外周血淋巴细胞免疫表型检验评价恶性肿瘤患者细胞免疫功能的价值分析

孙 翔， 拓红晓

(1. 河南理工大学第一附属医院(焦作市第二人民医院)检验科， 河南 焦作 454100； 2. 焦作煤业集团有限责任公司中央医院检验科， 河南 焦作 454100)

机体免疫功能与恶性肿瘤发生发展间具有密切联系，恶性肿瘤患者往往存在免疫功能不全现象。细胞免疫在抗肿瘤免疫中具有重要作用，故对细胞免疫功能状态进行评估，能够为患者病情、治疗方案的制定提供依据[1]。T淋巴细胞亚群在恶性肿瘤发生发展中发挥的作用已获诸多研究证实，但目前关于其他淋巴细胞亚型与恶性肿瘤间的关系尚无诸多研究报道[2-3]。鉴于此，本研究将分析外周血淋巴细胞免疫表型检验评价恶性肿瘤患者细胞免疫功能的价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年1月至2019年12月本院治疗的86例恶性肿瘤患者作为观察组，并选取同期到本院体检健康者90例作为对照组。观察组患者均经病理检查明确诊断，且无肝、肾功能不全或严重感染。观察组：男54例，女32例；年龄46～78岁，平均(59.83±3.40)岁；肿瘤类型：生殖系统肿瘤15例，胃肠肿瘤28例，呼吸系统肿瘤43例；肿瘤未转移49例，转移37例。对照组：男57例，女33例；年龄44～78岁，平均(59.91±3.45)岁。签署知情同意书，获医学伦理委员会批准。两组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采集入选者空腹静脉血2 ml，保存于EDTA-K2抗凝管，向外周血标本中分别加入20 μl荧光标记的CD3、CD4、CD8、CD56、CD19单克隆抗体，孵育后将细胞裂解液加入，溶解红细胞，通过磷酸缓冲盐溶液冲洗，采用流式细胞仪(BD FACS Calibur)测定淋巴细胞群，包括B淋巴细胞、T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞，于直方图中将淋巴细胞群框出，并选取5 000个淋巴细胞，对其中各标记细胞数量与其所占百分比进行计算。

1.3 评价指标

分析两组、观察组中不同化疗周期及肿瘤转移与否患者的淋巴细胞免疫表型检测结果。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组淋巴细胞免疫表型检测结果比较

观察组CD3+CD4+、总T淋巴细胞低于对照组，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

表1 两组淋巴细胞免疫表型检测结果比较

2.2 观察组中不同化疗周期患者淋巴细胞免疫表型检测结果比较

未化疗、化疗1～6周期患者CD3+CD4+低于对照组，化疗>6周期患者CD3+CD4+高于未化疗患者；未化疗、化疗1～6周期患者CD3+CD8+高于对照组，化疗>6周期患者CD3+CD8+低于未化疗患者；未化疗、化疗不同周期患者CD3+CD56+高于对照组；未化疗患者总T淋巴细胞低于对照组，不同化疗周期患者CD3+CD56+、总T淋巴细胞高于未化疗者，差异有统计学意义(P<0.05)。详见表2。

表2 观察组中不同化疗周期患者淋巴细胞免疫表型检测结果比较

2.3 观察组中肿瘤未转移、转移患者淋巴细胞免疫表型检测结果

肿瘤转移患者CD3+CD4+低于肿瘤未转移患者，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于肿瘤未转移患者，差异有统计学意义(P<0.05)；肿瘤转移、未转移患者总T淋巴细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表3。

表3 观察组中肿瘤未转移、转移患者淋巴细胞免疫表型检测结果比较

3 讨论

恶性肿瘤发生是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的结果，细胞免疫功能在肿瘤发生、发展及预后评估中发挥着重要作用，目前依据肿瘤与细胞免疫功能状态相关性的抗肿瘤细胞免疫治疗措施在临床逐渐推广，故对患者细胞免疫功能进行准确评估有利于指导临床治疗[4-5]。细胞免疫应答主要由T淋巴细胞介导，目前T淋巴细胞亚群检测已被广泛用于自身免疫性疾病、心血管疾病及肝脏疾病等诊治中[6]。

CD3+是细胞免疫主要活性细胞，CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞分别为辅助性、抑制性T淋巴细胞代表，前者能够达到正向调节细胞免疫功能的作用，增强吞噬细胞抗感染能力，达到抗肿瘤效果，而后者主要发挥负向调节作用，抑制机体免疫应答反应[7-8]。CD3+CD56+属于NKT细胞，由多种细胞因子诱导产生，能够发挥细胞溶解效应，参与肿瘤、自身免疫疾病及感染疾病的发生[9]。苏丽等[10]研究中指出，恶性肿瘤患者CD3+CD4+低于健康组，CD3+CD8+高于健康组，患者伴有不同程度的免疫功能紊乱现象。本研究结果显示，观察组CD3+CD4+、总T淋巴细胞低于对照组，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于对照组，肿瘤转移患者CD3+CD4+低于肿瘤未转移患者，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于肿瘤未转移患者，由此可见，恶性肿瘤患者处于免疫失衡状态，机体内免疫抑制作用较免疫辅助作用强，且随着患者病情的进展，肿瘤细胞扩散严重，加重机体免疫抑制现象。此外，患者机体内细胞免疫功能将促进NKT细胞增殖，肿瘤细胞转移促使NKT细胞抗肿瘤作用增强。化疗已成为恶性肿瘤治疗中重要手段，有利于延长患者生存期，改善预后。经研究发现，恶性肿瘤患者接受化疗治疗时虽能够将肿瘤细胞杀灭，但也将杀灭部分健康免疫细胞，产生双重免疫调节作用[11-12]。本研究中；未化疗、化疗1～6周期患者CD3+CD4+低于对照组，化疗>6周期患者CD3+CD4+高于未化疗患者；未化疗、化疗1～6周期患者CD3+CD8+高于对照组，化疗>6周期患者CD3+CD8+低于未化疗患者；未化疗、化疗不同周期患者CD3+CD56+高于对照组；未化疗患者总T淋巴细胞低于对照组，不同化疗周期患者CD3+CD56+、总T淋巴细胞高于未化疗者。提示化疗对肿瘤细胞杀伤能力较强，持续的化疗能够调节患者免疫抑制状态，改善机体免疫功能，有利于恢复机体免疫平衡状态。

综上所述，恶性肿瘤的发生发展与细胞免疫功能有着密切关系，患者可能出现CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+等细胞比例的改变，故对上述指标进行检测有利于监视肿瘤免疫状态，评估细胞免疫功能。