基于浮游生物完整性指数的不同循环饥饿投饲模式黄颡鱼养殖塘水质评价
2020-11-09张亚军秦秀东李恩军程光平李文红张伟刚孙玉章张曼崔亮赵晚晨
张亚军 秦秀东 李恩军 程光平 李文红 张伟刚 孙玉章 张曼 崔亮 赵晚晨
摘要：【目的】探索不同循環饥饿投饲模式对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）养殖塘水质状况的影响，筛选出基于优良水质的黄颡鱼池塘养殖循环饥饿投饲模式，为其规模化生态化养殖提供科学参考。【方法】按间隔3 d（X3组）、5 d（X5组）、7 d（X7组）和10 d（X10组）饥饿1 d等4种循环饥饿投饲模式养殖黄颡鱼，以正常投饲塘（X0组）为参照点，利用浮游生物完整性指数（P-IBI）评价各模式塘水体健康状况，比较分析P-IBI评价结果和灰色关联分析结果。【结果】最终筛选出Y2（浮游植物种类数）、Y14（浮游植物生物量）、Y19（浮游动物Margalef丰富度指数）、Y31（硅藻门相对丰度）、Y33（绿藻门相对丰度）和Y35（枝角类和桡足类相对丰度）作为构建P-IBI评价体系的指标。P-IBI分值显示，养殖中、后期各试验塘和参照点的水体健康状况均有所下降，至养殖结束时，X0、X3、X5、X7和X10各组的P-IBI分值比其初始值分别下降57.66%、19.30%、11.10%、30.08%和29.91%;各试验组的P-IBI平均值排序为X7
关键词： 黄颡鱼;浮游生物完整性指数;循环饥饿;水质评价
中图分类号： S964.3 文献标志码： A 文章编号：2095-1191（2020）07-1754-10
Abstract：【Objective】This study aimed to clarify the effects of different cycle starvation feeding modes on the water quality of Pelteobagrus fulvidraco pond，and to screen out the cycle starvation feeding mode of P. fulvidraco pond farming based on excellent water quality，so as to provide scientific reference to its large-scale ecological farming. 【Method】The four feeding modes was no-feeding P. fulvidraco for 1 d with an interval of 3 d（X3 group），5 d（X5 group），7 d（X7 group） and 10 d（X10 group），respectively，with the normal feeding group（X0 group） as control. The water quality of each model pond was evaluated by Plankton Integrity Index（P-IBI） ， and results by P-IBI and gray correlation were compared. 【Result】The results showed that，Y2（phytoplankton species number），Y14（phytoplankton biomass），Y19（zooplankton Margalef abundance index），Y31（Bacillariophyta relative abundance），Y33（Chlorophyta relative abundance），and Y35（Cladocera and Copepods relative abundance） were selected as the indicators to construct the P-IBI evaluation system. The P-IBI showed that，the water status of each experimental pond and the reference points in the