同型半胱氨酸水平与脑血管病认知损伤的关系

李 娜 ，阮炎鹏 ，周磊乐* （. 广东省开平市中心医院内三科，广东江门 59300；. 广东省江门市人民医院神经内科二区，广东江门 59000）

脑血管疾病是因颅内血液循环障碍而造成脑组织损害的一类疾病，临床上以急性发病居多，典型症状包括恶心、口齿不清、流涎、意识障碍、半身不遂等。近年来，脑血管病的发病率不断上升，并出现低龄化趋势，构成了严重的公共卫生问题。同型半胱氨酸(Hcy)是甲硫氨酸代谢的重要中间产物，血浆中Hcy水平升高超过正常范围称为高同型半胱氨酸血症(HHcy)。血浆总Hcy水平与心脑血管疾病及外周血管疾病密切相关[1]。因此，探讨Hcy与脑血管病发生、发展和认知损伤的相关性，可为脑血管病患者的临床治疗与预防提供借鉴。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取作者单位两家医院确诊的脑血管病患者100例作为研究组，其中男46例，女54例，年龄50～75岁，平均69.3岁。所有病例均符合1995年中华医学会第四届全国脑血管病会议修订的标准，并经头颅CT或MIR证实，排除可能影响血浆Hcy水平的因素。另选取同期体检的健康者100例为对照组，其中男40例，女60例，年龄51～73岁，平均68.2岁。受检者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 Hcy和炎症相关因子水平的测定两组在标本采集前1 d忌高蛋白饮食，次日清晨采集空腹静脉血5 mL，静置30 min，离心，分离血清和血浆。Hcy含量采用全自动生化分析仪进行测定，操作按仪器和试剂说明书进行。血浆Hcy正常水平为5～15 μmol/L，血浆Hcy＞15 μmol/L时即可诊断为HHcy。同时采用德国拜耳公司ADVIA Centaur全自动化学发光免疫分析仪及配套试剂测定叶酸和维生素B12含量；酶联免疫试剂盒测定超敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。

1.2.2 认知功能的测定 采用精神状态量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)进行测定。MMSE包括注意力、定向力、计算能力等，总分为30分，＜24分为可疑痴呆，分数越高认知功能越好[2]。MoCA包括空间执行功能、语言功能、抽象思维等，总分30分，＜26分为认知功能轻度损害，≥26分为正常，分数越高认知功能越好[3]。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 Hcy水平和HHcy发生率的比较

研究组Hcy水平为(18.65±5.35) μmol/L，高于对照组的(9.46±4.25) μmol/L；研究组HHcy有41例(41%)，高于对照组的7例(7%)，差异均有统计学意义(P＜0.01)。

2.2 叶酸和维生素B12含量的比较

研究组患者的叶酸和维生素B12含量均低于对照组(P＜0.01)，见表1。

表1 叶酸和维生素B12含量的比较 (±s，n=100)

表1 叶酸和维生素B12含量的比较 (±s，n=100)

两组比较均P＜0.01

组别研究组对照组叶酸/(mg/L)7.25±4.46 14.36±3.58维生素B12/(μg/L)324.62±167.82 486.42±245.68

2.3 hs-CRP、MMP-9、TNF-α水平的比较

研究组患者的hs-CRP、MMP-9和TNF-α水平均高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)，见表2。

表2 hs-CRP、MMP-9、TNF-α水平的比较(±s，n=100)

表2 hs-CRP、MMP-9、TNF-α水平的比较(±s，n=100)

两组比较均P＜0.01

组别研究组对照组hs-CRP/(mg/L)17.74±6.25 2.53±1.35 MMP-9/(μg/L)25.42±2.36 12.54±1.62 TNF-α/(μg/L)48.65±6.33 13.36±1.94

2.4 认知功能情况

研究组的MMSE和MoCA评分均低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 认知功能的比较(±s，n=100)

表3 认知功能的比较(±s，n=100)

两组比较均P＜0.05

组别 MMSE评分研究组 23.15±2.63对照组 29.22±1.31 MoCA评分20.92±3.21 29.51±1.43

2.5 研究组不同Hcy水平患者认知功能的情况分析

Hcy水平越高，MMSE和MoCA得分越低，差异有统计学意义(P＜0.01)，见表4。

2.6 Hcy水平与认知功能关系的Pearson相关分析

血浆Hcy水平与MoCA、MMSE得分呈负相关(r=-0.685、-0.623，均P＜0.05)，见图1。

表4 研究组不同Hcy水平患者认知功能的情况分析(±s)

