参黄止痒凝胶剂的制备工艺研究

任思微 王梓丞 朱艳华*

（1、黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨150000 2、齐齐哈尔医学院附属第一医院药剂科，黑龙江 齐齐哈尔161041）

中药凝胶剂作为中药外用的新型制剂，兼具避免首关效应、提高生物利用度、减轻药物不良反应、便于携带等优势[1]。经大量文献与大量湿疹外用方用药规律分析，苦参、黄柏和地肤子在治疗小儿湿疹方面有着显著的疗效且具有很高的使用频率[2-4]。本文将以苦参、黄柏、地肤子三味中药材为主药，用于治疗婴幼儿湿疹，选用凝胶剂通过皮肤进行局部给药，为中药复方制剂研究提供新的思路和研究方法。

1 材料

R-205 型旋转蒸发仪（上海申胜生物技术有限公司）；DELTA320 型pH 计（梅特勒- 托利多仪器上海有限公司）；HZS-HA 型水浴振荡器（哈尔滨市东联电子技术开发有限公司）；黄柏、苦参、地肤子（哈尔滨人民同泰药店）；二甲苯（江苏兴华化工厂）；右旋糖酐-40（山东齐都药业有限公司）；卡波姆-940（北京市海淀区会有化工厂，批号220527）；PEG-400（北京益利精细化学品有限公司，批号21007）；丙二醇（天津市恒兴化学试剂制造有限公司，批号20180112）；三乙醇胺（天津市瑞金特化学品有限公司，批号20180310）。

小鼠（昆明，雌雄各半，体重18～22g，黑龙江中医药大学GLP 实验室提供）。

2 方法与结果

2.1 处方比例筛选

2.1.1 处方药材提取液的制备

分别按比例1:1:1、1:2:1、2:1:1 称取黄柏、苦参、地肤子共30g，加8 倍量水，煎煮3 次，每次提取2h。将提取液减压浓缩至生药量0.5g/ml。

2.1.2 右旋糖酐致瘙痒试验

取昆明种小鼠40 只, 随机均分为空白对照组、1:1:1 组、1:2:1 组、2:1:1 组。在小鼠背部剃毛并均匀涂抹受试药液或对照液，2次/天，连续3 天，每次给药量为0.2ml。末次给药1h 后，于各组小鼠尾静脉注射0.025%右旋糖酐5ml·kg-1，以小鼠前爪搔抓头部，后爪搔抓躯干，嘴咬全身各部位作为搔痒指征，观察并记录30min 内小鼠搔痒次数及搔痒持续总时间[5]。结果见表1。

*p＜0.05，与空白组相比，不同处方比例的水提取液均具有较好的抑制瘙痒作用，其中苦参、黄柏、地肤子处方比例为1:2:1时具有最佳止痒效果，瘙痒持续时间居中，而处方比例1:1:1 的瘙痒时间最短，止痒效果居中。

表1 不同处方比例的提取液对右旋糖酐致小鼠瘙痒的影响（±s）

表1 不同处方比例的提取液对右旋糖酐致小鼠瘙痒的影响（±s）

空白组 0.0 27.4±4.73 - 24.7±4.2 1：1：1 0.2 17.6±1.79* 37.03% 15.0±3.2* 1：2：1 0.2 16.8±3.42* 40.74% 19.0±2.87* 2：1：1 0.2 20.7±2.17* 25.93% 18.0±3.57*

2.1.3 二甲苯致耳肿胀试验

取小鼠40 只，将小鼠随机分成4 组，每组10 只，分别为空白对照组、1:1:1 组、1:2:1 组、2:1:1 组，每组小鼠右耳涂上二甲苯0.03ml/只。0.5h 后用相同剂量的上述药物分别涂抹于每组小鼠右耳，对照组涂相同量的蒸馏水。4h 后将小鼠颈椎脱臼处死，将双耳剪下，在双耳的相同部位用6mm 直径的打孔器打下相同大小的圆耳片，分别称重，计算耳肿胀度和耳肿胀抑制率[6]。结果见表2。

