慢性丙型肝炎患者血小板及其相关参数与HCV RNA 载量的相关性研究

邵林楠 ,刘 铭 ,周世航*

1.大连市血液中心 血型室,辽宁 大连 116001;2.大连医科大学 细胞生物学教研室,辽宁 大连 116044

慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球性公共卫生问题。大部分慢性患者会逐渐发展为肝硬化、肝癌和肝功能衰竭,只有15%～45%的感染者会自动消除病毒[1]。根据最新全国病毒性肝炎血清流行病学调查,我国HCV 感染的流行率约为0.43%,各地区间存在差异,长江以北 (0.53%) 高于长江以南地区(0.29%)[2]。

HCV RNA 是HCV 病毒复制的直接标记,可以用作HCV 活动性感染的重要确认性诊断。HCV RNA 载量水平也是评估HCV 感染患者病毒负荷、监测抗病毒治疗效果的标准。血小板(PLT)及其相关参数[平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、大血小板比率(P-LCR)、血小板压积(PCT)和平均血小板体积与血小板计数比率(MPR)]有着易于测量、经济简便等特点。一些研究报告[3-5]证实,PLT 及其参数可提供有关慢性HCV 感染患者肝纤维化严重程度的信息。然而在慢性HCV 感染患者中,PLT 及其参数与HCV RNA 载量的关系却知之甚少。本研究旨在分析慢性HCV 患者PLT 及其参数和病毒RNA 载量的关系,为临床治疗提供了参考依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象

研究对象为192例大连地区慢性HCV 感染患者,其中男103 例、女89 例,平均年龄(53.86±13.96)岁,无其他肝脏肾脏等疾病。所有患者均符合丙型病毒性肝炎诊断标准(WS213-2008)。

1.2 设备仪器

所有血液样本均以相同方式采集:在室温(约22 ℃)下采集2 mL外周全血于EDTA 抗凝管中保存。在1 h内用自动血液分析仪(XT-1800i,日本Sysmex公司)检测PLT 指数。HCV RNA 病毒载量采用全自动核酸分离纯化及检测系统COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 及其配套试检测,严格按照试剂盒说明进行,用以10为底的对数形式表示。

1.3 统计学方法

通过SPSS 21.0 统计软件 Kolmogorov-Smirnov检验验证数据是否符合正态分布。对于符合正态分布的数据以±s形式表示,两组数据差异采用t检验进行比较,偏态数据则以中位数(四分位间距)形式表示,比较两组数据差异采用Mann-Whitney U 秩和检验。使用Spearman相关分析进行两参数相关性分析。P<0.05 认为差异存在统计学意义。

2 结果

HCV 患者临床指标见表1。HCV RNA 载量与PLT 及其相关指标间的相关性分析结果见图1。HCV RNA 载量与PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT及MPR 等指标均不相关(P>0.05)。进一步将患者按照性别及年龄分组,通过Spearman相关性分析发现,HCV RNA 载量与PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等指标均不相关(P>0.05),见表2。将受试者按照HCV RNA 载量的数量级进行分组,结果见表3。在不同病毒载量组中将PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等指标进行比较,结果不存在统计学差异,P>0.05。

表1 HCV 患者临床指标

表2 HCV RNA 载量与PLT 及其相关指标间的相关性分析(按照性别及年龄分组)

表3 不同HCV RNA 载量组间各指标比较结果

图1 HCV RNA 载量与PLT 及其相关指标间的相关性分析

3 讨论

PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等PLT 相关参数可反应PLT 的生成及功能状态。PDW 是PLT 体积大小异质性的一种度量。MPV描述了平均PLT 体积,可反映PLT 活化和炎症进展。PLT 初期体积较大,在衰老后会逐步萎缩,且功能下降。P-LCR 是大于12 fL的PLT 的百分比,PCT 可间接反应PLT 活性物质及所含颗粒的多寡,MPR 是整合了PLT 形态与数量的复合指标。关于PLT 和MPV 的研究较为广泛,相对于PLT和MPV,其他PLT 参数容易被忽视。在慢性HCV感染所致血液系统疾病中PLT 减少症发生率较高,随着HCV 感染者的肝病严重程度增加PLT 减少症发病率也明显增加[3]。PLT 减少症与PLT 相关参数的改变是密切相关的,因为PLT 减少不仅反映了PLT 的破坏,而且反映了PLT 的生成能力[6]。

有研究[3-4,6-7]发现,慢性HCV 感染患者PLT及其相关参数与肝纤维化程度密切相关,而肝纤维化程度与HCV RNA 载量并不相关[8-11],因此我们推测慢性丙型肝炎患者PLT 及其相关参数与HCV RNA 载量不相关。本研究的目的在于慢性丙型肝炎患者PLT 及其相关参数与HCV RNA 载量的相关性。研究结果表明,无论是在全部患者群体中还是根据不同年龄性别分层研究中,PLT 及其相关参数与HCV RNA 载量均不相关,而且在不同病毒RNA 载量层组间也未发现PLT 及其相关参数存在显著的统计学差异。说明在慢性HCV 感染患者中PLT 及其相关参数与HCV RNA 载量是不相关的,与上述假设结果一致。然而,我们也见到相反结果的报道。张夏等[12]发现在慢性HCV 感染患者中HCV RNA 载量和MPV 呈正相关性,和PLT 和PCT 呈负相关性,和PDW 相关性分析无统计学意义。姜源等[13]发现HCV 患者MPV 与HCV RNA载量有微弱的正相关关系。我们的结果与上述学者的结果不一致的原因可能是因为以下几点:①就HCV 感染而言,导致PLT 减少有多种原因,如肝纤维化相关因素、HCV 肝外复制,特别是在骨髓中的HCV 复制、与自身免疫性PLT 减少症无关的PLT清除或消耗增加、脾隔离症、PLT 生成素含量或活性降低都可能在慢性HCV 感染患者的PLT 计数中起重要作用[14]。而其他疾病也会影响PLT 参数,如外周动脉疾病、急性冠脉综合征、自身免疫性疾病、甲状腺功能异常、局部或全身感染、炎症性疾病等[15]。因此,患者病情不同或有其他上述并发症都会对PLT 参数产生影响,造成抽样误差。②检测时限。在EDTA 抗凝管保存过程中,PLT 形态会随着时间的推移而改变[16],因此分析前的等待时间过长可能会影响PLT 参数的真实结果。③样本数量相对较少。

总之,本研究检测结果表明,慢性HCV 感染患者PLT、PDW、MPV、P-LCR、PCT 及MPR 等PLT相关参数与HCV RNA 载量不相关。但后续研究中还需更严格的患者选择条件、更精准的检测时限及更大数量的样本加以确认。