某地区非典型趋化因子受体1多态性与丙型病毒性肝炎易感性的研究

张树婷 邵林楠 周世航 王 霓 肖 南 刘 铭2

（1 大连市血液中心血型室，辽宁 大连 116001；2 大连医科大学细胞生物学教研室，辽宁 大连 116044）

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）发现于1989年，目前全球感染者已达到7100万，2015年全世界新增175万HCV感染者，这对发展中国家和发达国家都是一个严峻的公众健康问题。超过70%的丙型肝炎患者会发展为慢性HCV感染者，随着病情的进展会继续发展成肝硬化、肝癌甚至肝功能衰竭[1]。15%～45%的HCV感染者在未得到任何治疗的情况下，可通过强有力的免疫反应自动将病毒清除。据统计，我国的HCV感染人数达2500万，疾病流行率为0.43%～3.20%[2]。Duff y血型系统抗原又被称为Duff y抗原趋化因子受体或非典型趋化因子受体1（atypical chemokine receptors，ACKR1）。ACKR1是一种主要表达于细胞膜表面的糖蛋白，在肝、脾、肾的毛细血管微静脉，肾、肺的上皮细胞，以及小脑浦肯野细胞均有表达[3]。Duffy基因定位于1号染色体的长臂上，主要有3种等位基因，即FY*A、FY*B和FY*BES。核酸序列第125位的单核苷酸多态位点（single nucleotide polymorphism，SNP）（G125A，rs12075）是引起FY*A和FY*B等位基因差异的原因[4]。而FY*BES等位基因对应Fy（a-b-）基因型，是由启动子上游的SNP（T-33C，rs2814778）引起的[5]。红细胞膜上的ACKR1被形象的描述为趋化因子“槽”，可与趋化因子发生交互作用，清除多余的炎性趋化因子，减少炎性趋化因子释放到循环系统中，进而发挥调节炎性反应的作用。ACKR1的SNP与许多疾病相关，如中性粒细胞减少症、乳腺癌和恶性疟疾等[6-8]。有研究证实，红细胞膜上的补体受体与HCV相关，而ACKR1作为红细胞膜上的另一种受体，其多态性也可能会影响HCV的易感性[9]。目前，关于ACKR1的多态性是否与HCV易感性相关的研究较少。因此，本研究旨在调查大连地区人群ACKR1多态性与HCV易感性的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年4月至2015年12月就诊于大连市传染病医院的231例抗-HCV及丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）阳性的HCV感染者作为观察组，选取同期239名无血缘关系的健康献血者作为对照组。观察组DNA提取采用核酸自动纯化系统（RBC Bioscience,Lot，型号 SM-001-15102001），按照说明书严格操作。

1.2 ACKR1分型 ABI Prism 7300实时荧光PCR仪购自美国Applied Biosystems公司。使用TaqMan-MGB探针实时定量PCR技术对两组样本进行ACKR1基因分型[10]。

1.3 统计学分析 采用直接计数法对ACKR1基因型频率及基因频率进行计算。群体代表性检验采用Hardy-Weinberg遗传平衡检验。应用SPSS 21.0统计学软件对数据进行分析，基因型频率及基因频率的比较采用Fisher精确检验。P＜0.05为差异有统计学意义，并计算OR值及95%CI。

2 结果

两组ACKR1基因分型见表1。两组ACKR1基因型分布情况符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律（观察组P=0.26；对照组P=0.84），表明选取的人群具有代表性。观察组FY*A/FY*A、FY*B/FY*B和FY*A/FY*B的基因型频率分别为86.1%、0%和13.9%；对照组FY*A/FY*A、FY*B/FY*B和FY*A/FY*B的基因型频率分别为86.2%、0.4%和13.4%。两组基因型频率组间比较，差异有统计学意义（P=1.000，OR=1.004，95%CI：0.594～1.695）。观察组FY*A和FY*B的等位基因频率分别为93.1%和6.9%；对照组FY*A和FY*B的等位基因频率分别为92.9%和7.1%。两组等位基因频率比较，差异有统计学意义（P=1.000，OR=0.972，95%CI：0.589～1.603）。

表1 两组ACKR1基因型和等位基因分布

3 讨论

1950年，ACKR1被发现在红细胞表面表达，属于一种人类血型抗原。20世纪90年代，经临床实践发现ACKR1是白细胞介素-8和其他炎性趋化因子的受体。近些年，因ACKR1的SNP在诸多疾病中起到关键作用而逐渐成为人们关注的焦点。Jenkins等[7]研究发现，携带有等位基因FY*BES的乳腺癌患者倾向于特定的肿瘤表型，产生由ACKR1介导的肿瘤免疫应答。He等[11]研究结果证实，ACKR1-46C/C可以增加约40%的感染1型人类免疫缺陷病毒的风险。Gai等[8]临床试验发现，FY*B携带者可预防严重恶性疟疾。

本研究结果显示，两组FY*A/FY*A、FY*B/FY*B和FY*A/FY*B的基因型分布与FY*A、FY*B的等位基因分布未发现显著差异。无论在观察组还是对照组中，基因型FY*A/FY*A和等位基因FY*A频率均占绝对优势，而基因型FY*B/FY*B是罕见的，符合亚洲人群分布特征。本研究试验设计是基于假设——红细胞上补体受体与HCV有关[9]。考虑到红细胞上另一种受体ACKR1可吸附1型人类免疫缺陷病毒并转运给CD4+易感T细胞，所以推测ACKR1与HCV间会发生交互作用。但结果却发现，观察组和对照组中ACKR1的多态性差异无统计学意义。Lettow等[12]基于高加索人群的研究也得到了类似的结果，即ACKR1的SNP（rs12075）与HCV感染无关。由此推测，ACKR1的多态性（rs12075）不能直接影响HCV的易感性。对此结果可能的解释是，尽管红细胞膜上的ACKR1可与人类免疫缺陷病毒、趋化因子、疟原虫Duffy结合蛋白等配体发生复杂的交互作用，但不能结合HCV，其间没有交互作用发生。

综上所述，ACKR1的多态性（rs12075）不能直接影响HCV的易感性。但其多态性可显著影响趋化因子在血清中的表达水平。在HCV感染过程中，CC家族的趋化因子呈高表达状态，且与肝损伤程度有关[13]。在今后的工作中将会继续调查ACKR1多态性与HCV病程之间是否存在相关性。