食品中低聚果糖的高效液相色谱检测法研究
2020-11-23冯博洪青岛谱尼测试有限公司
□ 冯博洪 曹 萍 赵 娜 青岛谱尼测试有限公司
在食品生产领域，低聚果糖（FOS）成为一种新型甜味剂，在乳制品、糖果、饮料中广泛应用。检测食品中FOS 的含量，对于控制食品质量具有重要意义。
1 材料和方法
1.1 材料来源
本研究材料是从市场上购买得到的某品牌奶粉和米粉。
1.2 仪器试剂
仪器主要有：HPLC 仪，蒸发光散射检测器，NH2色谱柱，离心机，超声波清洗器、电子天平等。试剂主要有：GF2 标品、GF3 标品、GF4 标品，乙腈，石油醚，乙酸锌与六氰合亚铁酸钾等。
1.3 溶液配制
配制FOS 标准溶液：取3 个10 mL容量瓶，分别精准称量GF2、GF3、GF4 标品各200 g，将标品置于瓶内，加入超纯水直至刻度线，然后将其液稀释到不同浓度，分别是0.5、5、50 mg/mL，然后超声处理，时间为3 min，经0.5 μm 的滤膜过滤。再取等量配好的标准溶液，置于容量瓶中，加入超纯水直至刻度线，重复超声、过滤的处理步骤，待检。
1.4 样品预处理
脱脂。取2 个100 mL 烧杯，精准称量奶粉、米粉各3.0 g，将其置于烧杯内，放在通风橱中；先加入50 mL石油醚，进行超声处理，时间为20 min再离心处理，转速为4 800 r/min、时间5 min；最后去除上层清液，留下沉渣在通风橱内挥发，于60 ℃下干燥，研磨为粉末状待检。
提取。取样本粉末2.0 g，加入20 mL 蒸馏水，先进行超声提取，温度为60 ℃，时间15 min；再离心处理，转速为8 000 r/min，时间为5 min；取上层清液置于25 mL 容量瓶内。
脱蛋白。采用亚铁氰化钾—乙酸锌法，对样品溶液进行脱蛋白处理，然后离心，转速为8 000 r/min、时间5 min；取上层清液置于25 mL 容量瓶内，加入蒸馏水定容。
1.5 HPLC 色谱条件
色谱柱是NH2分析柱，4.6 mm×300 mm，5 μm。使用乙腈和水作为流动相，实施梯度洗脱，洗脱程序是：①前20 min，70%～65%的乙腈，30% ～35% 的 水； ②第20 ～22 min，65% 的 乙 腈，35% 的 水；③第22 ～25 min，65% ～70% 的乙腈，35%～30%的水；④第25 ～28 min，70%的乙腈，30%的水。气体压力恒定为0.5 MPa，漂移管的温度为85 ℃，载气流速为2.0 L/min。
2 结果和分析
2.1 回归方程
标准溶液进样，根据溶液浓度和峰面积，计算回归方程。其中，GF2 是y=1.271x+5.387，R2值=0.999 6， 定量范围是0.67 ～14.0 mg/mL；GF3是y=1.339x+5.337，R2值=0.999 7，定量范围是0.67 ～14.0 mg/mL；GF4 是y=1.250x+5.361，R2值=0.999 8，定量范围是1 ～20 mg/mL。可 见，FOS 的 检 测 范 围 是0.67 ～14.0 mg/mL，线性关系良好，相关系数R2均＞99.9%，标准曲线的可信度高。
2.2 色谱图
按照色谱条件进行检测，根据加标图谱的保留时间，确定FOS 组分。对色谱图（图1、图2）分析，可见食品样本经超声处理、梯度洗脱后，FOS的分离度高、基线平稳，没有杂质出现。
2.3 含量测定值
根据回归方程，计算奶粉和米粉中的FOS 含量，见下表1。①从食品样品来看，米粉中的GF2、GF3、GF4含量均高于奶粉；②从FOS 的组分来看，GF2 含量最高、GF4 含量最低、GF3 居中。
图1 米粉色谱图
图2 奶粉色谱图
表1 奶粉和米粉中的FOS 含量统计表
2.4 回收率
奶粉和米粉的样品溶液各选取3 份，加入定量的FOS 混标溶液，检测3 次计算回收率。奶粉的加标回收率分别是98.8%、97.1%、95.2%，米粉分别是100%、99.6%、97.3%。可见，这两种样品的回收率在95.2%～100%，说明HPLC 法的回收率良好。
3 结论
文章以奶粉和米粉为对象，采用HPLC 法测定FOS 含量。结果显示：该方法的精密度和回收率高，检测过程中没有杂质干扰，是一种可靠的检测方法。
