磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1表达水平与胃癌患者相关病理学参数的关联性分析

侯志斌 刘春艳 郭新建

【摘 要】 目的：研究磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK-1）表达水平与胃癌相关病理学参数的关联性。方法：选取我院2018年6月～2019年6月胃癌患者88例为胃癌组，并按照2：1的配比选择同期健康体检者44名为健康组。两组均测定PDK-1水平，并分析其与胃癌病理学参数的关联性。结果：胃癌组PDK-1水平高于健康组，PDK-1阳性表达率86.36%高于健康组4.55%（P<0.05）;PDK-1表达阳性在胃癌患者管状腺癌、高分化、Ⅲ～Ⅳ期、有浸润、淋巴结有转移等病理学参数中占比高于表达阴性（P<0.05）。结论：胃癌患者中PDK-1表达水平高于正常胃黏膜组织，且与病理学参数具有相关性，可作为胃癌生物标志物，指导临床诊断与治疗。

【关键词】 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1;胃癌;病理学参数;关联性

胃癌是临床常见胃肠道恶性肿瘤，发生率、死亡率均较高，且大多数患者确诊时已为晚期，且易发生转移[1]。临床需依据胃癌发生、发展规律，寻找新的胃癌生物标志物，对胃癌早期进行诊断、治疗具有重要意义。磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（PDK-1）属于单体多肽酶，与多种癌症发生、发展密切有关，可促进肿瘤细胞增殖、加快血管生成速度。本研究选取我院胃癌患者88例，旨在探讨PDK-1与病理学参数的相关性。现报告如下。

1 資料和方法

1.1 一般资料 选取我院2018年6月～2019年6月胃癌患者88例为胃癌组，并按照2：1的比例选择同期健康体检者44名为健康组。健康组男22例，女22例;年龄55～82岁，平均（63.57±4.10）岁。胃癌组男46例，女42例;年龄56～83岁，平均（64.38±4.26）岁;病程3～8年，平均（5.98±0.89）年。两组基线资料（性别、年龄）均衡可比（P>0.05）。

1.2 纳入及排除标准 （1）纳入标准：经病理组织学、胃镜等检查确诊为胃癌;预计生存期>3个月;均签署知情同意书。（2）排除标准：肝肾功能不全;神经系统病变、精神障碍;胆汁瘀积;其他恶性肿瘤;严重高血压;血液系统疾病。

1.3 方法 （1）PDK-1水平测定：取胃癌组胃癌组织、健康组胃黏膜组织0.1g，加入液氮（少量），于研钵中迅速碾碎至粉末状，转移至Eppendorf管中（2ml），加入pH为7.4的磷酸缓冲液（PBS）1.2ml，充分震荡后混匀，于4℃下12000r/min的速度离心20min后收集上清液;获取胃组织匀浆后，采用上海恒远生物科技有限公司生产的试剂盒以Elisa法测定PDK-1表达水平。（2）PDK-1阴、阳性表达：采用免疫组化法，制作常规5μm胃癌组织、正常胃黏膜石蜡切片，以常温3% H2O2阻断内源性过氧化氢酶活性，微波进行抗原修复，以PBS冲洗;采用英国Albcam公司生产的1% PDK-1抗体工作液，在4℃下过夜，加入二抗（IgG），于室温下防止30min，加入链霉素抗生物素蛋白-过氧化物，以PBS冲洗，二氨基联苯胺（DAB）进行显色，复染采用苏木素，脱水采用梯度酒精，透明采用二甲苯，封片。结果统计：随机选择5个（×400）高倍视野进行计数，棕褐色为3分，棕黄色为2分，淡黄色为1分，无色为0分;棕黄色及以上细胞计数≤5%为（-），6%～25%为（+），26%～50%为（++），>50%为（+++），其中（-）、（+）为阴性，（++）、（+++）为阳性。

1.4 观察指标 （1）两组PDK-1水平及表达。（2）PDK-1表达与病理学参数关联性。

1.5 统计学方法 采用SPSS22.0对数据进行分析，计数资料以n（%）表示，行χ2检验，计量资料以（x±s）表示，行t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PDK-1水平及表达 胃癌组PDK-1水平高于健康组，PDK-1阳性表达率86.36%高于健康组4.55%，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 PDK-1表达与病理学参数关联性 PDK-1表达阳性在胃癌患者管状腺癌、高分化、Ⅲ～Ⅳ期、有浸润、淋巴结有转移等病理学参数中占比高于表达阴性，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

近年来胃癌发病率逐渐升高，且早期癌变症状不明显，早期预防、诊断、治疗具有重要意义。

本研究对PDK-1水平进行测定，结果显示胃癌组PDK-1水平高于健康组，PDK-1阳性表达率86.36%高于健康组4.55%（P<0.05）。PDK-1能活化PI3K/PKB信号传导通路，调节肿瘤细胞增殖、转移、侵袭，因此在胃癌组织与正常胃黏膜组织中表达存在较大差异。本研究结果还显示，PDK-1表达阳性在胃癌患者管状腺癌、高分化、Ⅲ～Ⅳ期、有浸润、淋巴结有转移等病理学参数中占比高于表达阴性（P<0.05），与张颖等[2]学者研究一致。PDK-1过量表达时，导致游离蛋白积聚于细胞内并进入细胞核，激活WNT信号通路，导致靶基因异常转录，过度表达，促进细胞大量繁殖并分化，最终发生癌变。且病理学分级、TNM分级越高，浸润深度越深，淋巴结发生转移，PDK-1阳性表达率越高，二者具有相关性，可作为诊断胃癌的生物标志物。

综上所述，胃癌患者中PDK-1表达水平高于正常胃黏膜组织，且与病理学参数具有相关性，可作为胃癌生物标志物，指导临床诊断与治疗。

参考文献

[1] 丁雪莲.β-细辛醚通过调控胃癌PDKs表达增加化疗敏感性研究[D].南京中医药大学，2017.

[2] 张颖，孙志鹏，余春开，等.胃癌患者癌组织中PDK-1蛋白表达水平及其临床意义[J].中国煤炭工业医学杂志，2018，21（03）：298-303.