影响农药残留快速检测准确性的因素及对策

孙 涛，王广丽，刘建洋，张子臣

(山东标准检测技术有限公司，山东 济南 250101)

2004年国家发布实施了《GB/T 5009.199—2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》方法，此后农药残留快速检测技术逐步应用到生产生活的各个领域。农药残留快速检测技术相对于实验室检测技术具有低成本、短周期的特点，在农产品的生产、运输、存储、销售等多个环节有明显应用优势。针对农产品生产销售周期短的特性，农药残留快速检测可在农产品到达餐桌之前，对其农药残留风险进行预判，这也是该技术近年来得到高速发展的主要原因。在实际工作中，农药残留快速检测结果的准确性会受到检测仪器、检测试剂、环境温度、前处理操作和时间控制等几方面影响，为确保检测结果的准确性，笔者根据多年工作实践针对性提出解决对策。

1 检测仪器的影响

农药残留快速检测仪是针对我国国情和农产品市场监管需求而研发的专用检测仪器，其是按国家标准《GB/T 5009.199—2003》中的酶抑制法对蔬菜、水果中有机磷类和氨基甲酸酯类农药的残留量进行准确、快速检测。目前，市售的农药残留快速检测仪经历了几次更新换代后，在轻量化、便携性方面取得了较大进步，但其核心部件没有发生变化，仍然是分光光度计。因此，要保证仪器检测结果的准确性，需要对分光光度计进行查验和校准。查验是指在检测前先对检测仪器各个通道的吸光度能量值进行重复性、稳定性检查，确保能满足检测要求，如果发现异常应及时处理，避免因仪器自身原因造成的准确性偏差。校准是指在检测前用标准样品对仪器准确度进行校准，有条件的可以多做几次空白试验和对比试验，确保仪器各项参数在合理范围。

2 检测试剂的影响

农药残留快速检测试剂的效能是影响检测结果的主要因素。要保证农药残留快速检测的准确性，就要严格按照《GB/T 5009.199—2003》规定进行试剂配置，需要储存保管试剂的，储存条件要符合标准要求。其中，显色剂、底物配制成溶液后要严格按照标准要求冷藏保存，切勿冷冻储存。乙酰胆碱酯酶作为农药残留快速检测的核心试剂，其活性能否达到实验要求决定农药残留快速检测的准确性，因此每次检测前必须先做空白实验，保证3 min的吸光度变化值△A0在0.3以上才检测，确保酶试剂的活性符合实验要求。

3 环境温度的影响

乙酰胆碱酯酶是农药残留快速检测的核心试剂。从反应原理看，有机磷农药、氨基甲酸酯农药与乙酰胆碱竞争性作用于胆碱酯酶，即胆碱酯酶与乙酰胆碱结合催化乙酰胆碱生成乙酰和胆碱，另外胆碱酯酶与有机磷农药结合而阻断反应进行。因此，利用胆碱酯酶催化反应的抑制法可快速检测有机磷农药、氨基甲酸酯农药的残留。乙酰胆碱酯酶的活性对环境温度敏感，37℃是其发挥活性的最佳温度，过高或者过低都会影响其活性，进而影响检测的准确性，所以每次检测之前几种试剂都要先进行解冻。试剂从冷藏箱取出，待温度恢复到37℃左右才能进行检测。当环境温度无法满足实验要求时，检测要在37℃恒温水浴中进行，以保证乙酰胆碱酯酶的最佳活性温度。

4 前处理操作的影响

样品前处理也是决定农药残留快速检测成败的关键因素。合理准确的样品前处理方式，可以最大程度减少果蔬汁自身属性对准确性的影响，因为有些蔬菜、水果汁液中一些成分会对乙酰胆碱酯酶产生作用，还有些蔬果汁液颜色较深，也会影响检测结果的准确性，因此前处理阶段要采取相应措施避免这些果蔬的汁液渗出。如韭菜、香菜等细茎类蔬菜可以采取整体浸泡的方式提取，番茄、蘑菇等体积较大的球形蔬菜可以用缓冲液反复洗脱的方式提取。

5 时间控制的影响

能否准确控制反应时间是农药残留快速检测成败的核心，这不仅需要精准掌握几种试剂加入的时间间隔，还要尽可能缩短操作时间，保证快速准确添加试剂，减少人为因素对结果准确性的影响。若条件允许，选择对照实验和样品测试实验能够同步进行的检测仪器，如不能同步进行，试剂反应时间、环境温度、乙酰胆碱酯酶活性等变化因素都会对结果准确性产生影响。具备同步检测功能的农残检测仪可以最大限度规避这些不利因素的影响，进而提高检测结果的准确性。

综上所述，农药残留快速检测结果的准确性受多方面因素影响，在实际工作中要综合考虑上述因素，减少误差、精准控量、准确控制反应时间，避免各种不利条件的影响，确保农药残留快速检测工作准确顺利进行。