抗菌肽在猪病防治中的科学应用

万遂如

（中国畜牧兽医学会动物传染病学分会，吉林 长春 130122）

抗菌肽（ABP）又称抗微生物肽或抗生素肽，它是生物体内产生的具有抵抗外界微生物侵害、清除机体内突变细胞的一类阳离子小分子多肽，是生物体天然免疫防御系统的重要组成部分。抗菌肽存在于哺乳动物、两栖动物、鸟类、鱼类/贝类、昆虫类、真菌类、细菌类、病毒类、植物类及人类细胞之中，来源十分广泛。目前已从动物、植物及原核生物中分离鉴定出1 700多种抗菌肽。天然的抗菌肽是由生物体内基因编码并通过核糖体合成的小分子肽，它具有广谱的抗菌性且不易使细菌产生耐药性、不会形成药物在机体内残留和无毒副作用的特点。因此，抗菌肽已作为抗生素的替代品，在农业、畜牧业、食品工业和医药卫生等领域中使用，显示出了良好的应用与发展前景。本文就目前养猪生产中使用抗生素产生耐药性日益严重，许多抗生素已被禁止使用，如何运用抗菌肽替代抗生素在猪病防治中的科学应用问题谈点个人意见，仅供养猪场参考。

1 抗菌肽的分类

根据抗菌肽的来源不同可将抗菌肽分为哺乳动物抗菌肽、两栖类动物抗菌肽、昆虫抗菌肽、细菌抗菌肽、海洋生物抗菌肽、植物抗菌肽等。根据其作用对象的不同，又可将抗菌肽分为抗细菌肽、抗真菌肽、抗肿瘤肽、既抗细菌又抗真菌的抗菌肽、既抗肿瘤又抗微生物的抗菌肽等类型。

2 抗菌肽的作用机理

2.1 抗菌肽的抗细菌作用

抗菌肽分子的氨基酸大多数带正电荷，具有两性电解性质，细菌的质膜结构是其作用的靶位。抗菌肽分子通过正电荷与细胞膜的质膜磷脂分子上的负电荷形成静电吸附而结合在脂质膜上，并能插入到质膜中去，扰乱质膜上蛋白质和脂质原有的排列形式，使得膜外正电荷增多，达到阈值时导致膜去极化，致使细胞膜通透性增高，细菌不能保持正常渗透压而死亡；抗菌肽能通过将疏水端插入细胞膜的输水区域来改变膜的结构或使膜蛋白发生凝聚失去活性，进入磷脂双分子层后亲水端发生结合并形成离子通道，细胞内物质外泄导致菌体的死亡；还能通过抑制细菌细胞壁的合成，使细菌不能维持正常的细胞形态而生长受阻，并造成细胞壁穿孔，导致细菌死亡；还可通过干扰编码菌体细胞外膜蛋白的基因转录，使蛋白质的含量减少，细胞的生长受到抑制；部分抗菌肽还可通过抑制细胞内酶的活性来影响菌体的能量代谢，使菌体生长速度下降以及诱发胞内蛋白酶和钙离子外流，刺激细胞色素C释放，通过酶促反应使细胞凋亡。其次，抗菌肽对细菌和真菌的极强的杀伤作用还表现在能使菌体线粒体出现肿胀、空泡化、排列不规范、核膜界限不清、核破裂、内容物溢出，提示抗菌肽可通过抑制细胞呼吸作用将细菌和真菌杀死。

2.2 抗菌肽的抗病毒作用

抗菌肽的抗病毒作用主要表现在3个方面：一是通过抗菌肽直接与病毒粒子相结合发挥作用，比如对疱疹病毒和人类免疫缺陷病毒（HIV）的作用；二是抑制病毒的繁殖；三是通过模仿病毒的侵染过程起作用，如蜂毒蛋白与烟草花叶病毒包被蛋白具有相似性，这样蜂毒蛋白分子就可以伪装成病毒包被蛋白被病毒RNA结合，导致RNA构象改变，不能与正常蛋白结合，病毒颗粒无法进行正常组装。

2.3 抗菌肽的抗寄生虫作用

昆虫防御素对疟原虫的卵囊期与子孢子期有杀灭作用，因为防御素分子与虫体外膜结合引起虫体内部形成大空泡，造成子孢子膜通透性受到破坏，形态受到损伤，流动性降低而死亡。Diaz Achilrica等发现一种合成的天蚕素-蜂毒素杂合体对莱什曼原鞭毛虫有杀伤作用，能很快降低目标靶细胞质膜H+/OH-的通透性，使细胞的ATP合成下降、呼吸减弱、外膜坍塌、原生质膜形态遭到破坏，而杀灭原虫。

