复方中草药添加剂对芦花鸡生长性能及肠道菌群结构的影响

于佳楠，王 晶，陈贝妮，韩金恒，候佳妮，王 健，姜云瑶 ，李朝辉，许春彦，牛淑玲*

(1.吉林农业大学 动物科学技术学院，吉林 长春 130118；2.长春科技学院，吉林 长春 130600；3.吉林大学 动物科学学院，吉林 长春 130062； 4.长春市畜牧总站，吉林 长春 130062)

自1946年MOORE等[1]发现链霉素具有促进肉仔鸡生长的功能后，抗生素及其添加剂为家禽业的发展做出巨大贡献，但长期大量使用抗生素导致耐药性、药物残留及污染环境等严重问题[2]。中草药来源于自然，含有大量有机复合物、活性物质与酶既可以满足畜禽的营养需求，又可加快动物机体新陈代谢促进生长。本研究通过在吉林芦花鸡饲粮中添加复方中草药，测定芦花鸡的生长性能、血清生化指标、激素水平及肠道菌群结构等，探究该复方中草药添加剂对芦花鸡生长性能的影响，为中草药添加剂在家禽无抗养殖生产中的应用提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验设计及日粮随机将600只1日龄芦花雏鸡分为Ⅰ、Ⅱ两组，每75只为1个重复组，每组4个重复。Ⅰ组饲喂基础日粮，Ⅱ组饲喂在Ⅰ组基础上添加0.3%复方中草药,试验期为84 d 。试验各组鸡均在同一鸡舍内饲养，自由采食、乳头式饮水器饮水和叠层笼养(2层)，自然光照以及常规免疫。本试验所用日粮配方见文献[3]。

1.2 实验动物及材料实验动物购自吉林省农业科学院鸡场，试验场地由吉林省农业科学院提供。复合中草药添加剂由长春市康发动物药品研究所提供，成分为黄芪、甘草、党参、陈皮、当归、白术和升麻共7味，其配比依次为6∶6∶4∶3∶3∶1∶1。

1.3 指标测定

1.3.1生长性能 于84 d末早晨8：00禁食12 h后空腹称试验鸡体质量，每个重复组随机称40只，统计耗料量，计算平均日增资料、平均耗料量及料重比。

1.3.2血清生化及激素指标 于84 d末每个重复组随机选取20只称质量，并进行翅静脉采血分离血清，-20℃冰箱中保存以备用，检测尿素、甘油三酯、总胆固醇和生长激素等指标，检测地点均为长春市金域医学检验中心。

1.3.3肠道菌群测定 于84 d末每个重复组随机选取1只采集盲肠内容物，对样品的16S rDNA V3+V4区进行高通量测序,检测地点为百迈客生物科技有限公司。

2 结果

2.1 复方中草药添加剂对芦花鸡生长性能的影响与Ⅰ组相比，Ⅱ组的平均日增质量提高12.07%(P<0.01)，饲料转化率改善7.75%(P<0.05)表1。

表1 复方中草药添加剂对芦花鸡生长性能的影响 g·d-1

2.2 复方中草药添加剂对芦花鸡血清生化指标及激素水平的影响与Ⅰ组相比，Ⅱ组尿素、甘油三酯水平分别降低10.40%和3.49%(P>0.05)，且生长激素水平提高9.89%表2。

表2 复方中草药添加剂对芦花鸡血清生化指标及激素水平的影响

2.3 复方中草药添加剂对芦花鸡肠道菌群的影响

2.3.1盲肠内容物测序结果分析 随着测序深度与样本量的增加样本曲线均趋于平坦且样本间共有物种趋于饱和，可进行数据分析(图1，2)。

2.3.2芦花鸡肠道菌群Alpha多样性指数分析 见表3。本试验各组的测序覆盖深度(Coverage指数)均在0.99以上，检测结果可用。与Ⅰ组相比，Ⅱ组Simpson指数值降低25.00%，Shannon指数值提高1.65%，说明该中草药添加剂提高了试验鸡肠道菌群的多样性。

