胆脂瘤型中耳炎患者血清中对氧磷酯酶1和脂氢过氧化物的表达及意义*

金铭鑫, 张镭, 申琪

1开封市中心医院耳鼻喉科(河南开封 475000)； 2河南中医药大学第一附属医院耳鼻喉科(河南郑州 450000)

胆脂瘤型中耳炎即中耳胆脂瘤，发病部位为中耳，可侵蚀中耳及内耳结构，随着病情发展，可导致听力下降、耳鸣等症状，若不及时干预，甚至引起严重的颅内外并发症，对患者生命安全构成一定威胁[1-2]，因此，对于胆脂瘤型中耳炎患者早期发现与治疗具有重要意义。然而其病因在临床中存在分歧，其形成的确切机制尚未完全明了[3-4]。对氧磷酯酶1(paraoxonase-1，PON1)是一种钙离子依赖性血清酯酶，作为体内重要的抗氧化酶，能够降低体内高氧化应激状态和脂质过氧化，与机体自身免疫性疾病和肿瘤等密切相关[5-6]。脂氢过氧化物(lipid hydroperoxides，LOOH)是一种有效抗氧化剂，由低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)中的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化形成，主要存在于血清中，其作为疾病血清检测指标具有优越性[7-8]。目前，关于PON-1、LOOH在胆脂瘤型中耳炎中的研究较少，故本研究通过测定胆脂瘤型中耳炎患者血清PON-1、LOOH水平，并探讨两者的临床意义，以期为临床防治胆脂瘤型中耳炎提供新的方向。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年5月至2019年10月于本院确诊的140例胆脂瘤型中耳炎患者为观察组，其中，男76例，女64例，平均年龄(36.25±9.41)岁，平均病程(14.63±2.12)年，根据患者临床表现分为：听力减弱者51例，外耳道流脓者47例，头痛者36例，伴有类脑膜炎表现者6例。另选择同期于本院体检的健康体检者140例为对照组，男72例，女68例，平均年龄为(35.82±8.75)岁。

纳入标准：(1)符合胆脂瘤型中耳炎临床诊断标准;(2)均经病理检查确诊为胆脂瘤型中耳炎；(3)患者意识清晰，沟通无障碍；(4)患者及其家属知情同意，并签署同意书。

排除标准：(1)具有心肾功能障碍者；(2)具有精神疾病史者；(3)具有认知功能障碍者；(4)患有其他严重的合并症或神经性疾病者。

本研究经本院道德伦理委员会批准通过，符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》。

1.2 检测指标及方法

1.2.1 标本采集 收集入选研究对象的临床资料，所有患者均于清晨抽取空腹静脉血3～5 mL，常温下静置，待血液凝固后2 500 r/min离心15 min，离心后分离上层血清并于-20℃储存待用。

1.2.2 血清PON-1水平测定 采用日立7060全自动生化分析仪，以对硝基苯酚为底物的速率法分批测定血清PON-1水平。

1.2.3 血清LOOH水平测定 采用铁-二甲苯酚橙色复合物(ferric-xylenol orange complex，FOX)法测定血清中LOOH水平。

1.2.4 超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)水平测定 采用乳胶增强免疫透射比浊法检测血清中hs-CRP水平。

1.2.5 低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein chesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)水平测定 于C8000全自动生化检测仪检测血清LDL-C和HDL-C水平。

1.2.6 丙二醛(malondialdehyde，MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)含量测定 采用硫代巴比妥酸法测定血清MDA含量，采用黄嘌呤氧化酶法测定血清SOD含量，试剂盒均由南京建成生物工程公司提供。

1.3 统计学方法 运用SPSS 20.0统计软件对数据进行处理，计数资料以例(%)表示，采用2检验；计量资料以表示，采用t检验；影响脂瘤型中耳炎发生的危险因素分析，采用logistic回归分析；血清PON-1、LOOH对胆脂瘤型中耳炎的诊断价值采用受试者工作特征(ROC)曲线分析；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较 观察组与对照组年龄、性别比较，差异无统计学意义(P>0.05)，观察组血清hs-CRP、MDA及LDL-C水平显著高于对照组，血清SOD、HDL-C水平显著低于对照组(P<0.05)，见表1。

2.2 两组血清PON-1、LOOH表达水平比较 观察组血清PON-1表达水平明显低于对照组，血清LOOH表达水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 一般资料比较

表2 两组血清PON-1、LOOH表达水平比较

2.3 患者血清PON-1、LOOH表达水平及其与氧化应激指标的相关性分析 Pearson法分析结果显示，胆脂瘤型中耳炎患者血清PON-1水平与hs-CRP、MDA水平均呈负相关，与SOD水平呈正相关；血清LOOH表达水平与hs-CRP、MDA水平均呈正相关，与SOD水平呈负相关；血清PON-1与LOOH水平呈负相关，差异均有统计学意义(P<0.05)，见图1～7。

