VCA-IgM、AI及细胞免疫功能在EB病毒感染患儿诊断中的应用价值

潘万贵 蒋福亮 胡海燕 林毅辉

【摘要】 目的：研究衣壳抗原IgM抗体（VCA-IgM）、衣壳抗原IgG抗体（VCA-IgG）亲和力指数（AI）及细胞免疫功能在EB病毒（EBV）感染患儿诊断中的应用价值。方法：选择2016年8月-2019年10月本院诊治的85例EBV感染患儿作为研究组，分为传染性单核细胞增多症（IM）组（47例）和嗜血细胞综合征（HPS）组（38例），另选取同期健康儿童50例作为对照组。比较三组的VCA-IgM、AI水平以及细胞免疫功能指标，并利用ROC曲线分析其诊断价值。结果：IM组和HPS组的VCA-IgM、CD3+、CD8+均明显高于对照组，且IM组均明显高于HPS组（P<0.05）;IM组和HPS组的AI、CD4+以及CD19+均低于对照组，IM组的AI、CD4+均明显低于HPS组，CD19+高于HPS组（P<0.05）。联合诊断的AUC为0.942，明显高于各指标单项检测的AUC，敏感度为95.5%，特异度为93.8%。结论：VCA-IgM、AI以及细胞免疫功能指标均可为EBV感染的诊断提供判断依据，联合检测上述指标对于EBV感染具体类型的鉴别诊断有重要的辅助作用。

【关键词】 衣壳抗原IgM抗体 衣壳抗原IgG抗体 亲和力指数 细胞免疫功能 EB病毒

[Abstract] Objective： To investigate the diagnostic value of VCA-IgM， VCA-IgG affinity index （AI） and cellular immune function in children with EB virus （EBV） infection. Method： A total of 85 children with EBV infection diagnosed and treated in our hospital from August 2016 to October 2019 were selected as the study group， they were divided into infectious mononucleosis （IM） group （47 cases） and haemophilic syndrome （HPS） group （38 cases）， and 50 healthy children of the same period were selected as the control group. The levels of VCA-IGM， AI and cellular immune function of the three groups were compared， and the diagnostic value was analyzed by ROC curve. Result： VCA-IgM， CD3+， CD8+ in IM group and HPS group were significantly higher than those in control group， and those in IM group were significantly higher than those in HPS group （P<0.05）; AI， CD4+ and CD19+ in IM group and HPS group were lower than those in control group， AI and CD4+ in IM group were significantly lower than those in HPS group， and CD19+ in IM group was higher than that in HPS group （P<0.05）. The AUC of combined diagnosis was 0.942， which was significantly higher than that of single detection， the sensitivity and specificity were 95.5% and 93.8%， respectively. Conclusion： VCA-IgM， AI and cellular immune function indicators can provide judgment basis for the diagnosis of EBV infection， and combined detection of the above indicators has an important auxiliary role in the differential diagnosis of specific types of EBV infection.

[Key words] VCA-IgM VCA-IgG Affinity index Cellular immune function EB virus

First-authors address： Quanzhou Womens and Childrens Hospital， Quanzhou 362000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.23.032

Epstein-Barr病毒（EBV）是一種疱疹病毒科嗜淋巴细胞病毒，在绝大部分成人身上均有携带，具有较高的感染率[1]。儿童处于生长发育阶段，其自身免疫功能尚未发育完全，也是EBV感染的多发人群，有研究显示，儿童血清EBV抗体检测阳性率高达80%以上[2]，严重威胁患儿生命健康，导致部分患儿出现发热、淋巴结肿大等症状，并伴有乏力、恶心、腹胀腹泻等消化道症状，甚至出现神经系统症状。但是EBV感染大多为急性过程，病程较短，感染的临床类型较为复杂，大多数患儿感染后并未出现上述症状，导致在诊断过程中出现漏诊、误诊情况，从而延误治疗时机。血清学检查是目前临床诊断EBV感染的主要方法，而衣壳抗原IgM抗体（VCA-IgM）和衣壳抗原IgG抗体（VCA-IgG）是EBV感染早期出现的抗体[3]，另有研究表明，机体细胞免疫功能也与EBV感染的发生息息相关[4]，故本研究致力于探讨上述指标在EBV感染患儿诊断中的应用价值，为临床及早确诊提供新的依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2016年8月-2019年10月本院診治的85例EBV感染患儿临床资料。诊断标准：实验室检查中VCA-IgM以及VCA-IgG均为阳性;聚合酶链式反应检测其DNA为阳性，上述两项满足任意一项即可确诊。纳入标准：（1）均经血常规以及血清免疫学检查确诊;（2）年龄1～12岁;（3）均为首次感染;（4）患儿临床资料完整。排除标准：（1）疱疹病毒感染者;（2）合并其他严重疾病感染者;（3）合并自身免疫类缺陷疾病患儿。根据患儿病毒感染类型分为传染性单核细胞增多症（IM）组（47例）和嗜血细胞综合征（HPS）组（38例），IM诊断标准：①患儿存在扁桃体或者咽部炎症反应;②颈部淋巴结或者肝脾肿大;③发热;④血常规检查中计数淋巴细胞或者异型淋巴细胞总数超过5×109/L，上述条件任意满足其中3项即可确诊。HPS诊断标准：①患儿存在一周以上发热现象;②脾肿大;③血常规检查显示全血细胞减少，并累及血红蛋白、血小板等;④对骨骼或淋巴细胞进行涂片检查显示存在吞噬细胞，但无恶变迹象;⑤NK细胞活性明显降低;⑥铁蛋白超过500 μg/L;⑦空腹甘油三酯超过3 mmol/L或纤维蛋白原低于1.5 g/L;⑧可溶性白细胞介素-2受体超过2 400 U/mL，满足上述任意5项即可确诊[5]。另选取同期来本院进行体检的50例健康儿童作为对照组，排除存在急性、慢性或者家族遗传性疾病史患儿。本次研究经本院伦理委员会批准。