表4 研究组不同Hcy水平患者认知功能的情况分析(±s)

与＜15 μmol/L比较： aP＜0.01；与15～20 μmol/L比较：bP＜0.01

Hcy/(μmol/L)＜15 15～20＞20 n 26 40 34 MMSE评分28.58±1.56 MoCA评分27.85±1.75 23.60±2.42a 21.63±2.72a 21.41±2.51ab 18.30±2.63ab

图1 Hcy水平与认知功能关系的Pearson相关分析

3 讨论

脑血管病是当今世界严重影响人类生活质量及威胁人类生命的疾病。随着老龄化社会人口结构的变化，相关风险因素的不断上升，脑血管疾病的发病率亦逐年稳步上升，是发展中国家和发达国家发病率和死亡率的主要原因[4-6]。Hcy又称高半胱氨酸，是一种含硫氨基酸，来源于蛋氨酸，是蛋氨酸分解代谢的重要中间产物。Hcy在体内主要有两条代谢通路：转硫作用合成胱硫醚和再甲基化成蛋氨酸。甲硫氨酸在代谢过程中发生脱甲基等一系列反应，可产生Hcy，所产生的Hcy可进一步在甲硫氨酸合成酶的催化下以维生素B12为辅助因子，以N5-甲基四氢叶酸为甲基供体再次合成甲硫氨酸[6]。各种原因导致Hcy在体内蓄积超过正常范围，称为HHcy。自1969年McCully报道先天酶缺陷致HHcy患儿出现广泛的动脉粥样硬化的病理机制以来，对HHcy与疾病的相关性研究越来越多，尤其在致病机制方面越来越引起科研工作者的重视。研究表明，Hcy水平增高与心血管疾病有密切的关系[7]。C反应蛋白(CRP)属于pentaxin家族，由5个相同的亚单位以共价键结合呈环状五聚体。基于其识别外来病原体和宿主受损细胞的能力，它参与了多种与宿主防御相关的过程，以及通过与血液中的体液和细胞效应系统相互作用消除病原体。因此，在对组织损伤、感染或其他炎症刺激的急性反应期间，血浆CRP水平升高。hs-CRP是由肝脏合成的一种非特异性炎症反应标志物。研究证明，hs-CRP参与了动脉硬化和血栓形成的病理过程，是心血管疾病危险事件的重要危险因素之一。在英国老年人中进行的一项Framingham大样本研究表明，血浆hs-CRP水平较高的男性和女性发生缺血性卒中的相对危险系数分别增加了2和2.7倍[8]。hs-CRP对动脉粥样化发展预测中有重要的检测价值。MMP-9属于基质金属蛋白酶(MMP)家族，在正常生理过程中参与细胞外基质的分解，如胚胎发育、繁殖和组织重构，并且还在关节炎等疾病进程中发挥作用。MMP-9可降解细胞外基质中IV型胶原，参与脑基底膜降解，可破坏脑血管屏障，增加脑血管通透性，促进脑水肿形成。MMP-9也可作为炎症因子参与脑卒中的发生，并在脑卒中继发性损伤过程中起到重要的作用，在脑梗死患者中通过蛋白水解作用破坏毛细血管，引起脑微血管、血脑屏障通透性的改变，从而导致缺血后继发性的脑水肿和脑出血。MMP-9是参与粥样斑块形成过程中细胞外基质降解的关键因子。HHcy可通过激活MMP-9影响脑卒中的病理过程。TNF-α 是一种有广泛促炎活性的细胞因子，在动脉粥硬化的形成过程中发挥重要作用。HHcy能引起许多炎症递质释放，引起单核细胞、中性粒细胞粘附内皮细胞，导致动脉粥样硬化的形成。研究发现，Hcy水平升高与认知障碍有关，表现在视空间技能、记忆、非文字记忆、信息处理速度等认知领域，特别是注意和执行功能障碍。

本研究表明脑血管病患者Hcy水平和HHcy发病率均高于对照组，与Wu等[9]研究结果一致。研究组患者的叶酸和维生素B12含量降低，说明叶酸和维生素B12是半胱氨酸的关键辅助因子。研究组患者的hs-CRP、MMP-9、TNF-α表达水平上调，提示Hcy水平升高促进了炎症相关因子的表达。对研究组Hcy水平与认知功能的相关性进行Pearson分析发现，血浆Hcy水平与MoCA、MMSE得分呈负相关，提示高Hcy水平可以诱发认知功能损伤。