超高效液相色谱

张建平 吕警

关键词水;吡虫啉;代谢物;农药残留

吡虫啉，别名咪蚜胺，是一种新型高效氯代烟碱类广谱杀虫剂，优点是高效、低残留，是棉花、水稻、蔬菜及各种果树防治害虫的首选农药。作用机理为：吡虫啉对昆虫神经系统中的烟碱乙酰胆碱受体具有很强的杀虫活性，干扰化学信号传导，导致受体兴奋、麻痹、死亡。吡虫啉属于易土壤降解农药，半衰期为4～11d，此外，水解也快，在碱性溶液中在比酸性溶液中水解更快，其在植物体内主要代谢为吡虫啉胍、吡虫啉脲、烯式吡虫啉、5-羟基吡虫啉、6-氯烟酸。吡虫啉在水域环境中分布广泛，且对水生及陆生无脊椎动物（如底栖动物、蜉蝣稚虫、甲壳虫和蜜蜂等）具有致死作用。

吡虫啉残留的分析检测方法较多，主要有液相色谱法、液相色谱串联质谱法，但其代谢物的检测方法较少。研究了通过直接进样，用超高效液相色谱一串联质谱快速测定水样中吡虫啉及其5种代谢物。

1实验部分

1.1仪器与试剂

Waters Acquity H-Class超高效液相色谱仪，xevo TQD三重四级杆串联质谱仪，配电喷雾离子源。

甲醇、乙腈、甲酸均为色谱纯，所有实验用水均为超纯水;吡虫啉胍、吡虫啉脲、吡虫啉、烯式吡虫啉、5-羟基吡虫啉、6-氯烟酸标准品均购自农业部环境保护科研监测所。

1.2标准溶液

分别移取浓度为100Ng/ml标准溶液1ml，用乙腈在100ml棕色容量瓶中定容至刻度，得1.0Ng/ml标准储备液。标准储备液用乙腈水（1：1）稀释成浓度为1 00 gg/l中间使用溶液混标;分别吸取0.20、1.00、2.00、5.00，10.00 ml上述中间使用溶液于10ml容量瓶中，用乙腈水（1：1）定容至刻度。此系列标准溶液浓度为2.0ml、10.0ml、20.0m1、50.0ml、100.0μg/L，现配现用。

1.3样品采集与处理

试验用样品为环境水样，用干净的100ml棕色玻璃瓶采集，4℃冷藏保存，72h内分析。样品用一次性注射器抽取水样，用0.22μm PVDF滤膜过滤，然后加入等体积的乙腈，装入进样瓶中直接分析。

1.4超高效液相色谱分析条件

色谱柱为AcquityUPLC RPl8（2.1mnlxl50 mm，1.7m）;柱温为350c，流动相为乙腈（A）和0.1%甲酸水（B），进样量为5，流动相梯度洗脱程序见表1。

1.5串联质谱分析条件

离子源为电喷雾电离源（ESI）;毛细管电压3.2 kV;离子源温度120℃：脱溶剂气温度3200c;脱溶剂气流量900 L/h：锥孔气流量50 L/h：采用多反应离子监测模式（HRH），吡虫啉及其5种代谢物的多反应监测（HRH）条件见图1、表2。

1.6线性关系及检出限

在上述色谱条件下，对不同浓度标准溶液分别进样，得到响应值，以响应值为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，吡虫啉及其5种代谢物在2～100μg/L范围内线性关系良好，相关系数（r）均大于0.999，其线性方程、相关系数见表3。

按照HJ 168-2020要求，并考虑仪器灵敏度，重复7次空白试验，将测定结果换算为样品中的含量，计算7次平行测定的标准偏差S，按公式MDL=3.143×S计算方法检出限（表3）。

1.7精密度与准确度

用蒸餾水按照以上检测方法进行加标回收试验，添加3个不同水平的混合标样，每个添加浓度重复7次，计算添加回收率以及测定结果的相对标准偏差（表4）。精密度与准确度试验显示采用该方法测定平均回收率在70.0%～100%，相对标准偏差为2.6%～8.0%，符合残留分析的要求。

2结论

建立了超高效液相色谱一串联质谱法测定水样中吡虫啉及其5种代谢物的多残留检测方法，该方法简便、快速，结果准确、可靠，具有良好的灵敏度和理想的精密度，具有显著的实用价值。经精密度试验和方法验证试验，证明该方法完全满足残留检测的要求，适合于环境水样中吡虫啉及其代谢物残留的同时检测。