2.4 抗菌肽的抗肿瘤作用

抗菌肽的抗肿瘤作用主要是使肿瘤细胞膜上形成孔洞，内容物外泄。同时，还能使线粒体出现空泡化、嵴脱落、核膜界限模糊不清、有的核膜破损、核染色体DNA断裂，还可抑制染色体DNA的合成，诱导肿瘤细胞凋亡，肿瘤体积缩小。

近几年来有试验证实，抗菌肽还具有改善动物机体免疫调节的功能，提高免疫力的作用。抗菌肽只杀灭微生物而不会杀死宿主细胞的原因在于抗菌肽仅与微生物的磷脂、LPS（脂多糖）及胞壁酸相互作用。

3 抗菌肽在猪病防治中的科学应用

3.1 发病猪的治疗

3.1.1 由病毒与细菌共感染与继发感染引发的猪急性热性传染性疫病的治疗

方案1：大败毒注射液（连翘、紫花地丁、白芷、蒲公英、板蓝根等，每千克体重0.1毫升）、猪用排疫肽（5种高免球蛋白，每50千克体重1毫升，重症可加量）、猪用转移因子（每40千克体重1毫升，重症可加量），混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽（每60千克体重1毫升，重症可加量），每日1次，连用4天。

方案2：清开灵注射液（金银花、板蓝根、牛黄、水牛角、黄芪、珍珠母、栀子等），小猪每头每次10毫升、中猪15毫升、大猪20毫升，免疫核糖核酸（每70千克体重1毫升，重症可加量）、白细胞介素-4（每30千克体重1毫升，重症可加量），混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

方案3：复方柴胡注射液（每千克体重0.2毫升）、猪用干扰素（每40千克体重1毫升，重症加量）、猪用转移因子，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

3.1.2 猪呼吸道病综合征的治疗

方案1：复方板蓝根注射液（每千克体重1毫升）、猪用干扰素、白细胞介素-4，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

方案2：香菇多糖注射液（每千克体重1毫升）、免疫核糖核酸、猪用转移因子，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

方案3：金银花注射液（金银花、黄芪、柴胡、连翘等，每千克体重0.2毫升）、猪用排疫肽（5种高免球蛋白）、猪用转移因子，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

3.1.3 由病毒与细菌引发的猪腹泻性疫病的治疗

方案1：双黄连注射液（每千克体重0.2毫升）、猪用干扰素、白细胞介素-4，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

方案2：复方穿心莲注射液（每千克体重0.2毫升）、免疫核糖核酸、猪用转移因子，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用4天。

方案3：高免血清疗法，选用本猪场发生病毒性腹泻后痊愈20天的老母猪或大的肥育猪无菌静脉采血，分离血清，加入一定量的抗生素（如阿莫西林或头孢噻呋等）给病猪肌注，每日1次，连用2天；同时肌注抗菌肽，每日1次，连用3天。

方案4：杨树花口服液100毫升对水200千克给大猪自然饮用5天；小猪每头口服杨树花口服液3～5毫升，每日上、下午各口服1次，连用3～4天。

3.1.4 母猪乳腺炎、子宫内膜炎、阴道炎的治疗

方案1：鱼腥草注射液（每千克体重0.2毫升）、抗菌肽（每60千克体重1毫升，重症可加量），混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注头孢噻呋钠（每千克体重5毫克），每日1次，连用4天。

方案2：双黄连注射液（每千克体重0.2毫升）、抗菌肽，混合肌注，每日1次，连用4天；同时肌注头孢拉定（每千克体重2毫克），每日1次，连用4天。

方案3：干鱼腥草80～100克、铁马鞭50～100克，研成粉，加入2～3倍清水煎熬（煮沸后再熬10分钟），药液口服，药渣拌料饲喂，每天1剂，连用3～4次。

3.1.5 猪附红细胞体病的治疗

方案1：血虫净（贝尼尔，每千克体重5～7毫克），用生理盐水稀释成5%溶液肌注，每日1次，连用2次；同时配合肌注抗菌肽与猪用转移因子的混合物，每日1次，连用4天。

方案2：红弓链康注射液（每千克体重0.1毫升，重症可加量），每日1次，连用4天；同时配合肌注抗菌肽与白细胞介素-4混合物，每日1次，连用4天。

治疗中途补注补血针1次，同时在饲料中补充维生素C与B族维生素等，使其康复加快，可减少病后僵猪的发生。

3.1.6 对症治疗 在结合养猪场生产实际与发病状况选用上述方案实施治疗时，请注意对症治疗。

（1）病猪气喘、咳嗽严重者，应肌注冰蟾熊胆注射液（每千克体重0.1毫升），每2日使用1次，连用2次。

（2）重症病猪应实施支持疗法，用10%葡萄糖盐水溶液 300～500毫升、10%维生素C 5～10毫升、10%樟脑磺酸钠溶液5～10毫升，混合1次静注，每日1次，连用3天。