middle and later stage of the breeding decreased to some degrees. By the end of the breeding，the P-IBI scores of groups X0，X3，X5，X7 and X10 decreased by 57.66%，19.30%，11.10%，30.08% and 29.91%，respectively， compared with their initial values. The P-IBI mean value of each group was sorted through small to large as groups X7
Key words： Pelteobagrus fulvidraco; plankton index of biotic integrity（P-IBI）; circular starvation; evaluation of water quality
Foundation item： Guangxi Key Research and Development Plan Project（Guike AB16380057）; Guangxi Science and Technology Major Project（Guike AA17204095-2）
0 引言
【研究意义】黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）又名黄腊丁、昂刺、黄骨鱼等，属鲇形目（Siluriformes）鲿科（Bagridae）黄颡鱼属（Pelteobagrus）。其肉质细嫩，味道鲜美，营养价值高，深受消费者喜爱。近年我国黄颡鱼养殖产业发展迅猛（姚清华等，2018），但随着养殖规模的扩大和养殖产量的提高，养殖塘生态系统受到不同程度破坏，导致养殖对象病害增多、品质下降、成活率较低及养殖成本升高，严重影响其养殖经济效益（邓先余等，2008;丁正峰等，2008）。因此，科学改进投饲模式，提高输入饲料的利用率，以及降低残饵和养殖鱼类排泄物对养殖水环境的影响，对实现黄颡鱼规模化池塘生态养殖具有重要意义。【前人研究进展】循环饥饿投饲能诱导鱼类处于饥饿状态，而在饥饿状态下再投喂饲料，鱼类会获得补偿生长（Ali et al.，2003;Peres et al.，2011;阮国良等，2016;王润等，2018）。苏胜彦等（2017）研究表明，循环饥饿投喂方式能激发幼鱼产生补偿生长效应，且饲料投喂量最少。王成桂等（2017）研究发现，饥饿可提高珍珠龙胆石斑鱼[Epinephelus fuscoguttatus（♀）×E. lanceolatus（♂）]幼鱼饵料利用率。王润等（2018）研究认为，适宜的循环饥饿投饲策略能增加珍珠龙胆石斑鱼食欲，提高其摄食率;同时由于饲料消化率的提高、饲料系数的降低及饲料投喂量的减少，水体水质情况得到一定程度改善。近年来，养殖水体水质评价体系变得越来越多样化。Karr（1981）首次提出以鱼类为研究对象建立生物完整性指数（Index of biotic integrity，IBI），并对北美水生态系统进行健康评价。IBI可定量描述人类干扰与生物特性间的关系，且该指数对干扰反应敏感（Ode et al.，2005）。IBI评价体系不仅通过鱼类（刘春池等，2017）构建，还逐渐扩展到以浮游生物（娄方瑞等，2015）、藻类（杨燕君等，2017）、底栖动物（孔凡青等，2018）和微生物（朱文婷等，2019）构建，并应用于评价养殖水体健康状况。浮游生物作为水生态系统中生物链和生产力的基础，对水生态系统的结构及功能有重要影响（张婷等，2014），其IBI能很好地指示人为干扰导致的水质变化情况，在水质评价中已得到广泛运用（谭巧等，2017;黎明民等，2018;崔亮等，2019）。【本研究切入点】迄今，与循环饥饿投饲有关的研究主要集中在对养殖鱼类的补偿生长方面，而评价此类投饲模式对养殖水环境影响方面的研究鲜见报道。【拟解决的关键问题】采用浮游生物完整性指数（Plankton index of biotic integrity，P-IBI）及灰色关联分析评价4种循环饥饿投饲模式对黄颡鱼养殖塘生态健康状况的影响，以期筛选出基于优良水质的黄颡鱼池塘养殖循环饥饿投饲模式，为黄颡鱼规模化生态化养殖提供科学参考。
