牛人工授精技术操作要点

文│黄龙（贵州省黔西南布依族苗族自治州农业农村局）

1780年，意大利生理学家司拜伦谨尼（SpallanZanni）首次对狗进行人工授精并获得成功，迄今已有240年历史，开创了动物繁育新技术。人工授精是指通过工具将公畜的精液取出，再用工具将精液输入到发情母畜的生殖道内，使母畜授精的一种配种方法。

一、牛人工授精的关键技术环节

1.人工授精站的基本要求。工作室设置人工授精站必须具备专用工作室、冻精解冻检查室、配种室、消毒器械和冷藏设备。

2.室内工作规则。输精员进入工作室必须穿工作服；工作室内保持整洁，要求无烟、无蝇、无异味、无杂物，干净、卫生；禁止在室内烧火、吸烟；防疫、治疗、消毒药品、治疗器械等不得与其他物品混用；非输精员禁止进入工作室内。输精员要严格执行人工授精操作规程，熟练掌握人工授精技术和肉牛饲养管理技术，母牛发情和产犊情况，并做好登记。对畜主进行科技宣传培训，使畜主掌握牛的饲养和繁育基本知识，严格执行人工授精设备的消毒制度和物资管理。认真做好配种记录，加强工作总结，找出工作中存在的问题，研究提高母牛受胎率、产犊率的有效措施和方法。

二、母牛受胎率影响因素

母牛受胎率影响因素有发情表现、精液质量、畜主对牛的发情鉴定水平和配种员的输精技术等。母牛受胎率=发情表现×精液质量×发情鉴定×输精技术×100%。

对输精器械要进行严格的清洗和消毒工作，输精器械在消毒前先用肥皂水刷洗，再用清水冲净擦干，然后按器械的性质、种类分别包装，放入高压灭菌锅内消毒30分钟，冷却后置放瓷盘内备用。润滑剂、生理盐水、棉球用前经蒸气消毒。新购置的玻璃器皿使用前先用2%碳酸钠溶液浸泡，再用清水洗净，放入80～120℃高温干燥箱中消毒。凡与精液接触的用具，使用前必须用灭菌生理盐水或解冻液冲洗1～2次。

三、鲜精采集及冻精解冻

1.采精。对采精场的要求：宽敞、平坦、安静、清洁、采光好，场内设采精架以保定台畜。

2.采精台的准备。

（1）台畜。性情温和的发情母牛。

（2）假台畜。貌似牛样的模型，将发情母牛尿液用麻袋片浸湿假台畜，诱引公牛爬跨。

（3）公牛的调教。激素的作用：发情母牛阴道分泌物对公牛有刺激和引诱作用，激发公牛的性欲。视觉、“观摩”：让调教公牛看其他公牛配种，产生配种欲望。采精前的刺激：公牛和发情母牛拴在一起5～10分钟，公母相互挑逗，但不让其爬跨，使公牛性兴奋不断加强，待公牛阴茎充分勃起并伸出时，再让公牛爬跨，使用假阴道进行采精，约8～10秒。

（4）采精原则。完全收集到精液；保证精液品质；不能损伤公牛生殖器官；对公牛的性反射不能有不良影响；方法简单、实用、易操作。方法：假阴道法（牛、羊、马、兔、猪均可）。采精频率：每周采两天，每天采两次。

（5）精液品质检查。外观检查：色泽乳白色或灰白色；气味：无味或淡淡腥味；精液量：5～8毫升。

（6）精子成活率。在显微镜下计数板观察精液中直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。精子成活率的检查条件：温度37～38℃，恒温台（箱）。精子成活率：鲜精≥0.6，冻精≥0.3，并执行相关标准。

（7）冻精解冻。颗粒冻精解冻：每粒用2.9%柠檬酸钠溶液5毫升试管中加热30～37℃解冻（每粒0.5～0.25毫升），颗粒溶解完毕，输精针、注射器吸入备用。

细管冻精解冻：放入3～37℃水中解冻（每支0.25毫升），发现冒气泡时取出。冻精保存：在罐内-176～-196℃液氮中保存，冻精离开液氮的时间不超过10秒，每周检查两次液氮，液氮量不低于罐容的1/3。

四、输精

1.母牛的发情鉴定。指母牛特有的与排卵过程密切相关的周期性的性活动现象。发情表现：精神兴奋、鸣叫、食欲减退、卧立不安、举尾、频频排尿；性欲（交配欲）：主动接近公牛，爬跨其他母牛，接受爬跨，两后腿分立，呈交配姿势。

2.生殖道变化。阴道充血，分泌物增多，子宫颈口开张，子宫颈充血增大变软，子宫与阴道收缩加强，阴门有黏液流出。黏液变化为：无色透明、米汤色、乳白色，在米汤色到乳白色时配种最佳。

3.卵巢变化。母牛发情周期为21天，分四个阶段。

（1）发情前期。上一个周期的黄体迅速退化，卵泡迅速发育生长，没有性欲表现。

（2）发情期。卵泡成熟，开始排卵，阴道上皮角质化明显，生殖道收缩加强，精液分泌增加，接受爬跨，有性欲，持续1～2天。

（3）发情后期。黄体开始形成，保护卵巢，母牛恢复正常，不接受交配。

（4）间情期。卵巢上黄体成熟，分泌加强，抑制发情。一旦妊娠，黄体将维持到分娩，叫妊娠黄体；如果设有妊娠，黄体只维持在间情期，叫周期黄体。

4.发情母牛配种。发情母牛用保定架或拴在柱上保定后，用0.1%高锰酸钾液擦洗外阴消毒，采用直肠把握输精（输精员需提前剪磨指甲，并清洗消毒），打上润滑剂（如凡士林和肥皂水），手指呈锥状缓慢从肛门伸入直肠，掏出肠内贮存粪便，通过直肠壁轻轻下压握住子宫颈，另一只手将装好精液的输精枪（管）向上与水平成30～40度角插入阴道，直肠内手指感触枪（管）头，两手配合引入子宫颈内口进入子宫角，将精液缓慢注入，输精完成后，将输精枪慢慢抽出。输精时若母牛努责（初配母牛较常见），助手按压母牛腰荐部，待努责停止后再将手伸入直肠内。冻精剂量：细管0.25毫升，颗粒0.1毫升，有效精子数大于1200万个。

5.配种记录。应做好配种记录，如畜主、地址、母牛品种、年龄、外貌特征、发情状况、配种时间、输精日期、精液品种、公牛号等信息。

6.配种后观察。配种后母牛下一情期再发情，说明未受胎，如不再发情，且食欲增加、温和、贪睡，一般认为已受胎。要加强怀孕期母牛饲养管理，黄牛怀孕期280天，水牛304天。产犊后跟踪调查，测定犊牛体尺体重指标、统计分析受胎率、产犊率及后代生产性能等，为今后配种提供技术依据。