显微镜观察血涂片之实验改进

王 洁 闫 洁

（石河子大学生命科学学院 新疆石河子 832030）

血涂片标本的观察是生物学七年级下册“流动的组织——血液”的实验内容。因为人血不易获得，且经过瑞氏染液染色后显微镜视野下红细胞数量约占血细胞数量98%，所以认识血细胞的形态结构以及不同种类的血细胞在血液中的含量的难度增加，消磨了学生的耐心和兴趣，影响教学效果。因此，教师在进行“流动的组织——血液”的教学时，往往会安排学生用显微镜观察人血的永久涂片或者采用iPad移动终端等现代信息技术向学生展示血细胞的结构。这种教学模式虽然大大提高了教学效率，但不利于培养学生的实验操作和探究能力，与新课标倡导的核心素养背道而驰。因此，为了契合倡导的教育理念，笔者对该实验材料和实验操作进行了改进，显著缩短了实验教学的时间，使实验更易观察和实施。

1 材料和方法

1.1 实验材料

（1）试剂：羊血、生理盐水（质量分数为0.9%的NaCl溶液）、瑞氏染液。

（3）器材：载玻片、盖玻片、普通光学显微镜。

1.2 实验方法

（1）试剂配制（教师准备）：采集羊血血样放于有抗凝剂（肝素）的试管内；配制瑞氏染液。

（2）血涂片的制作（学生操作）：用吸管吸取羊血血样，滴取直径约3 mm的血液分别于2片洁净的载玻片上；将血膜均匀推开并自然晾干；一片载玻片滴加瑞氏染液使其能够覆盖血膜，盖上盖玻片观察红细胞形态；一片载玻片先滴加生理盐水使其能充分覆盖血膜；进而滴加适量瑞氏染液。使生理盐水与瑞氏染液混合均匀，静置10～15 min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干后镜检。

2 实验操作注意事项

为了使血膜薄且连续，操作者在推片时可以先使盖玻片与血滴有一定的距离，并使推片与载玻片呈约45°，进而渐渐地靠近血滴，轻轻触及血滴并匀速推进，使血液沿载玻片端展开。

滴加生理盐水后，静止几秒后就可以滴加瑞氏染液。若时间过长载玻片上的血膜容易脱落。此外，生理盐水也可以由蒸馏水替代，但是实验效果没有滴加生理盐水的效果好。

用蒸馏水冲洗染液时要注意冲洗的水流不能太大、太迅速，否则会将血膜破坏或冲洗干净。

3 实验结果及分析

3.1 实验结果

因为NaCl溶液覆盖血膜后，在血膜外形成了一层液态膜。所以瑞氏染液与红细胞被液态膜阻隔，避免了红细胞与瑞氏染液的直接接触，而带相对较多电荷的白细胞受影响较小。因此，未经染色的红细胞颜色非常浅，呈现草绿色或淡黄色，只能隐约看见其轮廓。经过染色之后红细胞呈两面凹的橘红色圆盘状。嗜酸性白细胞胞质常被染成粉红色，细胞核被染成紫红色；嗜碱性白细胞胞质常被染成兰紫色；嗜中性白细胞细胞质被染成淡红色，细胞核为蓝紫色；淋巴细胞核大圆形，染成紫蓝色；单核细胞的颜色比淋巴细胞淡；血小板为不规则碎块，有细小的紫兰色颗粒。

3.2 实验改进后的优势

对于学生来说，实验现象更易观察，不必再花大量的时间和精力寻找显微镜视野下不同类型的血细胞，而是一目了然。这样不仅缩短了实验教学的时间，而且强化了学生实验操作的耐心和实验观察探究的兴趣。

对于教师来说，改进后的实验材料——羊血更容易获得，提高了实验的可行性，也更易开展实验教学培养学生的实验探究能力。

3 总结

新方法在显微镜下观察血涂片时，红细胞颜色非常浅，呈现草绿色或淡黄色，红细胞几乎看不见，只能隐约看见其轮廓。而铺在载玻片上的白细胞则染色比较好，与直接滴加瑞氏染液时没有明显的区别。因此，学生能够快速找到不同类型的血细胞并对血细胞进行形态结构的观察。该操作方法明显降低了血细胞的分类时间，增强了学生实验探究的兴趣，提高了实验教学的效率和可行性。