耳肿胀度=右耳片质量－左耳片质量。

耳肿胀抑制率（%）=（阴性对照组肿胀度- 给药组肿胀度）/阴性对照组肿胀度×100%。

表2 不同处方比例提取液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（±s）

表2 不同处方比例提取液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（±s）

*p＜0.05，与空白组相比，不同处方比例水提取液均具有较好的抑制瘙痒作用，苦参、黄柏和地肤子处方比例1:1:1 的抗炎作用最佳。

组别 剂量/ml· 只-1 耳肿胀度/mg 抑制率/% 空白组 0.03 13.76±2.00 - 1:1:1 0.03 7.33±1.38* 46.73 1:2:1 0.03 8.86±2.62* 35.61 2:1:1 0.03 9.53±2.23* 30.74

2.2 参黄止痒凝胶剂的制备

在适量的蒸馏水中均匀散入凝胶剂基质卡波姆940，溶胀12 小时。用三乙醇胺调节pH 值至6，搅拌至凝胶状。另取苦参、黄柏、地肤子共10g 提取，提取液浓缩至1g/ml，分别将氮酮、PEG-400 、丙二醇加入至提取液浓缩液中，与卡波姆凝胶混匀，用蒸馏水定容至规定量，搅拌均匀后即得参黄止痒凝胶剂。

2.3 体外释放行为测定

精密称取6g 参黄止痒凝胶剂，放在长8cm*宽4cm 的模拟皮肤环境的透析袋中，以20%的乙醇生理盐水400mL 作为凝胶剂的释放介质，温度为（37.0±0.5）℃[7]，转速为（100±1）r·min-1，测定时间点为1/2h、1h、2h、3h、6h、，在269nm 处的吸光度，考察指标为Q 值，计算公式如下：（v：接受池体积400ml；Ci：第i 次取样时的质量浓度；m：凝胶剂中总碱的质量）

2.4 参黄止痒凝胶剂处方的单因素考察

2.4.1 卡波姆的用量筛选

参黄止痒凝胶剂中卡波姆用量分别设为1%、1.2%、1.5%、2.0%，按2.2 制备参黄止痒凝胶剂，分别进行体外释放试验考察，在6h 时测定Q 值。结果见表3。结果显示：随着卡波姆的浓度增大，参黄止痒凝胶剂的粘度也随之增大，释药阻碍力不断增大，致使考察指标Q 值也随之减小，与卡波姆用量成负相关，因此卡波姆的用量考察最佳为1%。

表3 卡波姆浓度对参黄止痒凝胶体外释放的影响（n=3）

2.4.2 pH 调节剂的选择

用pH 值调节剂三乙醇胺将凝胶剂的pH 值分别调至5.5、6.0、6.5、7.0，按2.2 制备凝胶剂，分别进行体外释放试验，在6h时测定Q 值。结果见表4。实验结果显示：pH 值为6 时，药物释放量最大，故选择最佳pH 值为6。

表4 pH 值对参黄止痒凝胶体外释放的影响（n=3）

2.4.3 保湿剂用量的筛选

保湿剂PEG-400 的用量分别为5%、10%、15%、20%，按2.2制备凝胶剂，分别进行体外释放试验，在6h 时测定Q 值。结果见表5。实验结果显示：当保湿剂PEG-400 的用量为5%时效果最佳。

表5 PEG-400 用量对参黄止痒凝胶体外释放的影响（n=3）

2.4.4 助溶剂用量的筛选

丙二醇的用量分别选择5%、10%、15%、20%，按2.2 制备凝胶剂，分别进行体外释放试验，在6h 时测定Q 值。结果见表6。实验结果显示：在PEG-400 用量为5%，丙二醇的用量选择5%时，保湿剂效果最佳。

表6 PEG-400 与丙二醇合用对参黄止痒凝胶剂体外释放的影响（n=3）

2.5 参黄止痒凝胶剂处方用量

对凝胶剂中的基质和辅料进行初步的选择，通过单因素考察确定了参黄止痒凝胶剂的最佳处方用量，确定最终处方用量为中药提取液10ml，卡波姆0.5g，PEG-400 2.5g，丙二醇2.5g，氮酮0.25g，三乙醇胺调pH 至6，加蒸馏水至50g。

3 结果与讨论

本研究选用苦参、黄柏和地肤子三味中药材为主药，用于治疗婴幼儿湿疹，选用凝胶剂通过皮肤进行局部给药，提高生物利用度。所制备的凝胶剂质地均匀细腻、易于涂布、无毒无刺激性、释药性好，该制备工艺方法简便易行，益于产业化。