凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能、免疫器官指数和血清生化指标的影响

蒋 磊，陈 杰

(1.宿州职业技术学院，安徽 宿州 234000；2.安徽海大饲料有限公司，安徽 池州 247100)

凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)为硬壁菌门属兼性厌氧型革兰氏阳性菌，具有乳酸菌属产酸抑菌的能力，同时兼备芽孢杆菌属耐高温、适合制粒的强抗逆性及高黏附性等优势。自20世纪初首次被发现以来[1]，经过数十年的筛选与改良，凝结芽孢杆菌的益生性及安全性得到了国内外的普遍认可，现已被我国农业部正式列入《饲料添加剂品种目录(2013)》，成为替代抗生素的新型饲料添加剂。[2]有研究表明，凝结芽孢杆菌可分泌多种消化酶及活性物质，促进机体养分消化吸收，提高生长速度；刺激机体免疫器官发育，提高免疫水平和抗病力[3]；增强机体血清中抗氧化酶活性，降低氧化应激对细胞的损伤。[4]目前，凝结芽孢杆菌的应用研究主要集中于AA肉鸡，本试验拟以817肉鸡为模型，探究饲粮中添加凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能、免疫功能和血清指标的影响，旨在评价其“替抗”的作用效果，为进一步在畜禽生产中更合理的应用提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用凝结芽孢杆菌为粉剂，含活菌总数≥5.0×108cfu/g，由郑州益富源生物有限公司提供；试验动物为1日龄健康817肉仔鸡(罗斯308父母代公鸡×海兰褐商品代母鸡)120只，由安徽海大饲料有限公司合作农户提供。

1.2 试验设计

试验于2018年8月在安徽海大饲料有限公司合作养殖场进行，选取1日龄817肉鸡120只，随机分为3组，每组5个重复，每个重复8只。其中，对照组饲喂基础日粮；抗生素组饲喂基础日粮+50mg/kg金霉素、5mg/kg黄霉素；凝结芽孢杆菌组饲喂基础日粮+300mg/kg凝结芽孢杆菌制剂。试验期分1～21日龄和22～49日龄两个阶段，全程共49天，肉鸡采用多层笼养，自由采食、饮水，常规免疫，基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.3 指标测定

1.3.1 生长性能

第1、21和49日龄分别以每个重复为单位进行空腹称重，试验期间每天记录耗料量，计算每阶段平均日采食量、平均日增重、料重比指标。

1.3.2 血清生化指标

第21和49日龄从每个重复中随机选取2只接近平均体重的健康肉鸡翅下采血2mL，3000r/min离心后分离血清，分装保存于-20℃冰箱待测。采用罗氏MODULP800全自动生化分析仪测定血清总蛋白、白蛋白、球蛋白和尿素含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.3.3 免疫器官指数

翅下采血后屠宰，分别摘取胸腺、脾脏和法氏囊，剔除附着组织后，用电子天平称重，计算免疫器官(包括胸腺、脾脏、法氏囊)指数。免疫器官指数为免疫器官鲜重(mg)与肉鸡空腹活重(g)的比值。

1.4 数据处理

试验数据利用Excel2013进行整理，采用SPSS17.0统计软件进行方差分析和多重比较，结果以平均值±标准差表示，以P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

由表2可知，1～21和22～49日龄，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡各生长性能指标均无显著性差异(P>0.05)，但末体重、平均日采食量和平均日增重指标呈上升趋势，料重比呈下降趋势；与抗生素组相比，凝结芽孢杆菌组各指标变化趋势不同，均无显著性差异(P>0.05)。

表2 不同日龄各处理组肉鸡生长性能指标

2.2 凝结芽孢杆菌对肉鸡免疫器官指数的影响

由表3可知，21日龄，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡3种免疫器官指数均无显著性差异(P>0.05)；与抗生素组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡胸腺指数和脾脏指数差异显著(P<0.05)，而法氏囊指数差异不显著(P>0.05)。49日龄，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡脾脏指数显著提高了45.12%(P<0.05)，而胸腺指数和法氏囊指数无显著差异(P>0.05)；与抗生素组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡3种免疫器官指数均差异显著(P<0.05)。

表3 不同日龄各处理组肉鸡免疫器官指数(mg·g-1)

2.3 凝结芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响

由表4可知，21日龄，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡血清生化指标均无显著性差异(P>0.05)；与抗生素组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡血清中球蛋白含量差异显著(P<0.05)，而其他含量差异不显著(P>0.05)。49日龄，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡血清中总蛋白和球蛋白含量分别提高了29.78%和40.84%，差异显著(P<0.05)，而白蛋白和尿素含量无显著性差异(P>0.05)；与抗生素组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白含量差异显著(P<0.05)，而尿素含量无显著性差异(P>0.05)。