注：r=-0.512，P<0.05

注：r=-0.424，P<0.05

2.4 logistic回归分析影响胆脂瘤型中耳炎发生的危险因素 以血清hs-CRP、MDA、SOD、HDL-C、LDL-C、PON-1及LOOH表达为自变量，以是否发生胆脂瘤型中耳炎为因变量，进行logistic回归分析，结果显示，血清hs-CRP、MDA及LOOH水平高均是影响胆脂瘤型中耳炎发生的独立危险因素，SOD、PON-1水平高是影响胆脂瘤型中耳炎发生的独立保护因素(P<0.05)，见表3。

注：r=0.512，P<0.05

注：r=0.473，P<0.05

注：r=-0.494，P<0.05

3 讨论

胆脂瘤型中耳炎是临床常见的一种耳鼻咽喉科疾病，好发于中青年人群，且发病率较高，早期症状不显著，缺乏特异性，病情易反复发作、病史长，主要特征为上皮细胞增生、角化上皮脱屑堆积和骨质破坏，主要临床表现为耳溢液、耳痛、听力下降等，随着病情发展，可造成面神经麻痹，严重者还将出现脑膜炎、脑脓肿等并发症，可直接对患者生命造成威胁，严重影响人类健康，因此，临床以早期确诊、及时进行手术为治疗原则，以清除病灶，解除胆脂瘤对患者机体的破坏[9-11]。

注：r=0.508，P<0.05

注：r=-0.530，P<0.05

表3 logistic回归分析影响胆脂瘤型中耳炎发生的危险因素

研究表明，炎症递质和氧化应激反应在中耳炎的发病中具有重要作用，当机体对抗外来抗原时，中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞产生氧自由基，参与胆脂瘤型中耳炎的慢性感染及组织损伤过程，由于氧自由基产生增多，而抗氧化物质不足以消除过多的氧自由基，其动态平衡被打破，体内氧化应激指标表现异常[12-13]。本研究结果显示，观察组血清hs-CRP、MDA、HDL-C及LDL-C水平显著高于对照组，血清SOD水平显著低于对照组，表明胆脂瘤型中耳炎患者氧化应激指标MDA含量升高，炎症指标hs-CRP也明显升高，抗氧化物质SOD水平降低，提示氧化应激反应和炎症反应可能参与胆脂瘤型中耳炎发生发展。

PON-1属于钙依赖酯酶，由肝脏合成和分泌，作为一种重要的抗氧化酶可清除脂质过氧化物，保护生物膜免受自由基的损伤，可有效降低LDL的氧化率。另外，PON-1还可作为抗炎症因子，对机体的抗炎症起着至关重要的作用，其水平可反映机体抗氧化损伤及抗炎症的能力[14-15]。相关研究表明，氧化应激损伤与中耳炎的发生发展有关，而PON-1水平降低会造成机体抗氧化能力减弱，当活性氧自由基超出机体的代偿清除能力时，会导致氧化抗氧化平衡失调[16-17]。本研究结果显示，观察组血清PON-1表达水平显著低于对照组，Pearson法分析结果显示，胆脂瘤型中耳炎患者血清PON-1水平与hs-CRP、MDA水平均呈负相关，与SOD水平呈正相关，进一步logistic回归分析结果显示，血清PON-1水平高是影响胆脂瘤型中耳炎发生的保护因素，表明PON-1可能参与脂瘤型中耳炎的发生发展。

自由基引发的脂质过氧化反应与许多疾病的发生发展有关。LOOH是一种主要存在于血液中的水解酯酶，是一种有效抗氧化剂，能够水解脂质过氧化物，降低体内的氧化应激状态和脂质过氧化[18-20]。相关研究表明，LOOH是评估HDL抗氧化功能的重要指标之一，其水平的升高，与中耳炎的发生具有一定关联[12-13,21-22]。本研究结果显示，观察组血清LOOH表达水平显著高于对照组，Pearson法分析结果显示，胆脂瘤型中耳炎患者血清LOOH表达水平与hs-CRP、MDA水平均呈正相关，与SOD水平呈负相关，进一步logistic回归分析结果显示，血清LOOH水平高是影响胆脂瘤型中耳炎发生的独立危险因素，表明脂质过氧化损伤可能参与胆脂瘤型中耳炎的发生发展，LOOH在胆脂瘤型中耳炎中起着重要作用。此外，本研究显示，血清PON-1与LOOH水平呈负相关，表明两者存在一定联系，其均具有抗氧化功能，可能在机体抗炎和抗氧化过程中发挥重要作用，共同参与胆脂瘤型中耳炎的发生发展，但两者的共同作用机制仍需进一步的研究和探讨。

综上所述，胆脂瘤型中耳炎患者血清PON-1表达水平降低，血清LOOH表达水平升高，是胆脂瘤型中耳炎发生的影响因素。但由于本研究是局限性，样本数量偏少，后期应加大样本进一步探讨血清PON-1、LOOH在胆脂瘤型中耳炎中的具体作用机制。