1 材料与方法
1. 1 试验塘概况
试验塘为广西桂林市某农牧有限公司的9口生产性黄颡鱼养殖塘，各塘面积0.40～0.65 ha，水深约2 m，土质塘堤，底泥厚度约40 cm。主养鱼为平均体重0.9 g/尾的杂交黄颡鱼，各塘放养密度均为45.0万尾/ha;配养平均体重125 g/尾的鳙（120尾/ha）和46 g/尾的鲫（3300尾/ha）。试验用饲料为广东奥特饲料有限公司生产的海龙牌黄颡鱼膨化配合饲料，粗蛋白含量≥40%。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 投饲模式及养殖管理 试验设X3（间隔3 d饥饿）、X5（间隔5 d饥饿）、X7（间隔7 d饥饿）和X10（间隔10 d饥饿）4个试验组，每组设2个平行塘，另设X0（正常投饲）为对照组。各塘均用自动投饲机投饲，按基于放养量（密度）和生长状况估算的存塘黄颡鱼重量计算各塘每天的理论投饲量，每10 d调整日投饲量1次;按设定的不同间隔周期停食，每个间隔周期停食1 d。具体投饲中，以所投饲1 h后的剩余状况判断当天实际投饲量及确定次日投饲量。除间隔饥饿周期外，各塘管理方法相同。试验期共146 d。
1. 2. 2 样品采集与分析 黄颡鱼鱼种放养10 d后开始采样，之后每隔1个月左右采样1次。采样点设在投饲台附近，所采水样为0.5、1.0和1.5 m水层的混合水样。水环境因子样品采集与测定参照魏复盛（2002）、国家环境保护总局（2009）的方法，采集1 L水样分至2个500 mL水样瓶中，测定项目包括透明度（SD）、水温（WT）、总磷（TP）、总氮（TN）、溶解氧（DO）、五日生化耗氧量（BOD5）、化学需氧量（CODMn）、氨氮（NH3-N）、亚硝态氮（NO2-N）和叶绿素a（Chla）;浮游生物樣本采集与测定参考韩茂森（1980）、张觉民和何志辉（1991）、周凤霞和陈剑虹（2005）、翁建中（2010）的方法，分别采集浮游动物和浮游植物的水样，将其浓缩至1 L，加入甲醛和鲁哥氏液固定，带回实验室静置沉淀24 h，收集底部的浮游生物，定容至50 mL，在200倍显微镜下鉴定到属，并计数。计数结果在Excel 2019中进行统计。计数公式如下：
N=[n×vM×V]
式中，N为1 L水样中的浮游生物个数（ind/L），n为计数所获得的个体数（ind），v为沉淀体积（mL），M为计数体积（mL），V为采样体积（L）。
1. 2. 3 P-IBI指标构建 参照杨燕君等（2017）的方法构建P-IBI评价体系，选取35个可充分反映浮游生物群落丰富度、营养结构和群落结构的指标作为P-IBI初选生物学指标（表1）。
1. 2. 4 P-IBI指数计算 参照朱文婷等（2019）的方法，通过分布范围、判别能力和相关性分析对初选指标进行筛选，构建P-IBI评价体系;参照Blocksom等（2002）提出的比值法，对构建的P-IBI评价体系进行赋值计算。
1. 2. 5 参照点选择 目前参照点的选取尚无统一标准。由于X0组采用持续投喂方式，可准确反映目前规模化黄颡鱼养殖塘水质状况。因此，参考Stoddard等（2006）的参照点选择法，选取主养鱼、池塘条件和日常管理等相同，且人为干预最少的X0号塘为参照点。
1. 2. 6 水质灰色关联分析 灰色关联分析是对系统内部事物间的状态进行量化比较分析的方法（翟国静，1996），利用数列的可比性定量刻画系统内部主要因素间的相关程度（陈琴等，2019），能量化指示水质的变化情况（赖坤容和周维博，2010;王平和王云峰，2013）。将养殖塘水体作为一个灰色系统，参照GB 3838—2002《地表水环境质量标准》的水质分类，得出水体的水质状况（章新等，2010），然后研究P-IBI与环境因子的相关性。
为消除不同量纲的影響，采用均值法对水环境因子实测值进行无量纲化处理，无量纲化公式如下：
Xb（K）=[X（0）b（K）1na=1nX（0）a（K）]
式中，Xb（K）为b检测时期水域评估样品的K项指标的无量纲化值，Xb（0）（K）为b检测时期水域评估样品各水质指标的实测值，Xa（0）（K）为水环境质量分类标准中各评估指标的标准值。
关联系数计算公式如下：
εij（k）=[Δmin+ρΔmaxΔij（k）+ρΔmax]
