超声弹性成像联合Toll 样受体4检测对乳腺癌的诊断价值

孙迎燕 唐杰露 李彩娟 王 涛 姚丽红

DiagnosticValueofUltrasoundElastographyCombinedwithToll-likeReceptor4DetectioninBreastCancer.SunYingyan，TangJielu，LiCaijuan，etal.DepartmentofUltrasound，TheAffiliatedHongqiHospitalofMudanjiangMedicalUniversity，Heilongjiang157011，China

AbstractObjectiveTo evaluate the diagnostic value of ultrasound elastography combined with Toll-like receptor 4(TLR4) detection in breast cancer.MethodsA total of one hundred and twenty-three patients with breast disease admitted to the Affiliated Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical University from January 2017 to December 2018 were selected as subjects. Two-dimensional ultrasound and ultrasound elastography were performed before surgery or pathological biopsy and scored. TLR4 expression was detected by immunohistochemical staining and scored. The pathological results were used as the gold standard，and the diagnostic value of ultrasound elastography combined with TLR4 detection for breast cancer was compared.ResultsThe accuracy，sensitivity and specificity of ultrasound elastography combined with TLR4 detection were better than those of the single detection，the difference was statistically significant(P<0.05).ConclusionUltrasound elastography combined with TLR4 detection can improve the accuracy of breast cancer diagnosis.

KeywordsBreast cancer；Diagnostic value；Ultrasound elastography；Toll-like receptor 4

乳腺癌是常见的严重威胁世界女性健康甚至生命的重大疾病之一，其发生、发展是一个极其复杂的、多基因参与的、由细胞网络调控的过程[1，2]。据统计，截至2008年，世界范围内乳腺癌占女性癌症新发病例的23%，女性癌症死亡病例的14%[3]。2005～2013年间我国女性乳腺癌发生率和病死率城市均比农村高，然而农村女性乳腺癌发生率和病死率呈明显的上升趋势[4]。因此对于乳腺癌患者而言，早期准确的诊断显得尤为重要。乳腺超声检查是乳腺癌筛查的常用影像技术，其优势为价格便宜且无创，患者顺应性高。超声弹性成像是近年来发展的新的影像技术，可参照病灶硬度的不同确定患者乳腺肿瘤性质，所获得的信息可作为普通超声的重要补充。但是由于早期乳腺癌病灶不大，触诊不易触及，声像学特征不典型等特征，而存在部分患者出现漏诊、误诊现象[5，6]。有研究证实，Toll 样受体4(toll-like receptor 4，TLR4)在乳腺癌细胞中呈高表达，并且与乳腺癌细胞的迁移、侵袭有关[7，8]。为提高乳腺癌检查的准确率，降低漏诊、误诊现象，本研究对乳腺病患者进行了超声弹性成像联合TLR4检测，旨在探讨其对乳腺癌的诊断价值。

资料与方法

1.一般资料：(1)收集牡丹江医学院附属红旗医院2017 年1 月～2018 年12 月门诊或住院部收治的乳腺病患者。(2)纳入标准：①经超声发现乳腺肿块者；②经超声引导下穿刺活检或手术切除者；③病理诊断明确者；④术前未曾放疗、化疗或者内分泌治疗者。(3)排除标准：①临床资料不全或者缺失者；②精神病患者或者不能配合检查者；③由其他部位肿瘤转移至乳腺部位者；④哺乳期者；⑤其他不符合本研究拟纳入标准者。最终共纳入患者123例，均为女性；患者年龄29～75岁，平均年龄48.53±6.72岁；体重指数(body mass index，BMI)19.3～26.1kg/m2，平均BMI 22.56±3.49kg/m2。所有参与本研究的患者(或家属)均知悉同意本研究，并签署书面同意书。本研究经牡丹江医学院附属红旗医院医学伦理学委员会批准并受其监督。

2.超声检查：患者取仰卧位，双手自然上举，充分暴露乳房和腋窝。嘱患者平静呼吸。仪器为GE-LOGIQ S8型彩色超声诊断仪，探头频率6.0～13.0MHz。先对双侧乳房按照乳头-乳晕-外上-外下-内下-内上象限的顺序进行二维灰阶超声检查，记录其特点，并根据二维特征判断良恶性肿块。继而切换至弹性成像模式，先将设备调整到弹性成像感兴趣区(ROI)，手持探头垂直于病灶部位对组织施加一定压力，压力指标的数字控制在3～4级，双幅实时显示功能，同时观察二维图像与弹性图像，当病肿块体积较大时对肿块分区域观察。操作由同一位医生完成，同时由另外同一位医生复核。当两位医生诊断意见不一致时，由副主任医师以上职称医生做出最后诊断。采用5分法对肿块硬度进行评分[9]：肿块整体或大部分显示为绿色=1分；肿块范围内显示为绿色和蓝色所占比例相近，以绿色为主=2分；肿块显示中心为蓝色，周边为绿色=3分；病灶整体为蓝色或伴有少许绿色=4分；肿块和周边组织均显示为蓝色，内部伴有或不伴有绿色=5分。1～3分诊断为良性，4～5分诊断为恶性。

