一例仔猪德尔塔冠状和传染性胃肠炎病毒混感诊治

胡远鹏 李中华

（湖南省益阳市资阳区畜牧水产局 413001）

在生猪养殖过程中，临床引发仔猪腹泻的病因十分复杂，其中主要包括营养性、毒素中毒、细菌和病毒感染等原因，其中猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（PORV）是以前较为常见可引起仔猪腹泻的病毒性病原，此外，新发猪德塔冠状病毒（PDCoV）和猪肠道冠状病毒（SeACoV）也在我国部分地区猪场流行，给养猪业造成巨大的经济损失[1]。PDCoV 于2012 年首次在美国被报道，目前该病在我国不同地区猪场广泛流行，但由于猪场兽医或工作人员对该病尚不了解，且容易造成误诊，导致延误疫病治疗与防控[2]。此外，以上肠道病毒感染导致仔猪出现的临床症状类似，传统的临床诊断无法进行确诊，如果发生混合感染甚至可能造成漏诊[3]。

本文首次对湖南省娄底市一例仔猪PDCoV 和TGEV 混合感染导致腹泻的病例进行报道，根据临床诊断结合实验室诊断结果最终确诊，阐述该类混合感染病例诊断与防控过程，旨在为养殖户（企业）与兽医对此类混合感染病例诊断提供参考。

1 猪场发病情况

2019 年11 月初，由于气温突变，湖南耒阳市某养殖场产房2 栋部分栏舍新生仔猪全部出现腹泻，呕吐等症状，驻场兽医对发病仔猪肌肉注射青霉素和安乃近等抗生素，但效果不佳，且其后临近栏舍仔猪大面积发病，其中发病的新生仔猪达137 头，虽然对发病猪群进行对症治疗，但仍然死亡97 头。经确定该猪场母猪免疫注射过猪伪狂犬病、猪瘟、口蹄疫和圆环等疫苗。

2 临床与病理症状

发病仔猪体温升高、发抖、极度消瘦、脱水，排出水样粪便，粪便带有腥臭味，且部分猪群呕吐；发病严重猪群四肢无力，因严重脱水而极度口渴，最后死亡。剖检病死仔猪可见主要病变器官集中在肠道，肠道内存在大量黄色液体，且肠壁因仔猪持续性腹泻而变薄和充血，且无弹性；肠系膜淋巴结肿大且充血，且猪肛门松弛。

根据流行病学特点和发病仔猪临床及病理症状，我们初步判断该病主要为肠道病毒感染所致，但不能排除是否有其他病原感染。

3 实验室诊断

3.1 病毒性病原检测

采集3 份肠道组织样品，与适量生理盐水混合并研磨，反复冻融3 次后高速（12000rpm）离心10min，取上清进行核酸提取，并通过RT-PCR 法分别检测PEDV、TGEV、PDCoV 和TGEV 等肠道病毒和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CFSV），PCR 法检测猪圆环病毒（PCV2）、猪伪狂犬病毒（PRV）和猪细小病毒（PPV）。扩增产物结果如图1 所示，3 份样品均检测为PDCoV（约600bp）和TGEV（约450bp）阳性，但其他被检测病原均为阴性（凝胶电泳图略）。

3.2 细菌性病原检测

为了确定发病猪群是否感染细菌性病原，无菌采集肠道组织，以灭菌接种环将肠组织液接种于鲜血琼脂培养基，将培养基置于37℃恒温箱（有氧或无氧环境）24h 或48h，查看培养基表面是否存在菌落。结果均未发现培养基表面出现菌落。

4 诊断

结合临床与实验室诊断结果，我们判断该场仔猪发病由PDCoV 和TGEV 混合感染所致。

5 治疗与防控

5.1 治疗措施

针对疫情采取如下紧急治疗措施：（1）对全群母猪免疫接种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎弱毒疫苗（华派生物工程集团有限公司产品）2 头份，同时对产房仔猪紧急免疫1 头份；（2）由于目前尚无诊断PDCoV 的疫苗，所以对病猪只能进行对症治疗，其主要措施为：将发病猪群和健康猪群分开饲养，在母猪饲料中添加适量黄芪多糖，提高免疫力；在仔猪饮水中添加葡萄糖、小苏打、电解多维和食盐，提高免疫力，防止脱水；在产房内铺撒干粉消毒剂，同时带猪进行消毒，适量提高猪场温度，同时保持干燥；（3）对无治疗意义或死亡病猪进行无害化处理。

5.2 防控措施

将粪污清除并无害化处理后，使用强力碘、过氧乙酸等消毒剂对全场进行消毒；在栏舍过道铺撒生石灰，以保障猪场干燥；定期采集猪群血液和粪便样品，送至专业检测机构进行病原监测和抗体检测；及时对猪群进行疫苗免疫接种，且免疫两周后应检测猪群抗体产生情况，若抗体未达到保护水平，应及时进行再次免疫等。

6 讨论

猪流行性腹泻病是抑制我国养猪业发展的主要疫病之一，目前PEDV、TGEV、PROV 和PDCoV 是引发仔猪腹泻的主要肠道病毒，但以上肠道病毒引发的临床症状较为类似，仅根据临床及病理症状判定病原较困难，必须借助试验室诊断技术进行确诊，实验室诊断技术中以RT-PCR 和PCR 法最为常见且方便[3，4]。值得注意的是，猪肠道病毒也容易与其他病原发生混合感染，如PRRSV、PCV2 等[5，6]。因此，在进行实验室诊断时，应尽可能去诊断更多的病原种类，以免造成漏诊，延误疫病的治疗与防控。

本文通过分子生物学技术确诊本病例中仔猪腹泻由PDCOV和TGEV 混合感染所引起，笔者猜测病原入场可能是通过猪场从外面引进母猪导致，由于母猪感染TGEV 和PDCOV 等肠道病毒不会出现明显的临床症状，该类病原在监测过程中也容易被忽视。当病原入侵产房后便导致初生仔猪腹泻，造成严重的经济损失。当确诊该猪场爆发PDCoV 和TGEV 混合感染后，我们对猪群紧急免疫接种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎弱毒疫苗，可初步对TGEV 的流行进行控制，但目前针对PDCoV 的有效疫苗较少，而且PDCoV 和TGEV 引发的临床症状基本类似，所以需采取一系列对症治疗措施，控制疫情的进一步发生，降低养殖企业的经济损失。今后对该类疫病的防控应提高猪场生物安全水平的同时，规范化饲养，提高猪群免疫力，同时定期检测猪群免疫接种相应疫苗和抗体水平。