式中，Δij（k）=|xi（k）-yi（k）|，即{xi（k）}与{yi（k）}在第k项差值的绝对值;Δmin和Δmax分别为Δij（k）的最小值和最大值;ρ为分辨系数，本研究中ρ=0.5。
关联度计算公式如下：
ri=[1ni=1nεi（k）]
式中，n为水质评价指标个数，εi（k）为第i项k指标的关联系数。
2 结果与分析
2. 1 不同投饲模式的投饲总量
试验结束，各组投饲模式的投饲量如表2所示，X0组单位面积投饲量最高，为27000 kg/ha，各试验组均低于X0组，其中X3组最低，为13922 kg/ha，比X0组少投48.44%。
2. 2 初选指标的筛选结果
通过对初选指标分布范围的筛选，排除90%指标数值得分为0的指标Y3和Y8，用SPSS 25.0构建箱体图，对其余指标进行判别能力筛选。依据参照点和各试验塘监测指标25%～75%分位数的箱体图重叠情况对各指标进行判别筛选：参照崔亮等（2019）的方法，选取试验塘为监测点，定义监测点和参照点中位线均位于对方箱体内为IQ<1;有1个中位线位于对方箱体内定义为IQ>1;2个中位线均不在对方箱体内定义为IQ>2。去掉IQ<1的指标，筛选出Y1、Y2、Y7、Y11、Y12、Y14、Y19、Y20、Y23、Y24、Y25、Y26、Y28、Y31、Y32、Y33、Y34和Y35共18个指标。然后继续使用SPSS 25.0对筛选出的18个指标进行Pearson相关性分析，筛选出Y2（浮游植物种类数）、Y14（浮游植物生物量）、Y19（浮游动物Margalef丰富度指数）、Y31（硅藻门相对丰度）、Y33（绿藻门相对丰度）和Y35（枝角类和桡足类相对丰度）6个指标（图1，表3）作为本研究P-IBI评价体系的指标。
2. 3 P-IBI各指标对环境干扰的反应度判断
循环饥饿主要是利用养殖对象的补偿生长效应，间接降低养殖水体的氮、磷含量（Blanquet and Oliva-Teles，2010），进而影响浮游生物丰度。因此，本研究将所选指标Y2和Y19对环境干扰的反应度定义为下降，其余指标对环境干扰的反应度定义为上升（表4）。
2. 4 P-IBI评价标准的建立
根据各评价指标对环境干扰的反应度，利用比值法确定P-IBI各指标值，再将各指标值相加，得到该组的P-IBI分值。将参照点P-IBI分值的25%分位数（3.247）作为健康评价的标准，当试验塘的P-IBI分值大于健康标准即视该塘为健康;将小于健康标准的范围进行4等分，共确定健康、亚健康、一般、差和极差5个水质等级（表5）。
2. 5 P-IBI评价结果
在P-IBI评价体系中，P-IBI分值与养殖塘的水质健康状况有关，P-IBI分值越大，代表水质健康状况越好，反之则表示健康状况越差。与P-IBI评价标准（表5）比对评价各组塘水质状况，结果（表6）显示，在4种不同投饲模式塘健康状况中，X3组P-IBI分值变动范围为2.559～3.671，平均值为3.183;X5组P-IBI分值变动范围为3.220～4.486，平均值为3.693;X7组P-IBI分值变动范围为2.208～3.470，平均值为2.862;X10组P-IBI分值变动范围为2.493～3.763，平均值为3.048;4种投饲模式塘的P-IBI平均值排序为X7 随着养殖进行，养殖对象生长和饲料输入量不断增加，养殖中、后期各试验塘和参照点的健康状况均有所下降，但下降程度不一致。X3组为2个健康和3个亚健康;X5组为4个健康和1个亚健康;X7组为1个健康、2个亚健康和2个一般;X10组为2个健康和3个亚健康;参照点（X0组）为3个健康、1个亚健康和1个一般（表6）。从试验开始到结束，X0、X3、X5、X7和X10各组养殖塘P-IBI分值比其初始值分别下降57.66%、19.30%、11.10%、30.08%和29.91%;对应的P-IBI分值降幅排序为X5 2. 6 P-IBI与环境因子的相关性分析结果 使用SPSS 25.0对各组P-IBI分值和水环境因子数据进行Pearson相关性分析，结果（表7）显示，P-IBI与WT和TP分别呈显著正相关和负相关（P<0.05），与其他环境因子的相关性不显著（P>0.05）。 2. 7 基于不同循环饥饿投饲模式的黄颡鱼养殖塘水质灰色关联分析结果 以GB 3838—2002《地表水环境质量标准》中的5类水质级别为标准，对其进行无量纲化处理（表8），将无量纲化处理后的各塘实测值与其进行关联度计算，结果如表9所示。