图1 稀疏曲线分析

图2 物种累积曲线分析

表3 Alpha多样性指数

2.3.3复方中草药添加剂对芦花鸡肠道菌群结构分析 在门水平上(表4)，试验各组共同的优势菌门为拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门、螺旋菌门和互氧菌门5类。与Ⅰ组相比，Ⅱ组变形菌门与螺旋菌门分别降低17.28%(P<0.05)和10.84%(P>0.05)。在属水平上(表5)，试验各组鸡盲肠菌群中相对含量较高的菌属分别是拟杆菌属、理研菌科＿RC9菌群、脱磷孤菌属、考拉杆菌属、瘤胃球菌属和螺旋体菌属。与Ⅰ组相比，Ⅱ组瘤胃球菌属降低69.87%(P<0.05)；考拉杆菌属提高3.50%(P>0.05)。

表4 门水平物种分布 %

表5 属水平物种分布 %

3 讨论

3.1 复方中草药添加剂对芦花鸡生长性能的影响中草药在动物机体代谢过程会为动物机体提供蛋白质、氨基酸、糖、脂肪、淀粉、维生素、矿物质微量元素等丰富营养物质，从而达到促进生长的作用。陈皮中富含挥发油、川皮酮和黄酮类化合物等多种中药化学成分[4]，具有理气消食和健脾养胃功效，且党参对消化系统有调整胃肠运动功能，马方励等[5]试验证明党参多糖具有提高体质量及饲料利用率的作用，丁彩霞等[6]也研究表明以陈皮为主的复方中草药添加剂显著提高肉鸡的平均日增质量，提高饲料转化率，本试验结果与其一致。由此可见该添加剂对提高芦花鸡饲料利用率和生长有一定的促进作用。

3.2 复方中草药添加剂对芦花鸡血清生化指标和血清激素水平的影响本试验84日龄血清检测结果显示Ⅱ组尿素水平呈下降趋势，该结果与彭慧珍等[7]试验结果一致。分析原因可能是白术具有调节高脂血症的功效，在饲粮中添加白术对机体蛋白质和脂类的合成与代谢、肝脏的机能具有促进作用；而陈皮中的橙皮苷也能够抑制过多的胆甾醇与胰脂酶活性可以增加甘油三酯排出而降低血浆中胆固醇水平[8]；同时当归生物有效成分阿魏酸能够抗氧化和清除自由基，从而达到降低血脂作用[9]。84日龄的血清激素水平，Ⅱ组与Ⅰ组相比生长激素水平提高9.80%，可能是党参中多种营养因子及促生长因子，可通过促生长激素分泌因子作用于垂体，促进生长激素分泌达到促进机体生长的作用[10]。

3.3 复方中草药添加剂对芦花鸡肠道菌群的影响肠道微生物菌群被认为是一个重要“内源性器官”，其组成或代谢活性的改变可能会反过来影响宿主的健康，盲肠肠段的封闭性环境相比于小肠的快速运输环境，能够更长时间的储存内容物[11]。鸡盲肠中厚壁菌门和拟杆菌门在营养物质的消化吸收和宿主能量代谢中起着重要作用，变形菌门是细菌中最大的一门，包括多种病原菌。本试验结果显示试验Ⅱ组鸡盲肠中拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门均为主要的优势菌群。鄢伟伦等[12]研究中发现白术有改善肠道菌群状态的功能,试验组变形菌门相比于对照组显著降低17.28%，本试验结果与其一致，分析原因可能与白术中挥发油成分有关，挥发油在肠道系统中对多种细菌具有较好的抑菌活性，对大肠杆菌的抑菌率达到了29.74%[13]；还可能是甘草酸显著增加了活性氧和氮的产生，增加抗菌基因的表达，激活鸡巨噬细胞，增强吞噬细胞和沙门菌的杀伤能力[14]，且甘草黄酮对多种革兰阴性菌也具有较强的抑制作用[15]。

短链脂肪酸是碳水化合物经肠道微生物菌群发酵后的代谢产物，主要发生在细菌密集的盲肠，在肠道生理机能中起着重要的作用[16]。张俊杰等[17]研究表明来自厚壁菌门的考拉杆菌属、费氏杆菌属和梭菌属以及拟杆菌门的拟杆菌属均具有在肠道内发酵产生短链脂肪酸的能力。本试验结果显示，与Ⅰ组相比，属水平上Ⅱ组瘤胃球菌属显著降低69.87%，考拉杆菌属提高3.80%。可能是黄芪多糖能明显促进有益菌的生长，又可间接抑制致病菌的生长[18]。中草药中的蛋白质、多糖、脂类、微量元素和维生素等营养成分能够为胃肠道内的菌群微生物提供生长代谢底物，从而促进微生物的新陈代谢、调整菌群结构、提高有益菌群繁殖能力，但其作用机制有待进一步研究。