3.TLR4检测：收集患者穿刺标本，采用免疫组织化学染色检测TLR4表达。采用半定量方法进行TLR4评分[10]。首先根据TLR4阳性细胞所占的百分比评分：≤5%=0 分；6%～25%=1分；26%～50%=2分；51%～75%=3分；>75%=4分；其次再根据染色强度评分：无色=0分；淡黄色=1分；黄色=2 分；棕黄色=3 分。最后将两项相乘由此将结果：0～2分=“-”；3～4分=“+”；5～8分=“++”；9～12分=“+++”4个等级。≥3 分诊断为恶性。

结 果

1.病理结果：123例乳腺病患者经病理检测发现58个良性病灶，65个恶性病灶。具体病理类型见表1。

表1 病理结果[n(%)]

2.二维超声特征与病理结果比较：经二维超声检测发现乳腺恶性肿瘤病灶形状、边缘、内部回声、后方衰减、微小钙化、血供、淋巴转移等特征与良性肿块比较，差异有统计学意义(P<0.05,表2)。

表2 二维超声特征与病理结果比较(n)

3.超声弹性成像评分与病理结果比较：经超声弹性成像检测发现，乳腺恶性肿瘤超声弹性成像评分与良性肿块比较，差异有统计学意义(χ2=67.331，P<0.05，图1，表3)。

表3 超声弹性成像评分与病理结果比较(n)

图1 乳腺超声弹性成像图A.患者,女性，39岁，常规二维超声发现右侧乳腺肿块，超声弹性成像评分2分，病理结果为乳腺肌瘤；B.患者，女性，56岁，常规二维超声显示右侧乳腺内部回声不均匀，边缘不清，超声弹性评分4分，病理结果为浸润性导管癌伴淋巴转移

4.TLR4评分与病理结果比较：经免疫组织化学染色发现，乳腺恶性肿瘤TLR4评分与良性肿块比较，差异有统计学意义(χ2=36.235，P<0.05，图2，表4)。

表4 TLR4评分与病理结果比较(n)

图2 TLR4免疫组织化学检测结果(×40)A.TLR4阴性表达；B.TLR4阳性表达

5.超声弹性成像联合TLR4检测与病理结果比较：超声弹性成像联合TLR4检测的阳性率明显高于单独检测，差异有统计学意义(P<0.05，表5)。

表5 超声弹性成像联合TLR4检测与病理结果比较(n)

6.超声弹性成像联合TLR4检测对乳腺癌的诊断价值分析：超声弹性成像联合TLR4检测准确率，敏感度和特异性显著高于单独检测，差异有统计学意义(P<0.05，表6)。

表6 超声弹性成像联合TLR4检测对乳腺癌的诊断价值分析(%)

讨 论

常规二维超声能够依据病灶形状、边缘、内部回声、后方衰减、微小钙化、血供、淋巴转移等特征来判断肿瘤的良恶性，对声像特征表现典型的不难作出诊断[11，12]。本研究通过对二维超声特征与病理结果比较表明，良恶性乳腺肿瘤的二维超声特征存在差异。倘若乳腺癌处于早期，由于病灶尚没有侵袭基膜或者虽然侵袭基膜但是并没有扩散到周围组织，间质反应不明显，恶性声像图表现不典型，导致常规二维超声对乳腺癌的良恶性诊断具有一定的局限性，漏诊率和误诊率较高[13，14]。

超声弹性成像是在常规二维超声基础上发展而来的一种检测技术，其特点为可以将病变的硬度以彩色色阶实时呈现，通过弹性评分来判断肿瘤的良恶性，能够在一定程度上弥补常规二维超声的不足，有助于鉴别诊断乳腺病灶的良恶性[15，16]。虽然超声弹性成像技术应用在肿块的良恶性鉴别中准确率较高，但是仍旧存在漏诊、误诊现象[17]。原因可能与良性肿块中钙化灶的出现或部分良性肿瘤中纤维组织较丰富，导致弹性硬度相对增大有关[18]。TLR4是Toll样受体(toll-like receptors，TLRs)家族中的一员，可感受入侵的病原微生物，主要存在于免疫细胞[19，20]。TLR4激活的信号通路与肿瘤的发展密切相关，尤其是上皮来源的肿瘤，可参与肿瘤细胞的侵袭、转移、免疫逃逸等。近年来研究发现，TLR4在乳腺癌和癌旁组织均具有明显不同程度的高表达，且乳腺癌组织TLR4的表达较癌旁组织显著增高[21，22]。也有研究表明，乳腺癌组织TLR4表达上调与其组织学分级和TNM分期呈正相关，即组织学分级和TNM分期越高，TLR4的表达亦越高，提示TLR4在临床乳腺癌的筛查中具有一定的价值，为乳腺癌分化不良的重要标志[23]。

研究表明，针对乳腺癌组织的TLR4进行RNA干扰可一定程度上抑制乳腺癌细胞的增殖和存活，继而达到治疗乳腺癌的目的[24]。本研究进行了超声弹性成像联合TLR4检测，其检测准确率、敏感度和特异性明显高于单独检测。分析原因可能是因为单独诊断各具优势，但又存在一定的局限性，而联合检测弥补了单一检测的不足，提高了乳腺癌早期诊断的准确性。本研究的不足之处在于研究样本数和地域的限制，研究数据可能有一定的偏差。笔者课题组将会进一步在乳腺癌的早期诊断方法深入研究。

综上所述，超声弹性成像联合TLR4检测对乳腺癌的早期诊断提供了一定的依据，为手术方式选择及术后治疗提供指导，值得在临床工作中推广。