关联度越大，说明该水质越接近相应水质级别，判定关联度最大时对应的水质类别即为其水质级别。由表9可知，4组试验塘水质综合判定均为Ⅲ类，参照点也为Ⅲ类;在动态变化上，至试验末期参照点和X7组水质为Ⅳ类，其余试验塘水质均为Ⅲ类。从5个监测期来看，X7、X10和X0组均有2个时期为Ⅳ类水，水质状况相对较差;X3和X5组塘均只有1个时期为Ⅳ类水质，同时有1个时期出现Ⅱ类水质，水质状况相对较好。 3 讨论 3. 1 不同循环饥饿投饲模式对养殖塘健康状况的影响 养殖环境中，鱼类会面临食物匮乏等极端条件，在饥饿胁迫环境下，鱼类机体的能量物质会不断被消耗（朱站英等，2012），代謝水平减弱（曾令清等，2015），免疫力降低（华雪铭等，2012），酶活性发生改变（Azodi et al.，2015）等;同时鱼体通过自身代谢机能的改变以适应这种饥饿胁迫（Azodi et al.，2015）。养殖水体中的氮、磷输入主要来自饲料，而氮、磷是构成生物体各组分的重要元素，是决定浮游生物生长的重要营养元素，对水体中的水生生物及水质状况起着重要作用（周劲风和温琰茂，2004;宣雄智等，2019）。不适宜的投饲模式会导致养殖塘水质败坏，间接影响鱼类的生长状况，从而导致养殖效益极大降低;而适宜的投饲模式既能使养殖水体保持健康状态，养殖鱼类获得补偿生长，又可提高饲料利用效率，降低饲料能耗及其成本，提高经济效益（Huang et al.，2008;Blanquet and Oliva-Teles，2010）。健康的水生态系统具有稳定性和可持续性，即在时间上具有维持其组织结构自我调节和对胁迫的恢复能力（廖静秋和黄艺，2013）。王润等（2018）研究发现循环饥饿模式处理下的试验水体明显优于持续投喂的对照水体，在间隔3 d饥饿的投饲模式下，水质状况显著优于持续投喂组的水质状况。本研究中，4组试验塘生态健康状况总体上均优于参照塘，其中X5组塘（间隔5 d饥饿）的平均P-IBI分值最高，健康状况最好，且健康状况保持度较好，与王润等（2018）的研究结果相似。分析P-IBI可知，利用饥饿可增加鱼类对于饲料的利用率，减少水体中营养盐的富集，同时通过饥饿提高养殖对象对部分浮游生物的摄食率，降低养殖水体富营养化压力（Blanquet and Oliva-Teles，2010）。此外，循环饥饿还有助于刺激黄颡鱼食欲及提升饲料利用率，减少外源饲料输入量（韩春艳等，2014），在一定程度上改善养殖水体的水质状况。 3. 2 P-IBI评价与水化指标间的关系 P-IBI主要受浮游生物群落结构的影响，浮游生物群落与水环境因子关系密切，其种类组成和物种多样性随着环境的变化而变化，不同水体中，环境因子对浮游生物群落结构的影响也有差异（张婷等，2014）。李喆等（2014）研究发现，WT、CODMn、TP和SD是影响浮游植物群落结构的主要环境因子。崔亮等（2019）研究表明，CODMn、WT和pH是与浮游生物群落结构关联度较高的环境因子。本研究的灰色关联分析结果表明，在5个多月（5次）的监测中，X3组和X5组的水质级别仅有1次为Ⅳ类水，且都有1次为Ⅱ类水，P-IBI评价亦显示X5组P-IBI分值最高，表明水质好坏与环境因子和浮游生物种群组成密切相关，浮游生物多样性从生物视角揭示了养殖水体的健康状况。P-IBI与水环境因子相关性分析结果表明，P-IBI与WT和TP呈显著相关，而WT的变化会导致浮游动物新陈代谢强度、生长发育和繁殖周期的改变，进而影响其群落结构的变化（Lenz et al.，2005;林青等，2014）及水体生态健康状况。 4 结论 循环饥饿投饲模式中处于饥饿期的黄颡鱼对饲料利用率较高，减少养殖塘中残饵的富集;同时饥饿期黄颡鱼直接或间接利用养殖塘中的浮游生物，在一定程度上能保持浮游生物群落结构相对稳定，达到改善水质的目的。综合分析水质因子和P-IBI得出，间隔5 d饥饿1 d的投饲模式有助于改善黄颡鱼养殖塘水质状况。 参考文献： 陈琴，高胜男，李恩军，程光平，崔亮，赵学倩，何绪伟，秦秀东. 2019. 基于两种生物浮床的养殖池塘中浮游动物多样性与水质的灰色关联性分析[J]. 广东农业科学，46（2）：137-146. 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