全自动浸染式染色机应用体会和对效率的影响

卢蕊 天津市南开医院病理科 （天津 300100）

内容提要： 目的：总结全自动浸染式染色机的应用体会以及其应用对效率的影响。方法：选取2018年9月～2019年10月本院病理组织切片，按照来自不同组织（胃，肠，肝脏，子宫颈，皮肤）分为五组，并用全自动浸染式染色机进行染色。染色结束后统一对切片进行镜检，根据切片是否合格，胞核、胞质染色效果进行评分，并进行统计学分析。结果：使用全自动浸染式染色机进行染色效率明显提高，细胞结构清晰，红蓝对比适宜，染色质量稳定。不同组织染色评分近似，五组切片数据差异无统计学意义（P＜0.05）。结论：全自动浸染式染色机对提高染色效率和稳定染色质量具有重要意义。

随着病理技术的发展，传统的手工染色逐渐被淘汰，全自动染色机以其效率高、可以批量染色等特点成为当前主要的染色方式。近年来，有关全自动染色机在应用过程中的特点及染色效果的研究取得了良好的结果，其中，根据传统HE染色的流程确定最合理的染色程序，减少干扰因素是保证全自动染色机染色质量的关键。目前，全自动染色机的染色方式主要有浸染式与滴染式两种，全自动浸染式染色机与全自动滴染式染色相比，染色设备与试剂的成本较低[1]，滴染式染色机的经济要求相对较高，且与传手工染色相比，染色制片所需要的时间明显减少，染色效率有很大程度的提高，染色质量稳定，结构清晰[2]。然而，由于HE染色步骤较多，影响因素较多，以及全自动染色机的使用对操作人员提出了新的技术要求，在使用全自动染色机染色的过程中，仍有脱片、染色效果不理想等情况出现。基于此，结合长时间使用经验，本文将对全自动浸染式染色机的应用体会进行总结和评价，为全自动浸染式染色机在病理学的应用提供依据。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年9月～2019年10月本院病理组织切片400例，均采用石蜡固定切片，切片厚度大致相同。

1.2 仪器与材料

全自动浸染式染色机，二甲苯，无水乙醇，80%乙醇，95%乙醇，苏木精染液，伊红染液，1%盐酸乙醇，

1.3 研究方法

首先将切片分为1～5五组，分别选取来自胃，肠，肝脏，子宫颈，皮肤的病理组织切片，在载玻片一侧用标签标记好组别后开始进行染色。将切片置于70°的恒温箱中进行烤片，持续20min，便可放入全自动染色机进行染色。将全自动染色机的染色程序设置为：（1）用二甲苯、无水乙醇进行脱蜡，均设置为两次，每次10min；（2）染色：苏木精染液染色5min，之后依次用蒸馏水冲洗3s、盐酸乙醇溶液冲洗2s，用0.6的氨水进行反蓝5min后蒸馏水冲洗3s，之后进行5%伊红染液染色3min，染色后用蒸馏水冲洗10s；（3）脱水固封：染色结束后，依次将玻片放入95%乙醇溶液、二甲苯溶液中进行脱水，分别设置为两次、三次，时间分别设置为5s，3min，脱水结束后，用中性树胶进行封片。

1.4 切片染色评价

染色全部结束后统一对切片进行镜检与评价，根据镜检结果进行评分。首先判断切片染色质量是否合格，切片是否发生污染，若不合格则记为零分，若合格，则根据胞核、胞质的染色结果进行进一步评分，评分标准为优、良、差三个等级，分别记入3、2、1分，满分共6分。

1.5 统计学分析

应用SPSS19.0软件对数据进行统计学分析，评分结果用MEAN±SD表示。对五组计量资料进行方差分析，当P＜0.05时认为有统计学意义。

2.结果

2.1 全自动染色机可以同时对数张切片进行染色操作，将繁琐复杂的染色步骤程序化，从而缩短了HE染色需要的时间，提高了染色制片的效率。

2.2 全自动浸染式染色机进行染色，具有染色质量稳定，染色评分较高，切片污染率低等特点。五种组织的染色效果相近，五组切片组间差异无统计学意义，P＞0.05（见表1）。切片胞核染色清晰，颜色对比强烈，细胞透明度高，视野洁净。皮肤组织染色结果红蓝对比更加显著。

3.讨论

HE染色是石蜡切片染色最常用的方法之一，广泛应用于医院病理科室和病理实验室。随着病理技术的发展和医疗水平的逐渐提高，对于切片染色的质量和效率的要求也不断增高，是以全自动染色机的出现和应用对满足其高要求具有重要意义。因此，笔者结合实际使用经验，对全自动浸染式染色机的应用体会进行阐述。

表1. 染色评分统计表

HE染色步骤较多，因此传统的手工染色操作较为复杂，需要较多的人力资源，且易受人为操作因素的影响。随着技术的发展，手工染色的缺点更加突出。全自动染色机具有高效、稳定、且效果出色等优势，逐渐代替手工染色，尤其是在规模较大的医院中，得到了广泛应用，成为主要的HE染色方式。本研究对五种不同组织切片染色结果进行评分并进行统计学分析，发现不同组织的染色效果近似，且评分较高，方差小，提示全自动浸染式染色机通过对染色步骤、时间精准的控制，保证对不同组织来源的切片染色质量稳定。石蜡切片的染色颜色、对比度、细胞结构是否清晰是评价染色质量的重要标准[3]。本研究染色结果显示，全自动浸染式染色结果细胞结构清晰，染色质量优异，提示通过全自动浸染式染色机进行染色更容易对HE染色过程中的诸多影响因素进行控制，从而保证染色效果。

研究发现，全自动浸染式染色机的染色质量会随染色批次的增加而下降，因此在应用中需要及时地更换染色试剂，增加了操作人员接触染色试剂的频率，存在一定的不足[4]。笔者认为其可能的原因是烤片等过程的时间欠佳，以及浸染式染色的自身特点等。因此，在实际应用的过程中，不断优化染色流程和设计及各个步骤的时间，探究更加环保、有效的染色试剂，对提高染色效果有重要的意义[5,6]。

综上所述，本研究结果显示全自动浸染式染色机的使用对石蜡切片染色具有重要的意义，为全自动浸染式染色机在病理学的应用提供依据。