA 发生发展。本研究中病情高度活动的RA 患者血清MAPK、RF 水平以及VAS 评分均高于病情低中度活动患者（P＜0.05），Pearson 线性相关分析结果显示，RA 患者的血清MAPK 水平与与RF、VAS 评分及DAS28 评分均密切相关（P＜0.05），认为MAPK 信号通路参与RA 发生发展，可能作为其防治干预靶点。ATX-LPA 信号通路、MAPK 信号通路抑制及其相关药物开发应用可能有助于控制RA 患者疼痛症状和病情，提高治疗效果。

表3 RA 组不同病情活动程度患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 评分比较（）