1.2 检测方法

1.2.1 细胞免疫功能指标 采用乙二胺四乙酸抗凝管采集所有研究对象静脉血标本，离心分离收集血清，在24 h内采用流式细胞仪（美国BD医疗器械有限公司，型号为BD FACSCalibur）对细胞免疫功能进行检查，即淋巴细胞亚群百分数。采用外周淋巴T/B细胞标对标本进行标记筛查，用于检测CD3+、CD4+、CD8+以及CD19+，操作流程严格按照使用说明书进行。

1.2.2 VCA-IgM、亲和力指数（AI） 采用酶联免疫吸附法检测患儿VCA-IgM和VCA-IgG（高亲和力）、VCA-IgG，试剂和仪器均由上海翊圣生物科技有限公司提供，检测方法严格按照使用说明书进行。其中VCA-IgM阳性判断标准：标本与标准吸光度的比值在0.80及以上即可确诊;VCA-IgG（高亲和力）以及VCA-IgG吸光度比值的百分比即为AI。

1.3 观察指标 （1）比较三组患者VCA-IgM、AI及细胞免疫功能指标水平。（2）比较三组患者VCA-IgM、AI及细胞免疫功能各项指标的检测阳性率。（3）利用logistic回归筛选变量，并绘制ROC曲线，对上述指标单项以及联合的诊断效能进行分析。

1.4 统计学处理 SPSS 20.0统计软件分析数据。计量资料用（x±s）表示，多组计量数据比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验;各项指标的诊断效能采用ROC曲线进行分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较 IM组：男29例，女18例;年龄1～11岁，平均（5.54±2.67）岁。HPS组：男23例，女15例;年龄2～12岁，平均（5.83±1.85）岁。对照组：男30例，女20例，年龄1～12岁，平均（6.01±2.21）岁。三组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 三组VCA-IgM、AI和细胞免疫功能指标水平比较 IM组和HPS组的VCA-IgM、CD3+、CD8+均明显高于对照组，且IM组均明显高于HPS组;IM组和HPS组的AI、CD4+以及CD19+均低于对照组，且IM组AI、CD4+均明显低于HPS组，CD19+高于HPS组（P<0.05）。见表1。

2.3 VCA-IgM、AI及细胞免疫功能指标水平诊断效能 VCA-IgM、AI及细胞免疫功能指标联合诊断的AUC为0.942，明显高于各指标单项检测的AUC，敏感度为95.5%，特异度为93.8%，见图1、表2。

3 讨论

EBV感染作为儿科常见病毒感染性疾病，具有症状复杂、病情进展迅速、累及器官系统多等特点，现阶段临床上将EBV感染类型主要分为IM、HPS等，但在早期诊断中，多根据患儿症状、实验室常规检查等进行区分，一方面部分患儿在早期感染时并未出现较为典型的临床症状，另一方面，部分患儿血清抗体在感染后存在产生延迟、持续时间短等现象，导致实验室检查在诊断中容易出现假阳性、假阴性，给临床确诊EBV感染带来了较大的困难[6]。此外，不同类型的病毒感染其治疗方法不同，在早期EBV诊断中及早鉴别病毒感染类型对于患儿的治疗以及预后具有重要价值。

VCA-IgM是EBV感染时最早出现的抗体，一般在急性感染两周内出现，具有较高的敏感度和特异度，故临床上将其作为EBV诊断的重要依据之一，但大量临床实践证实该指标仍存在一定的误诊和漏诊，主要原因是机体的免疫过程相对比较复杂，在感染后VCA-IgM抗体的产生可能出现延迟、持续阴性、持续阳性等情况，同时部分患儿体内抗体检测还受母体遗传的影响，在EBV感染再激活等原发性感染的多克隆激活时出现，故仅凭单项VCA-IgM抗体阳性诊断还具有一定的缺陷[7]。EBV感染后其次出现的是VCA-IgG抗体（低亲和力），随着疾病的持续进展，在感染后期，机体将产生高亲和力的VCA-IgG抗体。近年来，随着临床对EBV感染诊断方法的深入研究，发现病原体入侵机体后，会导致VCA-IgG抗体亲和力发生较为显著的动态变化，即抗体亲和力升高，故低亲和力的检出即提示为原发性感染。黄倩雯等[8]研究对EBV感染患者发病10 d内进行血清检测，90%以上的患者会出现低亲和力VCA-IgG抗体阳性结果，且约一半的患者在30 d内仍显示为阳性。本研究针对EBV感染患儿以及健康儿童进行血清检查，结果显示IM组以及HPS组的VCA-IgM均明显高于对照组（P<0.05），AI均明显低于对照组（P<0.05），与既往文献[9]研究相一致，进一步证实EBV感染发生会导致患儿机体VCA-IgM和AI水平异常。此外，本研究还显示IM组与HPS组的VCA-IgM和AI水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05），提示上述指标可为EBV病毒感染类型鉴别提供依据。