表4 不同日龄各处理组肉鸡血清生化指标

3 讨论

3.1 凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

试验结果表明，饲粮中添加300mg/kg凝结芽孢杆菌使肉鸡1～21和22～49日龄阶段的生长性能有提高趋势，但效果不显著。王政等[5]在1～42日龄肉鸡饮水中添加1×106cfu/mL凝结芽孢杆菌，结果显示试验期末肉鸡平均日增重、料重比与对照组无显著性差异。Wu等[6]与Li等[7]研究也显示，饲粮中添加2×106cfu/g凝结芽孢杆菌对22～42日龄AA肉鸡平均日增重和饲料转化率未产生显著影响。夏涛等[2]研究在抗生素基础上添加3×106cfu/g凝结芽孢杆菌的饲喂效果，结果显示凝结芽孢杆菌能一定程度提高肉鸡末体重、平均日采食量和日增重，但均未达到显著水平。而有些研究与本试验结论不一致，赵娜等[8]研究报道，添加3×105cfu/g饲用凝结芽孢杆菌可显著提高22～42日龄肉鸡平均日采食量和日增重。Bami等[9]研究表明，饲粮中添加100mg/kg凝结芽孢杆菌可显著提高肉鸡体增重，降低料重比。以上研究结果的差异可能与凝结芽孢杆菌的添加量不同有关，林丽华等[10]研究证实了这一点，饲粮中添加1×105～3×105cfu/g凝结芽孢杆菌3种剂量水平，结果显示，其中2×105cfu/g添加剂量的肉鸡平均日增重和饲料转化率提高最显著。曹广军等[11]也认为，凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的改善效果与添加量存在依赖性。

3.2 凝结芽孢杆菌对肉鸡免疫器官指数的影响

胸腺、脾脏和法氏囊是家禽参与中枢、外周和体液免疫的重要器官，其器官指数可用于评价机体的免疫状况，即指数越高，表明免疫功能越强。在本试验条件下，抗生素组肉鸡免疫器官指数均存在一定程度的降低，其中49日龄肉鸡脾脏指数和法氏囊指数显著低于对照组。周艳[12]与李虎等[13]在饲粮中添加不同浓度的硫酸黏杆菌素，结果显示试验组肉鸡胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数均显著降低，且随着抗生素添加浓度的增加呈下降趋势，这表明饲粮中添加抗生素可抑制肉鸡免疫器官的发育，抑制程度与添加浓度呈正相关。本试验结果显示，与对照组相比，除42日龄肉鸡脾脏指数外，饲粮中添加凝结芽孢杆菌对肉鸡其他免疫器官指数均无显著影响。王艺茹等[14]研究表明，添加3×106cfu/g凝结芽孢杆菌对42日龄育成鸡的胸腺、脾脏和法氏囊指数无显著差异，这与宫秀燕等[15]报道一致，4×105cfu/g饲用凝结芽孢杆菌对35日龄肉鸡免疫器官指数无显著影响。这表明凝结芽孢杆菌促进生长初期肉仔鸡免疫器官发育的效果不明显，可能由于生长初期免疫系统未成熟，细胞分化缓慢，导致差异不显著。然而，Khalaifa 等[16]与赵娜等[8]研究表明，饲用凝结芽孢杆菌可显著提高35和42日龄肉鸡胸腺指数、脾脏指数或法氏囊指数。这可能也与生长性能相似，研究结论的差异与凝结芽孢杆菌的添加剂量相关，适量添加有利于肉鸡免疫功能的增强。

3.3 凝结芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响

家禽血清总蛋白含量可反映机体蛋白质摄入及代谢状况，主要分为白蛋白和球蛋白。白蛋白作为重要的运输蛋白，具有运输营养物质，维持血液渗透压和稳定免疫球蛋白等功能，与肝脏机能密切相关[10]；球蛋白参与机体体液免疫。赵娜等[8]研究显示，饲粮中添加凝结芽孢杆菌显著提高21和42日龄肉鸡血清总蛋白和球蛋白含量，而白蛋白无显著变化，与林丽花等[10]结论基本一致。曾丽莉等[17]在肉鸭饲粮中添加300mg/kg凝结芽孢杆菌，结果表明与对照组相比，21日龄肉鸭血清总蛋白含量显著提高，而21和42日龄白蛋白含量均无显著性差异。王向荣等[18]研究不同水平凝结芽孢杆菌对蛋鸭血清生化指标的影响，饲喂28天后显示蛋鸭血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量均无显著变化。本试验结果显示，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡血清白蛋白含量无显著变化，球蛋白含量显著提高，与前人研究结果基本一致。这说明饲粮中添加凝结芽孢杆菌可显著提高肉鸡血清球蛋白含量，而对白蛋白含量无显著影响，可能由于凝结芽孢杆菌能够增强机体特异性的体液免疫，显著提高血清中IgA、IgG和IgM等免疫球蛋白的含量。

尿素是蛋白质分解代谢的主要产物，血清中尿素含量直接反映家禽蛋白质代谢水平，即含量越低表明蛋白氮利用率越高。[19]本试验结果显示，与对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡49日龄血清总蛋白含量显著提高，而尿素含量无显著变化，说明血清中尿素的含量一定程度的降低了，这与林丽花等[10]研究结果一致，表明饲料中添加凝结芽孢杆菌可有效促进肉鸡蛋白质的利用，增强合成代谢，降低分解代谢。

4 结论

在本试验条件下，饲粮中添加300mg/kg凝结芽孢杆菌可显著提高49日龄肉鸡脾脏指数，血清总蛋白和球蛋白的含量，促进蛋白质的合成代谢，但对肉鸡的生长性能无显著性影响。