（3）病猪不吃料、饮水少时，下午加注复合维生素B注射液1次（每千克体重0.1毫升），每日1次，连用2次，可促进病猪开胃采食，加快康复。

（4）病猪一律改饮：电解质多维800克、黄芪多糖粉800克、溶菌酶400克、维生素C 200克，对水1吨，连续饮用7天。

3.2 保健预防

方案1：柴葛解肌散（柴胡、葛根、甘草、黄芩、羌活、白芷、桔梗等）800克、白细胞介素-4（400克）、抗菌肽400克，拌入1吨料中，连续饲喂7～12天。

具有解肌清热、润肺止咳、生津止渴、保肝利胆、抗病毒、抗细菌、抗氧化、抗应激、提高机体免疫力之功能。用于感冒发热、流感、口蹄疫与水疱病，以及多种病毒与细菌混合感染等疫病的防治。

方案2：仙方活命散（板蓝根、大青叶、白芷、紫花地丁、蒲公英等）1 000克、免疫核糖核酸600克、猪用转移因子400克、抗菌肽400克，拌入1吨料中，连续饲喂7～12天。

具有清瘟败毒、解热镇痛、抗病毒、抗菌消炎、抗应激、提高机体免疫力之功能。可用于猪高热综合征、附红细胞体病、蓝耳病、圆环病毒病、伪狂犬病、腹泻性疾病、乳腺炎以及病毒与细菌共感染引发的疫病防治。

方案3：银翘散（金银花、连翘、薄荷、荆芥、淡豆豉、牛蒡子、桔梗、芦根、淡竹叶、甘草）1 000克、排疫肽（5种高免球蛋白，600克）、猪用转移因子400克、抗菌肽400克，拌入1吨料中，连续饲喂7～12天。

具有清热解毒、辛凉透表、宣肺祛痰、利咽止咳、生津止渴、抗病毒、抗细菌、抗过敏、抗应激以及增强机体免疫力之功能。可用于呼吸道病综合征、流感、乙型脑炎、附红细胞体病以及急性热性传染性疾病的防治。

方案4：双黄连浸膏粉（金银花、黄芩、连翘等）500克对水1 200升、电解质多维800克、干扰素800克、抗菌肽400克，对水1吨，连续饮水12天。

具有清热燥湿、泻火解毒、辛凉透表、疏散肺邪、抗病毒、抗菌消炎、抗内毒素以及提高机体免疫力之功能。可用于病毒与细菌混合感染引发的急性热性传染病防治。

以上保健预防方案可结合养猪场生产中存在的实际问题，猪群的健康状况，或发生疫情以及季节的变化而选用。一般用于仔猪断奶前后12天、保育仔猪转群至肥育舍前后12天，肥育中期（出栏上市前2个月）、生产母猪配种前20天与产仔前后12天可实施药物保健预防。注射弱毒活疫苗以及母猪妊娠初期不要实施药物保健。

4 抗菌肽使用注意事项

（1）抗菌肽作为蛋白质，易受外界各种不良因素的影响，会造成失活，因此一定要按照产品规定的条件保存与运输。

（2）抗菌肽制剂不能与酸碱性溶液和葡萄糖盐水溶液混合使用，否则失去生物活性。

（3）抗菌肽可与抗生素配合使用，但不能混合注射，应分别注射。

（4）抗菌肽分子在动物机体内容易被蛋白酶降解，因此口服给药时一定要使用经过微囊包被的肠溶型产品，拌料或饮水即可，能避免蛋白酶的降解。

（5）抗菌肽与细胞因子制剂及中兽药制剂联合使用，无颉颃作用，可有效增强药效，提高防治效果。

（6）抗菌肽分子量小（在 4 000～7 000 Da）、水溶性好、热稳定性高，可耐受饲料制粒时的高温而不变性，又具有广谱的抗菌性。因而作为畜禽饲料添加剂替代抗生素，可以减少抗生素产生耐药性与药物残留带来的危害。