血型鉴定与交叉配血错误干扰及避免方法

战振宇，李晓阳

（吉林通化市第二人民医院 检验科，吉林 通化）

0 引言

在临床上，许多疾病的救治过程中，有一部分患者可能出现失血过多而发生休克的现象，出现这种现象的患者，往往需要进行输血治疗[1]。在患者的输血临床治疗中，血型鉴定和交叉配血都是十分重要的步骤，实验进行的情况会对进行输血治疗患者的生命安全造成直接影响[2]。如，在受患者自身冷凝集素增加的影响，会对患者的ABO血型抗体的鉴定以及Rh血型抗体的鉴定产生影响，还有相关研究表明，患者体内冷凝集素的增加会对血型鉴定与交叉配血实验的结果造成较大的影响[3]。总之，临床上对血型鉴定与交叉配血的干扰因素较多，应采取对应的措施避免干扰的发生，为患者的治疗提供更加安全可靠的保障。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院检查的受血者或供血者652例进行分析，其中男性 304例，女性 348例，年龄为 20～82岁，平均（46.27±1.68）岁。本次实验的所有参与者均无严重的心、肾等重要器质病变，均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 试剂

ABO、RhO血型定性检测卡（长春博迅生物试剂有限公司）；抗人球蛋白检测卡（长春博迅生物试剂有限公司）。

1.2.2 血型鉴定

血型的鉴定主要就是鉴定ABO血型，即为ABH血型抗原检测。是根据各血型中所含抗原的不同进行区分的，所谓的A型血则是指红细胞中含有A抗原，B型则含有B抗原，而同时含有A抗原与B抗原的即为AB血型，若在血液红细胞中这两种抗原都未检测出，而含H抗原，则血型为O型血。进行血型鉴定主要是为临床的输血工作做准备。在为患者进行输血前，应当选择相同血型作为患者的供血者，在进行交叉配血实验证实后，才能为患者开展输血操作，血型鉴定方法如下。

（1）将微柱凝胶试剂卡的六支凝胶管标号；（2）将待检者0.5%～0.8%红细胞悬液分别加入第一至第四支微管中，每管50 μL；（3）将待检者血清分别加入第五和第六支微管中，每管50 μL；（4）将已知A型和B型红细胞0.5%～0.8%浓度悬液分别加入第五和第六微管中，每管50 μL；（5）即刻使用专用离心机离心 5 min，900 rpm 2 min，1500 rpm 3 min，取出用肉眼判定结果。

1.2.3 交叉配血

交叉配血是临床输血过程中的重要依据之一，在两侧血液不凝集的情况下即可为患者开展输血工作。交叉配血实验即将受血者的红细胞与血清、供血者的血清及红细胞进行混合后，对两组血液的混合进行观察，是否发生凝集反应。若发生凝集现象，则不能为患者进行输血，若出现次侧凝集现象，若患者需要立即进行输血，可以给予患者少量输血。交叉配血实验是以血型鉴定为基础，进行交叉配血实验，确认受血者与供血者间的血型无不合抗原-抗体反应的存在，为患者的输血安全性提供重要保障。由于输血会直接影响患者的生命安全，因此，只能在确认受血者与供血者的血型一致后才可进行交叉配血。此外，进行交叉配血实验不能仅仅采用盐水介质进行配血，即使实验室的条件较差也需在进行胶体介质配血后才能使不完全抗体存在的危害有所减少，以最大化地减少由输血导致的不良反应。交叉配血实验的方式如下。

（1）将受血者与供血者的红细胞和血清（或血浆）分离。（2）生理盐水分别将受血者血清和供血者红细胞配成0.5%～0.8%红细胞悬液。（3）将供血者的红细胞悬液50 μL与受血者血清（或血浆）50 μL加入主侧凝胶中。受血者红细胞悬液50 μL与供血者血清（或血浆）50 μL加入次侧凝胶管中。（4）将检测卡置于37 ℃孵育器中15 min。即刻使用专用离心机离心 5 min（900 rpm 2 min，1500 rpm 3 min），取出，肉眼判定结果。

2 结果

对参与本次研究的所有调查者进行交叉配血及血型鉴定，仅出现了2例干扰事件，对出现的这2例错误干扰问题进行分析探讨，并针对这种情况，提出了相应的对策。发现导致错误干扰的主要因素包括了假阴性反应、自身抗体免疫增高、假阳性反应、冷自身抗体增高及责任性错误等方面。

3 讨论

3.1 假阳性反应

①形成缗钱状。当血清在37 ℃的室温下进行水浴时，可能导致红细胞凝集情况发生，常见于巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤等常规病理血清中。可通过洗涤红细胞的方式来克服这种情况。在完成洗涤后，滴入1滴混合，应用高倍镜观察结果[4]。②低温凝集。这种情况是对冷凝集素效价过高导致的，可通过采用温度为37 ℃的生理盐水将红细胞洗涤的方式排除该干扰因素[5]。③类B抗原。若患者本身受到了革兰氏阴性杆菌的感染，就会引发抗红细胞发生凝集。可通过采用标准的红细胞标本对血清中的抗体、唾液型物质进行测量。④T凝集。这种凝集反应是血清中抗体受到细菌污染而导致的，针对这种情况应当对标准血清中的T冷凝特异性感染进行定期检查，检查红细胞凝集现象及污染情况，避免标准血清受到污染。解决措施如下：选择AB血型的血清样本与标准红细胞样本进行凝集试验，对凝集现象进行证实[6]。采用标准的红细胞抗体血清，为患者开展唾液吸收抑制试验或红细胞的吸收释放试验，最后在为患者输血时，将O型血输入。⑤患者抗体因素。在本身患有免疫性疾病的患者血清及红细胞中，有着自身抗体的存在，直接对患者红细胞产生影响，导致凝集现象的出现。可采用温水洗涤红血细胞的方式克服这种情况，做抗球蛋白血[7]。

3.2 假阴性

假阴性是应当发生凝集现象而未发生的情况。①弱抗原性。在老年人或新生儿的红细胞、标本放置时间过长容易导致该种情况的发生。困扰通过坚持正反定型的方式避免差错的发生。②血清效价标准过低，可能是采集的标本时间过长或储存方式不当。应采用有效价格血清，将正反定型流程进行完善。③缺乏合适的红细胞悬液浓度。应在配置悬液时注意生理盐水与标本的比例，直至调配至标准浓度。④混合物不符标准，应将实验流程进行严格规范[8]。

3.3 操作者因素

导致错误干扰情况发生的主要原因之一即为操作者缺乏较强的责任心。如在操作过程中忘记加入血清或抗体、离心速度掌握不合适、试剂选择错误等。根据这种情况，应当加强对相关操作者综合素质的培养，提升其责任心，严格规范其操作标准，以提升患者输血的安全性。